拷贝数变异及其在眼病分子遗传学研究中的应用

拷贝数变异(CNV)是人类基因组内大于1kb的DNA片段拷贝数的异常变化,它广泛存在于正常个体,可能是人类表型变异的重要原因之一,是研究包括眼病在内的人类疾病的热点.目前认为CNV的形成机制可能是非等位基因同源性重组和非同源末端连接等所致.本文对CNV的多态性与表型变异、形成机制、检测方法及其在青光眼、白内障、虹膜发育不良、葡萄膜黑色素瘤、X-连锁眼白化病等眼病分子遗传学中的应用进行综述.     

随机对照研究比较表面麻醉与筋膜囊下麻醉在白内障小切口囊外摘除术中的效果

目的比较筋膜囊下麻醉与表面麻醉下白内障小切口囊外摘除术的患者的舒适度。方法将200名经小切口巩膜隧道囊外摘除术的患者随机分配到筋膜囊下(Tenon)麻醉组和表面麻醉组,表面麻醉组(n=100)用0.5%丙美卡因点眼;Tenon下麻醉组(n=100)筋膜囊下注射2%利多卡因。患者应用疼痛视觉模拟评分表对手术不同阶段(术中、术后刚结束及术后30 min)的疼痛进行评分,并记录手术的并发症。结果 Tenon麻醉组患者的术中、术后刚结束及术后30 min疼痛评分较表面麻醉组低,2组在控制眼球运动、眼睑挤压及总的合作满意度评分差异均有统计学意义。结论在经巩膜隧道白内障小切口囊外摘除术中,Tenon囊下麻醉比表面麻醉能够提供更好的镇痛效果。     

靶向Ccnd1基因的siRNA对大鼠晶状体上皮细胞增殖的抑制作用

目的探讨靶向Ccnd1基因小干扰RNA(si RNA)对培养的大鼠晶状体上皮细胞(LECs)Ccnd1 mRNA和周期蛋白D1表达及细胞增殖的抑制作用。方法合成3条靶向大鼠Ccnd1基因的siRNA(si-Ccnd1-1,si-Ccnd1-2,si-Ccnd1-3),LipofectamineTM2000转染体外培养的大鼠LECs,应用RT-PCR和Western blot方法分别检测Ccnd1 mRNA和周期蛋白D1表达变化,筛选最有效si RNA序列。MTT法连续测定转染最有效si RNA序列后24、48、72、96和120 h细胞增殖情况。结果与对照组相比,3条si RNA均能不同程度地抑制Ccnd1 mRNA和周期蛋白D1的表达,以si-Ccnd1-3最为有效(P<0.05)。与对照组比较,si-Ccnd1-3转染后24 h开始明显发挥对细胞增殖的抑制作用,并持续至120 h以后(P<0.05)。结论靶向Ccnd1的si RNA能有效降低大鼠LECsCcnd1 mRNA和周期蛋白D1蛋白表达,抑制LECs增殖。     

PCR法检测B6-Co小鼠混浊角膜的病原菌

目的:检测遗传性角膜病小鼠混浊角膜的病原菌及其种类。方法:取不同发育阶段的B6-Co小鼠36例(模型组)和正常B6小鼠10例(对照组)的角膜,分别提取DNA,运用聚合酶链反应(PCR)技术进行扩增,琼脂糖凝胶电泳对扩增产物进行检测。结果:36例模型组的角膜,细菌PCR检测阳性21例,阳性率为58.33%。真菌PCR检测标本36例,7例阳性,阳性率为19.44%。结论:病原菌感染是引起B6-Co小鼠角膜病变的重要原因。     

DNA修复基因的多态性以及DNA损伤与年龄相关性白内障的关系

目的 探讨DNA氧化损伤修复基因BLM、WRN、ERCC6以及OGG1的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNP)是否影响年龄相关性白内障(age-related cataract,ARC)的发生,并检测SNP是否会引起外周血淋巴细胞DNA损伤程度的改变.方法 从“江苏眼病研究”人群收集ARC患者789例及对照组531例.提取DNA分析BLM、OGG1、ERCC6及WRN基因18个SNP位点的基因型.同时应用彗星试验检测部分受试者外周血淋巴细胞的DNA损伤程度.结果 WRN-rs11574311与ARC、皮质型以及混合型ARC相关(P=0.003,OR=1.49;P=0.001,OR=1.68;P＜0.000 1,OR=2.08),BLMrs1063147与核型ARC相关(P=0.03,OR=1.31),WRN-rs2725383与皮质型ARC相关(P =0.01,OR=1.49),WRN-rs4733220以及WRN-rs2725338与混合型ARC相关(P=0.04,OR =0.74;P =0.003,OR =0.60).经过Bonferroni校正后,WRN-rs11574311仍与皮质型以及混合型ARC相关,WRN-rs2725338仍然与混合型ARC相关.SNP位点不同基因型的外周血淋巴细胞DNA损伤程度的差异无统计学意义.结论 WRN基因在ARC的发生发展过程中起重要作用,而且在不同亚型ARC中所起的作用也有所不同,说明不同亚型ARC可能具有特异性的危险因素以及致病机制.     

次全视网膜冷凝联合抗代谢物治疗新生血管性青光眼

目的：探讨新生血管性青光眼尤其晚期病例的治疗方法，方法：将４０例新生血管性表示我眼随机分为次全视网膜冷凝（ＳＲＣ）组２３例（２３只眼），单纯用ＳＲＣ或联合抗青光眼手术，对照组１７例（１７只眼）行抗青光眼手术，两组术后均局部应用５－Ｆｕ和地塞米松，术后随访１月～５年，平均６个月。结果：ＳＲＣ组的治疗成功率（７３．９％＿高于对照组（４１．２％），差异有显著性（Ｐ〈０．０５）。结论：单纯次全视网膜冷凝术