实时荧光定量PCR测定人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体基因表达

目的 建立检测人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)基因表达含量的实时荧光定量逆转录(FQ-RT)-PCR法,探讨其在健康对照者、乙型病毒性肝炎肝硬化患者及原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者外周血单个核细胞(PBMC)中的表达状况.方法 设计TRAIL基因的特异性引物和TaqMan-MGB探针,以β-actin基因为内参,RT-PCR扩增目的 片段.胶同收纯化目的 片段,构建克隆载体作为定最模板,在ABI Prism7000型荧光定量分析仪上进行扩增,建立标准曲线;同时检测30名健康对照者、30例PBC患者及25例乙型病毒性肝炎肝硬化患者外周血PBMC中TRAIL基因的荧光强度和循环阈值,计算样本中TRAIL基因的起始拷贝数.结果 FQ-RT-PCR检测TRAIL mRNA的线性范围为103-106拷贝/ug RNA(r=-0.997);高浓度样本批内和批间变异系数(CV)分别为5.6%和6.3%.低浓度样本批内及批间CV分别为12.5%和14.6%.PBC患者TRAIL mRNA表达量为[(3.3±2.5)×105拷贝ug RNA],高于健康对照组[(0.5±0.2)×105拷贝/ug RNA],两组差异有统计学意义(t=5.994,P<0.01);乙型病毒性肝炎肝硬化患者TRAIL mRNA的表达[(2.1±0.9)×105拷贝/ug RNA]亦高于健康对照组,且差异有统计学意义(t=8.536,P<0.01),而两疾病组间差异无统计学意义(t=1.988,P>0.05).结论 成功建立检测TRAIL mRNA的FQ-RT-PCR法,并初步发现TRAIL mRNA在PBC及乙型病毒性肝炎肝硬化患者外周血PBMC中表达升高,这将对肝硬化肝损伤机制研究提供新的思路.     

老年人P-选择素与肌钙蛋白T的相关性研究

目的 观察老年人P-选择素和肌钙蛋白T的相关性.方法 80例老年患者分别同时检测P-选择素和肌钙蛋白T,根据肌钙蛋白T的高低将患者分为A组(肌钙蛋白正常组)和B组(肌钙蛋白异常组).分别比较两组P-选择素及与肌钙蛋白T的关系.结果 P-选择素B组明显增高,两组比较差异有统计学意义(P<0.01).单因素分析结果 表明P-选择素和肌钙蛋白T呈正相关(r=0.824,P<0.01).结论 P-选择素较肌钙蛋白T对心脏的敏感性和特异性低,但与肌钙蛋白T联合监测是间接判断冠状动脉病变及心肌损伤的程度和预后的简捷和方便的检测方法 .     

血小板活化因子及血小板膜糖蛋白与缺血性脑血管疾病

目的：血小板活化在血栓形成和脑血管疾病过程中具有重要意义。分析血小板活化因子-血小板膜糖蛋白在脑血管病发生发展过程中的变化水平，进一步揭示二者的关系。推动脑血管病的预防和诊治。 资料来源：应用计算机检索Medline数据库1990—01／2004—12有关检测血小板活化因子与脑血管疾病关系的文章，检索词“P1atelet activation，Platelet glycoprotein，Cerebral artefial thrombosis，Atherosclerosis”。并限定文章语言种类为English，观察对象为人类。同时应用计算机检索中国清华同方期刊网数据库1994—01／2004—12有关血小板活化与脑动脉硬化、脑血栓形成关系的文章，限定文章语言种类为汉语，检索词“血小板膜糖蛋白，脑动脉硬化。脑梗死”。 资料选择：对资料进行初审，选取符合要求的有关文献，并查找全文。纳入标准：①有关血小板膜糖蛋白的结构、检测原理及在血小板活化过程中如何作用的研究原著。②有关定量检测血小板膜糖蛋白对脑血管病的诊断预防有意义的研究原著。排除标准：文献中重复的研究和与本研究无关的其他种类血小板膜糖蛋白的文章。 资料提炼：共收集到64篇有关血小板活化因子的检测与脑血管病关系的文献。排除重复或无关血小板膜糖蛋白的研究．纳入19篇。血小板膜糖蛋白的结构及检测原理3篇，血小板活化与脑动脉硬化的关系1篇．血小板活化因子与脑血栓形成的关系12篇．血小板活化与心血管病的关系1篇．血小板膜糖蛋白受体拮抗剂的应用2篇。资料综合：在脑血管疾病发生发展过程中血小板活化起重要促进作用，由于动脉粥样硬化斑块的形成。促使血小板活化的因素无法逆转，使得血小板长期处于活化状态．临床抗凝治疗可能在一定程度上降低血小板的活化．但不能完全消除致活化因素的作用。活化的血小板与静息的血小板相比。其血小板膜糖蛋白发生显著变化。并在血小板膜上大量表达，成为活化血小板的分子标志物。随着血小板膜糖蛋白分子生物学研究的深入及血栓形成分子机制的阐明．新型血小板膜受体拮抗剂的合成将会取代或补充阿司匹林和溶栓剂的作用，推动脑血管疾病的预防和诊治。 结论：在血栓性疾病中，血小板活化起了关键作用．因此研究血小板活化作为脑血管内血栓形成和梗死的早期因素。准确测定其活化标志物GPⅡb／Ⅲa、GPⅠb和GMP-140对脑血管疾病发生的诊断、预防、治疗效果监测都有着重要意义。     

检测冠心病患者α1-酸性糖蛋白和C-反应蛋白的意义

目的探讨不同类型冠心病(CHD)患者α1-酸性糖蛋白(AAG)和C-反应蛋白(CRP)的变化及其临床意义.方法选择28例急性心肌梗死患者(AMI组),35例不稳定型心绞痛患者(UAP组),30例稳定型心绞痛患者(SAP组),30例非冠心病患者(对照组),分别测定其血浆AAG和CRP水平.所有患者均行冠状动脉造影,按Gensini积分法评定其冠状动脉狭窄程度,对结果进行统计学分析.结果①AMI组血浆AAG、CRP水平高于UAP组、SAP组和对照组(P<0.001); UAP组血浆AAG、CRP水平高于SAP组和对照组(P<0.001);SAP组血浆AAG、CRP水平稍高于对照组,但差异无统计学意义(P>0.05).②随着冠状动脉狭窄程度加重,即Gensini积分的增加,AAG、CRP水平升高越明显(P<0.001).③冠状动脉3支病变和双支病变组血浆AAG、CRP水平高于单支病变组(P<0.005).结论血浆AAG和CRP水平可作为识别CHD高危患者、监测病情变化的指标,其升高程度与冠状动脉粥样硬化程度有明显相关性.     

长期依赖输注红细胞的地中海贫血患者的血小板同种免疫

背景 已研究过长期输注红细胞的地中海贫血患者的血小板同种免疫状况，包括抗HLA抗原及血小板特异性糖蛋白抗原的抗体。研究设计及方法用市售酶免疫试剂检测60例定期输注洗涤红细胞的地中海贫血患者血样的HLA及血小板特异性糖蛋白抗原的抗体，所有患者在12个月～15个月的随访期内反复筛查。结果在第一年的研究期间，19例（31％）患者产生了HLA抗体，13例（22％）患者产生了HLA抗体和血小板一特异性抗体，1例（2％）患者产生了血小板特异性抗体，     

抗人红细胞血型糖蛋白A非多态性表位单克隆抗体的制备和鉴定

目的制备抗人红细胞血型糖蛋白A(Glycophorin A,GPA)非多态性表位单克隆抗体并鉴定其特性。方法用小鼠B淋巴细胞杂交瘤技术获得分泌单抗-GPA非多态性表位的杂交瘤细胞株;鉴定抗体特异性和亚型;通过和各种酶处理细胞的反应确定单抗结合抗原位点的特性。结果得到的2株抗-GPA非多态性表位的单克隆细胞株Q6D7和Q7C9,均属IgG1亚类、Kappa型轻链,所针对的抗原位点均抗胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶处理,对无花果酶、木瓜酶、唾液酸酶敏感。结论制备获得2株抗-GPA非多态性表位单克隆抗体。     

胸腔镜下左侧心交感神经切除术治疗长QT综合征的护理

盐酸替罗非班为一种新型可逆性非肽类血小板表面糖蛋白（GPⅡbⅢa）受体拮抗剂，是目前作用最快、选择性最高的血小板抑制剂，可竞争性抑制纤维蛋白原与血小板GPⅡbⅢa受体的结合，静脉注射可剂量依赖性地抑制血小板聚集、延长出血时间、抑制血栓形成。有研究发现，该药对预防急性冠状动脉综合征、冠状动脉介入性治疗术后的血栓形成、无血流方面均有良好的疗效，用于急性冠状动脉综合征安全有效。     

超声治疗对冠心病患者血浆GMP-140及vWF的影响及意义

[目的]探讨超声治疗对冠心病患者GMP-140及vWF的影响及意义.[方法]选用未使用抗血小板药物的冠心病患者70例随机分为超声联合药物治疗组(超声组)35例和常规药物治疗组(药物组)35例,观察治疗前后vWF和GMP-140的变化,采用硝酸还原酶法和ELISA双抗体夹心法测定治疗前后GMP-140和vWF含量.[结果]与治疗前相比,治疗后两组患者GMP-140和vWF水平明显下降,超声组治疗前后比较P＜0.01;药物组治疗前后比较vWF P＜0.01, GMP-140 P＜0.05,超声组比药物组患者GMP-140和vWF水平下降更明显P＜0.05.[结论]冠心病患者体内存在血小板活化,血小板活化参与了冠心病的发展过程,超声治疗冠心病的机制与超声的三大生物效应外还与降低血浆GMP-140和vWF浓度,减少粘附反应等多种因素共同作用的结果.     

迷走神经刺激对药物难治性癫痫大鼠脑内多药耐药蛋白过表达的抑制作用

目的 主要研究迷走神经刺激(VNS)对癫痫大鼠脑内多药耐药蛋白(P-gp)表达的调控作用.方法 采用氯化锂-匹鲁卡品制备颞叶癫痫大鼠,苯巴比妥钠(PB)诱导建立药物难治性癫痫(RE)大鼠模型.在此模型基础上,大鼠按随机数字表顺序分为四组:单纯VNS(A)组、VNS+ PB(B)组、假VNS+PB(C)组、生理盐水(D)组.VNS组行刺激电极植入术,通过改进的VNS参数(频率30 Hz,波宽500μs,电流0.75 mA,刺激时间30 s,间歇5min,12 h/d)进行电刺激,观察各组大鼠VNS前后发作次数,检测各组P-gp表达含量的变化.结果 (1)A、B组癫痫平均发作次数分别减少79.6％和85.9％,C、D组无明显改善;(2)B组P-gp过表达量与C组相比差异有统计学意义(P＜0.05),A组P-gp表达量较D组差异有统计学意义(P＜0.05).结论 VNS疗法可以有效降低RE的发作次数,对由药物引起的P-gp的过表达具有较强的抑制作用,与药物联合应用可以达到较好的治疗效果.     

急性脑缺血患者血小板膜糖蛋白改变

急性脑缺血患者血小板膜糖蛋白改变李泓我们应用抗活化血小板单克隆抗体（ＭｃＡｂ）作探针，经免疫荧光标记、流式细胞仪（ＦＣＭ）检测急性脑缺血患者血小板活化程度，以进一步探讨血小板膜糖蛋白（ＧＰ）在脑缺血发病中的作用。并探索较简便易行而准确的血小板ＧＰ定量...