| 人源抗TROP2全分子抗体IgG的真核表达及对胰腺癌细胞增殖的抑制作用 |
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| 引用本文： | 王 欢,刘琼琼,唐小军,徐 鑫,褚 楚,熊四平,郑 峰,童 华,朱 进,冯振卿,林 红.人源抗TROP2全分子抗体IgG的真核表达及对胰腺癌细胞增殖的抑制作用[J].南京医科大学学报,2014(7):863-869-882. |
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| 作者姓名： | 王 欢 刘琼琼 唐小军 徐 鑫 褚 楚 熊四平 郑 峰 童 华 朱 进 冯振卿 林 红 |
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| 作者单位： | 江苏大学基础医学与医学技术学院,江苏 镇江 212013;南京医科大学病理学系,卫生部抗体技术重点实验室,江苏 南京 210029;南京医科大学病理学系,卫生部抗体技术重点实验室,江苏 南京 210029;江苏大学基础医学与医学技术学院,江苏 镇江 212013;南京医科大学附属南京妇幼保健院妇科,江苏 南京 210004;南京医科大学病理学系,卫生部抗体技术重点实验室,江苏 南京 210029;南京军区军事医学研究所,江苏 南京 210002;南京医科大学附属南京妇幼保健院妇科,江苏 南京 210004;南京军区军事医学研究所,江苏 南京 210002;江苏大学基础医学与医学技术学院,江苏 镇江 212013;南京医科大学病理学系,卫生部抗体技术重点实验室,江苏 南京 210029;南京医科大学病理学系,卫生部抗体技术重点实验室,江苏 南京 210029 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(81101704);南京市医学科技发展项目(ZKX12025) |
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| 摘 要： | 目的:以人源抗TROP2抗体Fab基因为模板,构建人源抗TROP2全分子抗体IgG真核表达系统,观察人源抗TROP2全分子抗体IgG对胰腺癌细胞增殖的抑制作用?方法:分别扩增抗TROP2抗体的重链和轻链基因,构建人源抗TROP2全分子抗体IgG的重组表达载体pWS-anti-TROP2,转染CHO dhfr-细胞,加MTX筛选抗体表达量高的单克隆株,Protein G 亲和柱纯化,获得人源抗TROP2全分子抗体IgG?SDS-PAGE?Western blot?ELISA?免疫荧光和流式细胞术等方法鉴定人源抗TROP2全分子抗体IgG并分析其免疫学活性?MTT法分析人源抗TROP2全分子抗体IgG对胰腺癌细胞BxPC-3的增殖抑制作用?结果:成功构建了人源抗TROP2全分子抗体IgG的真核表达系统,表达并纯化人源抗TROP2全分子抗体IgG?经鉴定,抗体的轻链与重链大小与预期一致,可与TROP2蛋白特异性结合,效价可达1∶6 400?MTT检测结果表明,人源抗TROP2全分子抗体IgG对胰腺癌BxPC3细胞的增殖有明显的抑制作用,且呈时效?量效依赖关系?结论:本研究成功构建了人源抗TROP2全分子抗体IgG的真核表达系统,并证明此抗体可特异性识别胰腺癌细胞表面的TROP2蛋白,且对胰腺癌细胞的增殖有明显的抑制作用?
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| 关 键 词： | TROP2 真核表达系统 CHO dhfr-细胞 胰腺癌 |
| 收稿时间： | 2014/3/17 0:00:00 |
Eukaryotic expression of human anti-TROP2 antibody IgG and its inhibitory effect on cell proliferation of pancreatic cancer |
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| Wang Huan,Liu Qiongqiong,Tang Xiaojun,Xu Xin,Chu Chu,Xiong Siping,Zheng Feng,Tong Hu,Zhu Jin,Feng Zhenqing and Lin Hong.Eukaryotic expression of human anti-TROP2 antibody IgG and its inhibitory effect on cell proliferation of pancreatic cancer[J].Acta Universitatis Medicinalis Nanjing,2014(7):863-869-882. |
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| Authors: | Wang Huan Liu Qiongqiong Tang Xiaojun Xu Xin Chu Chu Xiong Siping Zheng Feng Tong Hu Zhu Jin Feng Zhenqing and Lin Hong |
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| Institution: | School of Medical Science and Laboratory Medicine,Jiangsu University,Zhenjiang 212013;Department of Pathology,Key Laboratory of Antibody Technique of Ministry of Health,NJMU,Nanjing 210029;Department of Pathology,Key Laboratory of Antibody Technique of Ministry of Health,NJMU,Nanjing 210029;School of Medical Science and Laboratory Medicine,Jiangsu University,Zhenjiang 212013;Department of Gynecology,Nanjing Maternal and Child Care Hospital,NJMU,Nanjing 210004;Department of Pathology,Key Laboratory of Antibody Technique of Ministry of Health,NJMU,Nanjing 210029;Huadong Medical Institute of Biotechniques,Nanjing 210002,China;Department of Gynecology,Nanjing Maternal and Child Care Hospital,NJMU,Nanjing 210004;Huadong Medical Institute of Biotechniques,Nanjing 210002,China;School of Medical Science and Laboratory Medicine,Jiangsu University,Zhenjiang 212013;Department of Pathology,Key Laboratory of Antibody Technique of Ministry of Health,NJMU,Nanjing 210029;Department of Pathology,Key Laboratory of Antibody Technique of Ministry of Health,NJMU,Nanjing 210029 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | TROP2 eukaryotic expression system CHO dhfr- cell line pancreatic cancer |
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