血流剪切应力信号转导与动脉粥样硬化的关系

1内皮的结构与功能 血管内皮是位于血管壁与血液接触的单层细胞,是循环血液与血管壁之间的重要屏障,除了调节血管内外物质交换之外,还有许多重要功能,包括：合成和释放血管活性物质,摄取、转化或灭活血液循环中或者血管局部的生物活性分子,调节血管平滑肌的舒张收缩活动等功能。内皮细胞的功能不仅受生长因子、激素等生化物质的调控,还受到血流机械作用力的影响,     

前蛋白转化酶枯草溶菌素9参与Caspase-3活化的生物信息学分析

目的研究前蛋白转化酶枯草溶菌素9促凋亡的作用是否与活化凋亡通路Caspase-3相关。方法用80mg/L氧化型低密度脂蛋白孵育人脐静脉内皮细胞24h,同时设空白对照组、转染试剂组、阴性对照组和80nmol/L前蛋白转化酶枯草溶菌素9siRNA+80mg/L氧化型低密度脂蛋白组,流式细胞术测定细胞凋亡率,免疫印迹法和酶联免疫吸附法分别检测Caspase-3的表达及活性。然后通过生物信息学方法对前蛋白转化酶枯草溶菌素9与Caspase-8和Caspase-9进行比较,找出它们之间的序列相似程度,以及是否存在共同的功能结构域。结果前蛋白转化酶枯草溶菌素9siRNA能抑制氧化型低密度脂蛋白诱导的Caspase-3蛋白表达和活性增加。生物信息学分析表明,前蛋白转化酶枯草溶菌素9、Caspase-8、Caspase-9三者的序列同源性高达22.14%,三者在C端的二级结构十分接近,特别是前蛋白转化酶枯草溶菌素9和Caspase-9的螺旋、片层、转角、无规则卷曲含量十分接近,三级结构分析发现前蛋白转化酶枯草溶菌素9和Caspase-9的外观轮廓相近,且在腹部中央都有一个裂口,显示前蛋白转化酶枯草溶菌素9和Caspase-9可能具有相同的酶切活性。结论前蛋白转化酶枯草溶菌素9具有与Caspase-9相似的功能结构域,可能具有激活Caspase-3的功能。     

肥大细胞对平滑肌源性泡沫细胞Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原表达的影响

探讨大鼠腹腔肥大细胞对平滑肌源性泡沫细胞Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原表达的影响。用大鼠腹腔肥大细胞上清液和氧化型低密度脂蛋白处理平滑肌细胞48h后，逆转录聚合酶链反应检测平滑肌细胞Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原mRNA的表达，免疫细胞化学染色检测平滑肌细胞Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原蛋白的表达。结果发现，与对照组相比，处理组平滑肌细胞Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原的mRNA表达降低，免疫细胞化学染色后，处理组细胞浆内棕色颗粒比对照组少且染色浅。结果提示，肥大细胞在体外抑制平滑肌细胞Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原表达，并且能协同氧化型低密度脂蛋白对Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原表达的抑制作用。肥大细胞释放的炎症介质可能参与了动脉粥样斑块纤维帽的重构。     

低剪切应力上调基质细胞衍生因子1受体在动脉粥样硬化斑块中表达

目的观察基质细胞衍生因子1受体CXCR4在低切应力诱导的动脉粥样硬化斑块中的表达，探讨CXCR4在动脉粥样硬化病变中的作用。方法建立颈总动脉套环的局部狭窄动物模型，喂养4周；数值模拟局部狭窄远心端流场以及剪切应力分布；酶法测定血浆中总胆固醇、甘油三酯以及HDL水平；HE染色观察局部狭窄远心端病理学改变，油红O染色观察病变处脂质的蓄积，免疫荧光观察病变处CXCR4的表达。     

adipophilin及蛋白激酶C在动脉粥样硬化模型中的表达

目的探讨动脉粥样硬化病变区动脉壁增厚与adipophilin表达及蛋白激酶C(PKC)活性三者之间的关系。方法将24只新西兰白兔随机分为对照组(12只)和实验组(12只)。高TC饮食喂饲12周,动脉切片HE染色;采用PepTagAssay法检测PKC活性变化,Western blot印迹和免疫组织化学染色检测PKCα和adipophilin表达。并进一步在细胞学水平观察平滑肌细胞、巨噬细胞和内皮细胞PKC活性的分布及adipophilin的表达。结果主动脉病变区可见内膜增生、中层增厚,脂质条纹突起,增生内膜内蓄积大量的泡沫细胞。病变区PKC活性和adi-pophilin表达上调,与adipophilin阳性颗粒仅局限于增生内膜不同,PKCα在内膜、近内膜的中层区均呈强阳性表达。细胞学实验显示adipophilin表达于巨噬细胞,而PKC活性则以平滑肌细胞最强,内皮细胞最弱。结论动脉粥样硬化病变区内膜增生、中层增厚可能与PKC介导的细胞增殖凋亡紊乱及adipophilin介导的脂质蓄积有关。在巨噬细胞adipophilin的表达可能与细胞膜PKC活性的改变有着某种潜在联系。     

低剪切应力促进基质细胞衍生因子1在动脉粥样硬化斑块中表达

目的探讨基质细胞衍生因子1在局部狭窄远心端低切应力诱导的动脉粥样硬化斑块中的表达,从而探讨基质细胞衍生因子1在动脉粥样硬化病变中的作用。方法建立颈总动脉局部狭窄动物模型,数值模拟局部狭窄远心端流场以及剪切应力分布,HE染色观察局部狭窄远心端病理学改变,免疫组织化学法观察基质细胞衍生因子1在病变处的表达。结果在局部狭窄远心端形成低剪切应力区域(0~0.3 Pa),并有明显的动脉粥样硬化病变,有明显的内膜增生形成(对照组为8±3μm,处理组4周为38.5±12.7μm,8周为95.3±19.6μm)。免疫组织化学检测发现病变中有大量的基质细胞衍生因子1表达,对照侧血管无基质细胞衍生因子1表达,并且随着病变程度的增加,基质细胞衍生因子1表达量明显增加。结论基质细胞衍生因子1可能在低剪切应力诱导的动脉粥样硬化斑块的发生发展中起着重要的调节作用。     

心血管移植物体外内皮化研究进展

人工心血管材料的广泛应用使生物材料的血液和组织相容性问题显得十分突出，对生物材料表面加以理化处理和修饰是改善其相容性的常用方法。对生物材料表面进行内皮化处理从而使植入的心血管材料拟血管化近年来取得了很大的进展，很好地改善了生物材料的血液和组织相容性，在临床应用中表现出较好的效果，本文对此方面的进展进行了综述，并对存在的一些问题进行了探讨。     

低密度脂蛋白对血管内皮细胞骨架及粘附能力的影响

目的研究低密度脂蛋白(LDL)诱导的血管内皮细胞脂质及细胞骨架的改变及其对内皮细胞粘附的影响。方法不同浓度LDL(0mg/L,50mg/L,100mg/L,150mg/L)孵育内皮细胞24h。采用高效液相色谱法检测细胞内胆固醇酯;油红O检测细胞内脂质;FITC标记的鬼笔环肽进行F-actin纤维荧光标记;流室系统检测生理剪切流场下(1.5Pa)内皮细胞的粘附。结果不同浓度LDL(50mg/L,100mg/L,150mg/L)均导致细胞内胆固醇酯含量增加,其结果分别为(80.3±1.5)μg/g,(115.5±2.2)μg/g和(160.6±3.2)μg/g,与对照组(61.3±1.6)μg/g相比P<0.05;油红O染色内皮细胞内脂质含量明显增加。荧光染色发现,对照组内皮细胞的F-actin纤维主要富集在相邻细胞膜的周边,细胞质中未见密集的F-actin纤维;随着LDL浓度的增加,内皮细胞内F-actin纤维形态和分布发生明显的改变,出现应力纤维;在高浓度LDL下,大部分细胞周边的F-actin纤维消失,胞质中出现密集的应力纤维。在生理剪切流场下,高浓度LDL降低内皮细胞的粘附与保留,150mg/L组内皮细胞的粘附与保留仅50%±10%,对照组为93%±5%。结论LDL增加内皮细胞中脂质含量,损伤细胞骨架,降低内皮细胞的顺应性,降低内皮细胞的粘附。     

肺炎衣原体感染与动脉粥样硬化

自 198 8年提出肺炎衣原体与动脉粥样硬化相关以来 ,大量学者从临床检测、动物实验、细胞分子水平证实了肺炎衣原体与动脉粥样硬化的相关性 ,但是最近的三个大规模临床试验结果都表明 ,针对肺炎衣原体的抗生素治疗未能取得治疗冠心病的良好疗效 ,这一方面有试验本身设计方面的原因 ,另一方面也促使我们有必要重新认识肺炎衣原体感染在动脉粥样硬化发病机制中的作用 .本文拟结合最新的临床试验结果重新温习一下肺炎衣原体感染与动脉粥样硬化的研究历程 .     

SD大鼠SDF-1α基因克隆与序列分析

目的 研究蓝斑(LC)Hz受体是否参与调制中枢外源性组胺(HA)对颈动脉窦反射(CSR)的抑制.方法 麻醉后孤离 SD 大鼠的双侧颈动脉窦区,将不同窦内压(ISP)与其对应的平均动脉压(MAP)值进行Logistic五参数曲线拟合,求得ISP-MAP关系曲线及其特征参数,观察脑室注射(icv)HA以及预先在 LC 微量注射选择性 H2受体拮抗剂西咪替丁(CIM)对CSR的影响.结果 icv HA (100 ng)导致 ISP-MAP 关系曲线明显上移(P＜0.05),反射参数中阈压、饱和压和最大增益时的窦内压值增大(P＜0.05),而MAP反射变动范围及反射最大增益减小(P＜0.05);预先向LC内微量注射CIM(1.5μg/μl),可明显减弱HA的上述效应;单独向LC内注射相同剂量的 CIM 对 CSR 无明显影响(P＜05).结论 脑室给 HA 使 CSR 产生快速重调定,反射敏感性下降;LC 的 H2 受体作用可增强 icv HA 对 CSR 的抑制性重调定,下丘脑 -LC 的 HA 能下行通路可能是中枢 HA 调节 CSR 的下行通路之一.