膜联蛋白A5真核表达质粒的构建

目的:构建在哺乳动物细胞中表达的膜联蛋白A5(anxA5)的重组质粒.方法:Trizol法从人胎盘中抽提细胞总RNA,RT-PCR法反转录为cDNA,以cDNA为模板,扩增膜联蛋白A5的基因序列,引入酶切位点XhoI和BamHI.将真核表达载体pEGFP-N1和anxA5的PCR产物分别双酶切后用T4连接酶连接,转化大肠杆菌后抽质粒,测序鉴定.结果:重组质粒测序后,与genebank中anxA5的mRNA进行比对,证明anxA5基因序列正确,质粒构建成功.结论:成功构建了pEGFP-anxA5重组质粒,为研究膜联蛋白A5的功能及其在细胞系中的作用奠定了基础.     

乳果糖对便秘小鼠结肠水通道蛋白4表达的影响

<正>便秘是消化道常见的慢性病症,随着饮食结构变化及精神、心理因素的影响,其发病呈上升趋势,严重影响着人类的身心健康,水代谢紊乱为其主要的发病环节。水通道蛋白(aquaporins,AQP)是特异性转运水的蛋白家族,参与机体水的分泌、吸收及细胞内外水平衡的调节,已有研究发现水通道蛋白3、4、8等存在于结肠,与结肠水吸收密切相关[1-3]。渗透性泻药,通过提高肠腔内渗透压,使粪便含水量增加,缓解     

中医药治疗高血压文献信息服务系统的敏捷构建研究

中国高血压人数逐年增加,中医药在高血压的治疗上具有明显的优势,丰富的高血压相关中医药文献资源对高血压的治疗有着重要的参考和指导作用。基于敏捷构建思想和MVC 架构,以数据需求驱动系统功能需求,能够高效率、高质量地完成中医药治疗高血压文献信息服务系统的建设工作,所提供的高血压相关文献信息服务对中医药治疗高血压的科研和临床都有着重要的促进作用。     

试述中医古籍文献数字化中叙词表的构建

中医古籍叙词表的构建是以“知识元”为核心、“知识分类”为基础,充分利用中医传统知识保护课题组有关传统知识分类的研究成果,构建中医古代文献知识分类体系。中医古籍叙词表的构建在古代中医药资源描述、智能检索和知识发现中起着至关重要的作用。在本文中,从中医古籍叙词表的构建思路、方案、相关体系构建3个方面探讨了构建中医古籍叙词表的必要性,及其在构建过程中需要注意的问题。     

双能X线骨密度测定仪测定腰椎铝体模、在体及离体腰椎骨矿密度、含量及含量/椎体宽短期精密度及最小变化率差异比较

目的:通过DPX-MD双能X射线骨密度仪测量腰椎铝体模、活体腰椎、带软组织死体腰椎骨矿密度、骨矿含量、骨矿含量/椎体宽的短期精密度及其最小变化率差异比较,探索双能X线吸收法骨密度测定仪测定诊断骨质疏松症的敏感指标.方法:实验于2004-05/2006-12在川北医学院人体解剖实验室与川北医学院附属医院内分泌科骨密度室完成.①实验材料:铝体模为双能X线骨密度仪(DPX-MD,美国Lunar公司)所配备的自检模块;3个活体椎体分别来源于38岁骨密度正常男性,40岁骨质疏松症男性,62岁轻微骨量减少女性,均为自愿参与实验的川北医学院附属医院医生;1个带软组织的死体椎体,由川北医学院人体解剖实验室提供.②测量方法及评估:采用的双能X射线骨密度仪测量各椎体的骨密度.3次/d,连续测定5 d.铝体模和死体椎体两端均用小木块固定在6.5 cm的高度,放在15 cm的水浴中,为减少误差由一人操作.由不同骨矿含量、骨矿含量/椎体宽、骨矿密度可得到各自的变异系数,由不同的变异系数可得到有临床意义的最小骨矿含量、骨矿含量/椎体宽、骨矿密度变化率,由不同的变异系数及不同的最小变化率比较来判断诊断骨质疏松的敏感指标.结果:①铝体模和正常男性椎体的骨矿密度、骨矿含量均高于轻微骨量减少女性椎体、骨质疏松症男性椎体和死体椎体,且以死体椎体骨矿含量最低.②各椎体或L2-4骨矿密度变异系数均比骨矿含量、骨矿含量,椎体宽变异系数小.③各椎体和L2-4的有临床意义的最小骨矿密度变化率值均比各椎体和L2-4的有临床意义的骨矿含量、骨矿含量/椎体宽变化率值小.结论:从短期精密度及有临床意义的最小变化率比较可以看出,无论是仪器的自检模块铝体模还是骨密度正常男性椎体、骨质疏松症男性椎体、轻微骨量减少但有骨质增生女性椎体、严重骨质疏松死体椎体,各椎体和L2-4变异系数值与有临床意义的最小变化率值骨矿密度的改变均比骨矿含量、骨矿含量/椎体宽的改变小,那么它在质量控制中受到的影响更小.双能X线骨密度测量仪测定中骨矿密度更能较好反应骨矿含量、骨矿含量/椎体宽变化,是诊断骨质疏松症的敏感指标.     

人工全髋关节翻修与股骨偏心距重建:术前模板设计所选假体与术中符合率及对髋关节功能的影响

背景：随着髋关节置换病例的增加，再次翻修的病例也逐渐增多，偏心距对于翻修手术的要求较高。 目的：探讨人工全髋关节翻修术中股骨偏心距的重建方法和影响因素。 设计、时间及地点：回顾性分析，于2001—12／2007—12在天津中医药大学第一附属医院完成。 对象：选择天津中医药大学第一附属医院、天津市第一中心医院6年间收治的人工股骨头置换术后行全髋关节翻修术患者36例，男15例，女21例，平均年龄68．2岁（64～75岁），初次置换至翻修手术的平均时间为7．8年（5～17年）。按术中是否进行股骨偏心距重建分为股骨偏心距重建组27例，未重建组9例。患者对治疗均知情同意。 方法：拍摄患者骨盆正位X射线片，对术后股骨偏心距重建率、髋关节功能Harris评分、初次置换术后和翻修术后股骨矩保留值进行统计学分析。 主要观察指标：①股骨矩保留值与股骨偏心距重建的关系。②术前模板设计所选假体与术中假体符合率。③翻修术后髋关节功能优良率比较。 结果：术前模板设计所选股骨假体与术中选用假体符合率为80．56％（29／36），股骨偏心距重建率为75．0％（27／36）。股骨偏心距重建组术后髋关节Harris评分明显高于股骨偏心距未重建组（t=2．987，P=0．005）。股骨偏心距重建组髓关节功能优良率明显高于股骨偏心距未重建组（P=0．026）。股骨偏心距重建组、股骨偏心距未重建组初次置换术后和翻修术后股骨矩保留值差异有显著性（t=2．645，P=0．012：t=2．827，P=0．008）。 结论：人工全髋关节翻修术中股骨偏心距重建是术后关节功能恢复的重要影响因素，应使用规范、细致的术前测量，减少术中股骨矩的损伤，重建髋关节的软组织平衡。     

关节镜下人工韧带加强系统重建前交叉韧带

背景:由于人工韧带新材料生产工艺的改进,减少了人工韧带使用后由于材料疲劳而出现的断裂,以及因组织相容性问题出现滑膜炎等并发症的问题,使人工韧带应用更为广泛.目的:评估关节镜下应用人工韧带加强系统(Ligament Advanced Reinforcement System,LARS)重建膝关节前交叉韧带后的组织相容性反应及其临床效果.设计:完全随机临床设计.单位:苏州大学附属第二医院骨科.对象:2005-06/2006-06苏州大学附属第二医院骨科因膝关节前交叉韧带损伤行关节镜下LARS重建人工韧带的手术患者32例,男27例,女13例,平均年龄21岁,均为运动损伤.所有患者术前MRI均显示前交叉韧带损伤并发半月板损伤:患者对治疗内容知情同意.方法:对32例膝关节前交叉韧带损伤患者行关节镜下LARS人工韧带重建.重建韧带应用LARS人工韧带加强系统,由法国LARS公司生产(证书:CE0459,IS09002-EN46002).人工韧带材型为PET-聚对苯二甲酸乙二醇酯,L021201(左膝),L021202(右膝),模仿人体韧带的解剖结构和生物力学原理设计而成[AC120 2BL(左膝),AC120 2BR(右膝).国食药监械(进)字2004第3460468号].所有韧带重建均由苏州大学附属第二医院骨科同一组有10年以上资质的医生以同样的技术标准完成,由同一高年资的具有博士生导师、主任医师职称的医生主持,参与手术的医生符合卫生部相关上岗职称规定.治疗及实验方案经医院伦理委员会批准.主要观察指标:①观察人工韧带与患者的生物相容性.②对患者进行平均24个月随访,以Lysholm进行膝关节功能评分,以Tegner评分反映患者主观满意度.结果:32例患者均完成随访:完成18,20,24,28,30个月随访者分别为3,7,8,12,2例.①人工韧带生物相容性观察:患者随访结束时均未出现疼痛,急、慢性滑膜炎,以及韧带断裂和活动明显受限等并发症.②膝关节活动功能状态:平均伸屈活动度0°到128.0°±11.6°.Lysholm膝关节功能评分法平均积分由术前的(45.3±1.31)分提高到术后的(85.6±2.24)分,差异有显著性意义(P<0.05).膝不稳症状消失,前抽屉试验阴性.③Tegner评分也有明显提高.结论:LARS人工韧带用于重建前交叉韧带与宿丰组织相容性良好,重建后患者膝关节功能及主观满意度均得到明显提高.     

5-氟尿嘧啶对瘢痕疙瘩成纤维细胞Smad7和转化生长因子βI型受体表达的影响

背景：很多实验已证明5-氟尿嘧啶应用于瘢痕疙瘩治疗可收到良好的效果。但作者所查针对5-氟尿嘧啶经由转化生长因子B信号通路作用于瘢痕疙瘩分子机制的报道较少。目的：实验拟观察5-氟尿嘧啶对瘢痕疙瘩成纤维细胞Smad7和转化生长因子BI型受体表达的影响。设计、时间及地点：细胞观察实验，于2007-02／10在安徽医科大学微生物教研室完成。材料：标本分别取自因瘢痕疙瘩入院的6例整形手术患者。方法：①瘢痕疙瘩组织成纤维细胞原代培养，取4—6代传代细胞加入5个不同浓度5-氟尿嘧啶（10，20，40，80，160μmol／L）干预24，48，72h。②待细胞长至80％汇合时，加入5氟尿嘧啶配成10，20，30μmol／L3个药物干预浓度组，每组再加入转化生长因子β1继续培养。设空白对照和单纯加转化生长因子β1（5μg／L）的阳性对照。主要观察指标：①利用四甲基偶氮唑盐法测定瘢痕疙瘩成纤维细胞的增殖能力。②蛋白免疫印迹检测各组瘢痕疙瘩成纤维细胞中Smad7和转化生长因子βI型受体的表达。结果：①5氟尿嘧啶浓度为10，20μmol／L作用24h时未发现成纤维细胞死亡，与空白对照组相比差异无显著性意义（P〉0．05）：其他浓度下作用各组均有显著的成纤维细胞死亡现象（P〈0．01）。②与空白对照组相比，转化生长因子β1组Smad7表达明显减弱，转化生长因子βI型受体表达则显著增强（P均〈0．01）。③加入5-氟尿嘧啶干预后可显著增强Smad7的表达，且在5氟尿嘧啶浓度为20μmol／L时的表达最强（P〈0．01）。④不同浓度5-氟尿嘧啶对转化生长因子βI型受体表达无明显影响。结论：5-氟尿嘧啶浓度为10～20μmol／L时无细胞毒性，与转化生长因子β1共同培养成纤维细胞，能够提高该细胞转化生长因子β1诱导的Smad7表达，但对于转化生长因子βI型受体的表达没有明显影响。     

胰岛素样生长因子Ⅰ抑制氧化型低密度脂蛋白诱导内皮细胞凋亡的体外试验

目的:胰岛素样生长因子Ⅰ作为重要的促细胞生长因子之一,其对内皮细胞凋亡影响的报道不多.实验拟验证和探讨胰岛素样生长因子Ⅰ对氧化型低密度脂蛋白诱导人脐静脉内皮细胞凋亡的抑制作用及可能机制.方法:实验于2006-12/2007-07在华中科技大学同济医学院协和医院心血管疾病研究所完成.①实验材料及分组处理:取人新鲜脐带(产妇或家属签署知情同意书)分离培养人脐静脉内皮细胞,分为: 胰岛素样生长因子Ⅰ组(1×10-9 mmol/L)、氧化型低密度脂蛋白(200 mg/L) 胰岛素样生长因子Ⅰ组(1×10-9 mmol/L)、氧化型低密度脂蛋白(200 mg/L)组、正常对照组.分别在细胞培养24 h后加入.②实验评估:采用四甲基偶氮唑盐法测定细胞活力;DAPI细胞核荧光染色法观察细胞凋亡的形态学变化及细胞凋亡率的测定;并进行内皮细胞 caspase-3活性的检测.结果:①氧化型低密度脂蛋白可明显抑制人脐静脉内皮细胞增殖,胰岛素样生长因子Ⅰ与氧化型低密度脂蛋白共同加入后,细胞增殖率明显上升(P ＜ 0.05).②氧化型低密度脂蛋白可诱导人脐静脉内皮细胞发生凋亡,而加入胰岛素样生长因子Ⅰ刺激后细胞凋亡率降低(P ＜ 0.05).③caspase-3活性检测表明与对照组相比,氧化型低密度脂蛋白能明显上调caspase-3的表达,而胰岛素样生长因子Ⅰ 氧化型低密度脂蛋白组caspase-3活性则降低(P ＜ 0.05).结论:胰岛素样生长因子Ⅰ对氧化型低密度脂蛋白诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡具有抑制作用,可能与其下调caspase-3蛋白表达有关.