脑缺血再灌注后大鼠皮质和纹状体微血管P-gp的表达变化

目的:观察P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)在局灶性脑缺血再灌注后大鼠脑内皮质及纹状体微血管的表达及其变化规律。方法:采用线栓法建立大鼠脑缺血再灌注模型,选取51只成年健康SD雄性大鼠,其中1只用于TTC染色,其余50只随机分为正常对照组(n=10)、假手术组(n=10)、脑缺血再灌注1 d、3 d和7 d组(n=10)。用免疫组织化学方法检测并计数各组P-gp在皮质和纹状体的微血管表达密度(micro vessel density,MVD)的变化;用Western Blot技术检测脑缺血后大脑皮层及纹状体微血管P-gp的表达变化。结果:脑缺血再灌注后皮质和纹状体的缺血侧微血管P-gp的MVD值和Western Blot检测结果均显示呈现增高的趋势,在3 d时达到高峰,皮质和纹状体分别与正常对照组及假手术组比较差异有统计学意义(P0.01,P0.05),7 d时回降至接近正常水平。皮质和纹状体的缺血侧及其对侧微血管P-gp的MVD值在脑缺血再灌注后均呈现增高的趋势,且均在3 d时达到高峰,但缺血侧比缺血对侧增高明显(P0.05)。结论:脑缺血再灌注后大鼠皮质及纹状体微血管的P-gp表达均有不同程度的增高趋势,可能是脑组织的自我保护机制之一。     

CDH17对胃癌细胞侵袭性的影响及其机制

目的:探讨CDH17在胃癌细胞中的表达及其对胃癌侵袭性的影响。方法:分别用Transwell侵袭实验、免疫荧光染色及Western blot法检测正常胃黏膜GES-1细胞和胃癌MGC803细胞与BGC823细胞的侵袭力与CDH17、上皮标志物E-cadherin、间质标志物N-cadherin的表达,以及两种胃癌细胞转染CDH17si RNA后以上指标的变化。结果:正常胃黏膜GES-1细胞无穿膜细胞、无CDH17与N-cadherin表达,而有明显的E-cadherin表达;与GES-1细胞比较,两种胃癌细胞均有明显的穿膜细胞及明显的CDH17与N-cadherin表达,而E-cadherin呈低表达(均P0.05),且高侵袭力的MGC803细胞上述变化较低侵袭力的BGC823细胞更为明显;两种胃癌细胞转染CDH17si RNA后,上述指标变化较转染前明显抑制(均P0.05),且在两种细胞间的差异缩小(均P0.05)。结论:CDH17高表达可能通过上皮间质转化促进胃癌细胞系侵袭性。     

富亮氨酸α2糖蛋白1在乳腺癌中的表达及其功能的生物信息学分析

背景与目的 富亮氨酸α2糖蛋白1（LRG1）是富亮氨酸重复序列（LRR）家族蛋白成员,近些年研究显示LRG1在恶性肿瘤的发生、上皮间质转化、侵袭转移、异常血管生成、预后预测中发挥重要作用。然而LRG1在乳腺癌中的表达、预后、功能和潜在机制方面尚待阐明。本研究旨在通过生物信息学方法系统分析LRG1在乳腺癌中的表达及意义。方法 使用TCGA、Breast Cancer Gene-Expression Miner、UALCAN、Kaplan-Meier Plotter、GeneMANIA、DAVID等多个数据库对LRG1在乳腺癌中的表达与临床病理特征关系、预后价值、相互蛋白作用网络及功能富集进行综合分析。结果 TCGA数据库分析显示,LRG1 mRNA在乳腺浸润癌中的表达量明显高于正常组织（23.461 vs. 8.357,P<0.001）。在不同分子亚型中,luminal型乳腺癌中LRG1 mRNA表达量为37.462（9.930~74.197）,高于HER-2阳性型乳腺癌和三阴性乳腺癌（TNBC）（均P<0.01）;I、II、III期乳腺癌中LRG1 mRNA的表达水平均高于正常乳腺组织（均P<0.05）。Breast Cancer Gene-Expression Miner数据库分析显示,雌激素受体（ER）和（或）孕激素受体（PR）阳性乳腺癌中LRG1 mRNA的表达水平高于ER和（或）PR阴性乳腺癌,HER-2阴性乳腺癌中LRG1 mRNA表达高于HER-2阳性型乳腺癌（均P<0.05）;淋巴结阳性乳腺癌LRG1 mRNA表达量高于淋巴结阴性乳腺癌（P<0.000 1）。用GEPIA在线平台对TCGA数据库中乳腺癌数据进行生存分析发现,LRG1高表达患者总生存率（OS）及无复发生存率（RFS）均低于低表达患者,但差异无统计学意义（HR=0.81,P=0.200;HR=0.70,P=0.064）;用Kaplan-Meier plotter对TCGA中乳腺癌数据进行生存分析发现,LRG1的表达与luminal A型、luminal B型、HER-2阳性型乳腺癌的OS无明显关系（均P>0.05）,但在basal-like亚型中,LRG1低表达患者OS明显优于LRG1高表达患者（HR=3.12,95% CI=1.54~6.29,P<0.001）。使用GeneMANIA数据库进行分析,共筛选出20个与LRG1相互作用蛋白质,GO富集分析显示,LRG1及与其共表达相关的20个蛋白富集于细胞胞外区,外泌体,血液微粒,受体复合物等结构中,参与细胞的血管生成调控、上皮间充质的转化、缺氧反应等相关生物学过程。结论 LRG1在乳腺癌组织中表达上调,并可预测部分不良乳腺癌亚型的预后,LRG1可能为乳腺癌治疗提供新的靶点。     

粉尘螨两种溶性抗原糖蛋白的组分与糖链研究

目的研究水溶性和尿素溶性粉尘螨糖蛋白的组分及结合糖链的构成. 方法用粉尘螨脱脂干粉提取水溶性抗原(Der fA)和尿素溶性抗原(Der fU),经SDS-PAGE,Western blot,免疫染色,胶体金染色和糖定性检测两种抗原糖蛋白的组分,并用9种HRP-植物血凝素进行结合糖链鉴定. 结果 Der fA显示4条蛋白带,分别为18 ku、30 ku、50 ku和58 ku,Der fU显示2条蛋白带(46 ku、58 ku),其中58 ku糖蛋白检测阳性.Der fA存在α-甘露糖(α-Man)、N-乙酰葡萄糖胺(GlcNAC)、α-葡萄糖(α-Glc),不存在寡糖(Oligosaccharide)、岩藻糖(α-Fuc)、β-半乳糖(β-Gal)、β-半乳糖-乙酰氨基半乳糖(β-Gal-GalNAC)及唾液酸(AS);Der fU只存在α-甘露糖,不存在其它7种糖链和唾液酸. 结论α-甘露糖是粉尘螨优势糖蛋白,其次是N-乙酰葡萄糖胺和α-葡萄糖.     

细胞膜糖蛋白CD36的研究现状

CD36是存在于多种组织细胞表面的糖蛋白,具有多种受体功能,是近20年来血液细胞表面受体研究的热点,与机体的多种生理机能有关,本文就该受体蛋白的研究现状做一介绍.     

醋柴胡小分子水溶性部位对甲氨蝶呤药物代谢动力学的影响

目的:探讨P-糖蛋白抑制剂醋柴胡小分子水溶性部位(MHE)对甲氨蝶呤药动学行为的影响。方法:SD雄性大鼠分别灌胃甲氨蝶呤或甲氨蝶呤联合MHE后,于不同时间点眼眶静脉丛采血,利用20%高氯酸沉淀蛋白法处理血样,采用高效液相色谱法分析,非隔室模型估算药代动力学参数。结果:与单用组比较,联用组甲氨蝶蛉药时曲线下面积AUC0-t增加16.6%,AUC0-∞增加33.8%,生物半衰期(t1/2)延长了1.2倍,平均驻留时间(MRT0-t)增加了26.1%,而药物清除率(CL)下降了20.3%,但2组的药代动力学参数无显著性差异。结论:MHE具有增强甲氨蝶呤生物利用度的趋势,二者联合用药需要关注毒副反应的发生。     

黄芪糖蛋白对T细胞增殖与活化的影响

目的:探讨黄芪糖蛋白对大鼠T细胞增殖与活化的影响。方法:无菌制备大鼠脾脏悬浮细胞,分离淋巴细胞,接种后加入黄芪糖蛋白共培养,采用MTT法和流式细胞术分别检测T细胞增殖情况和T细胞亚群分布。结果:MTT实验结果显示黄芪糖蛋白显著抑制了T细胞的增殖(P0.05或P0.01)。流式检测结果显示黄芪糖蛋白显著降低了T细胞中CD3+CD28+、CD3+CD278+细胞的比例(P0.01)。结论:黄芪糖蛋白可有效抑制T细胞的增殖与活化,且主要通过抑制CD278在T细胞表面表达来阻止T细胞的活化。     

EphA2、E-cadherin在喉鳞状细胞癌中的表达及其相关研究

[目的]探讨EphA2、E-cadherin在喉鳞状细胞癌中的表达和其与喉鳞状细胞癌临床病理特征的关系,以及EphA2、E-cadherin在喉鳞状细胞癌中表达的相关性.[方法]采用链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶链接法(SP法)检测62例喉鳞状细胞癌和60例正常鳞状上皮中EphA2、E-cadherin的表达情况.[结果]①EphA2在喉鳞状细胞癌中表迭的阳性率为82.26%(51/62),在正常鳞状上皮中表达阳性率为36.67%(22/60),EphA2在喉鳞状细胞癌中的表达明显高于正常鳞状上皮(P<0.01);②E-cadherin在喉鳞状细胞癌中表达阳性率为45.16%(28/62),在正常鳞状上皮表达的阳性率为93.33%(56/60),E-cadherin在喉鳞状细胞癌中的表达明显低于正常鳞状上皮(P<0.01);③EphA2、E-cadherin的表达与喉鳞状细胞癌的组织分化程度、颈淋巴结转移和TMN分期有关(P<0.05),而与喉鳞状细胞癌患者的年龄和性别无关(P>0.05);④EphA2、E-cadherin在喉鳞状细胞癌中的表迭呈负相关(r=-0.325,P<0.01).[结论]①EphA2可能在喉鳞状细胞癌的发生发展中起一定的促进作用,EphA2的高表达可能提示了喉鳞状细胞癌的恶性程度;②E-cadherin可能在喉鳞状细胞癌发生发展中起一定的抑制作用,E-cadherin的低表达可能提示了喉鳞状细胞癌的恶性程度.     

流式免疫微球芯片技术分析特异性血小板自身抗体

目的建立流式免疫微球芯片技术（FCIBA）分析特异性血小板自身抗体的新方法。方法使用不同红色荧光强度的微球，包被不同血小板膜蛋白单克隆抗体（抗GPⅡb／Ⅲa、抗GPⅠa／Ⅱa、抗GPⅣ、抗GPⅠb／Ⅸ和抗HLA-ABC单克隆抗体），制备特异性血小板自身抗体检测微球，用流式细胞仪检测微球捕获的血小板抗原-自身抗体复合物，检测结果与微孔板改进抗原捕获ELISA（MACE）进行比较，并检测了部分免疫性以及非免疫性血小板减少性紫癜患者血清中的5种特异性血小板自身抗体。结果FCIBA分析抗GPⅡb／Ⅲa、抗GPⅠa／Ⅱa、抗GPⅣ、抗GPⅠb／Ⅸ和抗HLA-ABC5种特异性血小板自身抗体，批内重复性变异系数（CV）分别为4．82％、6．09％、5．04％、5．73％、5．30％；稀释试验呈对数线性相关，相关系数（r）分别为0．9972．0．9966．0．9988．0．9965、0．9982；新方法对5种特异性血小板自身抗体的分析结果均与MACE试验结果高度相关，r值分别为0．9289、0．9224、0．8894、0．9100、0．9134（P均〈0．01）。新方法分析98例免疫性血小板减少性紫癜患者的血清样本，血小板特异性自身抗体检出的阳性率为51．69％；其中，抗GPⅡb／Ⅲa为40．82％，抗GPⅠa／，Ⅱa为24．45％，抗GPⅣ为19．39％，抗GPⅠb／Ⅸ为32．65％，抗HLA-ABC为17．35％。新方法分析40例非免疫性血小板减少性紫癜患者的血清样本，阳性率为0。结论本研究建立了FCIBA分析特异性血小板自身抗体的新方法，可同时分析抗血小板GPⅡb／Ⅲa、GPⅠa／，Ⅱa、GPⅣ、GPⅠb／Ⅸ和HLA-ABC5种特异性血小板自身抗体。     

急性脑卒中患者血小板活化程度以及元活苏的脑保护作用

背景：反映血小板活化程度的特异性分子血小板颗粒膜糖蛋白和肿瘤坏死因子α在正常全血中含量很少，在脑梗死患者血浆中含量增高，元活苏对脑缺血的保护作用是否与此有关？目的：通过测定急性脑卒中患者血浆血小板颗粒膜糖蛋白、肿瘤坏死因子α的含量及元活苏对缺血性脑卒中患者的脑保护作用，并与复方丹参的治疗效果比较。设计：病例分析。单位：平顶山煤业集团公司总医院内科和郑州大学第二附属医院神经内科。对象：选择2001—01／2003—10乎顶山煤业集团公司总医院内科住院的高血压合并急性脑卒中患者144例。随机分为2组：观察组72例，男47例，女25例；年龄90-42岁，平均（69&;#177;11）岁。对照组72例，男49例，女23例；年龄85—37岁，平均（68&;#177;10）岁。方法：两组患者均进行常规吸氧、降压、脱水、抗凝等方法治疗，对照组给予复方丹参注射液500mL，1次／d，用药14d．治疗组给予复方丹参注射液500mL，1次／d，共14d和元活苏20mL＋生理盐水250mL，1次／d，共14d。①入院时和治疗3周后采用欧洲卒中量表（总分最低为0分，最高为100分，分值越高，说明神经功能恢复程度越好）评估两组患者神经功能恢复情况。②入院时（时间窗24—72h）以及治疗后3周分别抽肘静脉血5mL，采用放免法分析血浆血小板颗粒膜糖蛋白、肿瘤坏死因子α含量，分析两者水平及元活苏干预后神经功能变化。主要观察指标：治疗前和治疗3周后，①两组患者神经功能恢复情况。②两组患者血浆血小板颗粒膜糖蛋白、肿瘤坏死因子α含量。结果：144例患者全部进入结果分析。①欧洲卒中量表评分结果：两组患者治疗后明显高于治疗前[观察组：（79．95&;#177;18．64）分，（59．65&;#177;19．87）分；对照组：（74．66&;#177;15．88）分，（61．25&;#177;18．68）分，（t=2．678-4．351，P〈0．01）1；治疗后观察组高于对照组（t=2．016-2．158，P〈0．05）。②血浆血小板颗粒膜糖蛋白、肿瘤坏死因子α含量：两组患者治疗后明显低于治疗前[观察组：（22．12&;#177;9．52）μg／L，（50．41&;#177;22．35）μg／L；（1．05&;#177;0．24）μg／L，（1．62&;#177;0．50）μg/L；对照组：（26．66&;#177;8．22）μg/L1（48．63&;#177;21．54）μg／L；（1．35&;#177;0．44）μg／L，（1．66&;#177;0．48）μg／L，（t=2．678-4．351，P〈0．001）1，治疗后观察组低于对照组（t=2．016—2．158，P〈0．05）。结论：元活苏能显著能降低急性脑卒中患者血浆血小板颗粒膜糖蛋白、肿瘤坏死因子α含量，提高神经功能评分，显著改善神经功能缺损症状。