四物汤对γ射线照射致血虚证小鼠造血细胞作用的研究

探讨四物汤预防和治疗血虚证的作用,用60 Coγ射线身全照射小鼠造成血虚证模型;荧光标记并用流式细胞仪测定CD34＋细胞在骨髓有核细胞中的比例,细胞固定后PI染色测定细胞周期,Annexin V-FITC试剂盒和DNA凝胶电泳检测骨髓细胞的凋亡,结果：四物汤对小鼠骨髓造 血干祖细胞,外周血细胞的恢复有明显促进作用,有保护骨髓和促进骨髓细胞由G1期进入S期的效应,四物汤可减轻射线引起的细胞凋亡,促进骨髓造血干祖细胞的增殖,抑制骨髓造血干祖细胞的凋亡是四物汤预防和治疗血虚证的机制之一。     

环磷酰胺所致血虚证小鼠骨髓CD34~ 细胞的变化

目的 :研究环磷酰胺 (CTX)诱发的血虚证小鼠骨髓中干祖细胞的数量和骨髓细胞周期的动态变化。方法 :采用CTX大小两个剂量分别对两组小鼠进行腹腔注射制作小鼠血虚证模型。在不同时相点 ,双荧光标记测定CD34 细胞在骨髓有核细胞中的比例 ,骨髓细胞固定后PI染色测定细胞周期。结果 :①注射CTX后CD34 细胞在骨髓有核细胞中的比例下降后迅速上升 ,然后又下降。②注射CTX后骨髓细胞增殖受抑 ,然后动员骨髓细胞增殖 ,但药后 10d细胞增殖又受抑。与CD34 细胞在骨髓有核细胞中比例的变化规律有一致性。结论 :CTX可以动员骨髓造血干祖细胞进入细胞周期而增殖 ,增加了骨髓中造血干祖细胞的数量 ,但此过程加速了干祖细胞池的耗竭 ,从而对骨髓造成更大损伤 ,这可能是CTX诱发小鼠血虚证的机理之一。     

四物汤对综合放血法致小鼠血虚证造血功能的影响

目的:观察四物汤对综合放血法致小鼠血虚证造血功能的影响,为比较四物汤对不同血虚证模型补血作用提供实验依据。方法:每日按75g·kg^-1体重限食,隔日游泳20min及放血0.4mL共15d,建立小鼠血虚证模型。提前7d,四物汤小,中,大剂量组分别按每天5,10,20g·kg^-1给予四物汤至造模结束,通过血细胞计数仪及流式细胞仪等分析手段,检测外周血象、骨髓细胞周期、骨髓细胞凋亡和CD34⁺细胞数。结果:四物汤小,中,大剂量组可以使血虚证小鼠红细胞由第7天最低值4.6×10¹²·L^-1,分别显著升高到6.5,7.1,7.0×10¹²·L^-1;在第15天,使血虚证小鼠S期骨髓细胞数由11.53%,分别显著增加到14.34%,14.03%,13.58%。结论:四物汤可以在一定程度上逆转综合放血致小鼠的造血损伤。     

辐射小鼠骨髓CD34~ 细胞的变化及其意义

目的　研究γ射线照射后C5 7小鼠骨髓中CD34 细胞的数量变化规律及其意义。方法　流式细胞仪测定CD34 细胞在骨髓有核细胞中的比例 ;AnnexinV FITC试剂盒检测骨髓细胞的凋亡 ;细胞固定后PI染色测定细胞周期。结果　①CD34 细胞在骨髓有核细胞中的比例随照射剂量的加大而降低 ,在 5 5Gy照射后 14d内小鼠CD34 细胞的减少表现为持续性 ;②小鼠照射后6h骨髓细胞凋亡率最高 ,以 5 5Gy照射组最为明显 ;③ 5 5Gy照射后小鼠骨髓细胞周期紊乱。 结论　γ射线损伤骨髓中的干祖细胞 ,造成骨髓中干祖细胞的数量减少 ,其途径之一是诱导骨髓细胞凋亡。     

阿普甘铵注射液对小鼠血糖电解质以及凝血的影响

目的 测定阿普甘铵注射液对小鼠血糖、电解质以及凝血的影响,旨在观察其可能的不良反应为临床合理应用提供依据.方法 静脉注射给药14d,测定小鼠血糖和Na 、K 、Cl-等电解质;在动物的腋下接种艾氏腹水瘤细胞,第2d开始尾静脉给药,连续给药14d后在小鼠股动脉取血离心得血浆,测定凝血酶原时间(PT),活化部分凝血活酶时间(APTT)和凝血酶时间(TT).结果 在给药后5d时阿普甘铵大剂量组降低血糖.在以后的检测时间点,与正常组相比各给药组血糖值无显著性差异.与正常组相比各给药组Na 、K 、Cl-无显著性差异;荷瘤组小鼠血液的凝血酶原时间(PT)和凝血酶时间(TT)均缩短,表明荷瘤组小鼠血液有凝血的趋势,阿普甘铵注射液不能逆转凝血酶原时间(PT)和凝血酶时间(TT)的改变.结论 阿普甘铵对正常小鼠血清中的血糖有短暂的降低作用,而对电解质没有影响.与荷瘤组相比,阿普甘铵注射液不能逆转凝血酶原时间(PT)和凝血酶时间(TT)的改变.     

建立骨质疏松症模型的研究与进展

目的：骨质疏松症的学术研究领域目前仍有许多问题存在争论，其主要原因是因为缺少确实有效的实验模型。最近的一些研究抻出了骨质疏松症模型的制作方法和机制。资料来源：应用计算机检索Medline 1995—01／2004-01期间的骨质疏松症模型相关章，检索词“osteoporosls；model；biology；review”，并限定章语言种类为English。计算机检索CMCC数据库1995—01／2004—01期间的骨质疏松症模型相关章，检索词“骨质疏松，模型，生物学”，并限定章语言种类为中。计算机检索《中国临床康复》杂志1990-01／2004—05期间的相关章，限定章语言种类为中，检索词“骨质疏松症，模型”。资料选择：选择与骨质疏松症动物模型、细胞模型和现代分子模型的相关献150篇，中80篇，英70篇。资料提炼：按骨质疏松症模型制作和机制研究的最新进展对相关献进行提炼。纳入标准：与骨质疏松症动物模型、细胞模型和现代分子模型相关献，不排除未随机试验以及盲法对照的献。资料综合：综合资料发现近几年骨质疏松症的制作方式增多，特别是细胞模型、基因敲除模型和转基因模型的研究使，得对骨质疏松症发病机理的认识深入到分子水平，研究发现其机制主要涉及细胞因子、生长因子和内分泌／旁分泌激素间的偶联(如护骨素／核因子受体κB活化因子／RANK的配体系统，OPG／RANK／RANK系统)，骨代谢激素和雌激素在骨质疏松症中的作用也阐明。结论：骨质疏松症出现了许多新模型，从分子水平复制骨质疏松症模型更有助于阐明骨质疏松症的发生、发展机制、鉴定新的药靶，以及新的生物标志物，并用于指导临床试验。     

四物汤及其配伍对大鼠肝脏P450酶活性及mRNA表达的影响

研究四物汤复方及其配伍对大鼠肝脏P450酶活性及其mRNA表达水平的影响。大鼠口服灌胃四物汤及其配伍水煎液2周后,处死,用生理盐水灌流肝脏,制备肝微粒体,采用混合探针与肝微粒体体外孵育法考察四物汤对大鼠肝脏细胞色素P450酶的影响。利用实时定量聚合酶链式反应(Q-PCR)检测四物汤对大鼠肝脏细胞色素P450 mRNA表达的影响。四物汤复方组CYP1A2酶活性与对照组相比升高(P<0.05),熟地白芍、当归白芍、当归川芎以及白芍川芎组的CYP1A2和CYP2C19的酶活性与对照组相比降低(P<0.05),复方组、单药组、2味药配伍组的CYP2B6的酶活性与对照组相比降低(P<0.05)。复方组对CYP1A2的mRNA表达具有上调作用(P<0.05),4味单药对CYP2B1 mRNA表达具有下调作用的(P<0.05)。四物汤复方对大鼠肝脏CYP1A2的酶活性具有诱导作用,熟地和当归组与对照组相比酶活性相当,但与白芍合用后显著下调了CYP1A2的酶活性。复方及其配伍对CYP2B6的酶活性具有抑制作用,其中当归对酶活性下调作用较强。复方对CYP1A2以及4味单药对CYP2B1的mRNA表达的影响与酶活性水平相平行。     

腺嘌呤对电离辐射诱发AHH-1细胞凋亡的保护作用

目的：观察腺嘌呤对淋巴母细胞AHH-1辐射损伤的保护作用并探讨其作用机制。方法：照射前12h给予不同浓度的腺嘌呤,再经4．O Gy 60Coy射线照射诱发细胞凋亡,采用MTS法计算细胞存活率;Annexin V-FITC／PI双染法、Caspase3／7发光法检测细胞凋亡率;DNA Ladder法观察凋亡断裂条带;RT-PCR分析细胞Caspase-9、Bax、Bcl-2mRNA表达的变化。结果：与正常组比较,电离辐射后细胞存活率79．4％显著下降（P〈0．01,加入0．001,0．01,0．1μmol·L^-1。腺嘌呤细胞存活率分别为85．4％,89．6％,92.2％明显升高（P〈0．01）,且随作用浓度的增加而增大,DNA断裂片段也减少,细胞中Caspase-9、Bax表达明显减少,Bcl-2表达明显增加,凋亡的各项指标均明显改善。结论：腺嘌呤对电离辐射诱发的细胞凋亡有保护作用,并且对细胞凋亡的抑制呈剂号依赖正相关美系．     

用分子中药组学技术研究四物汤补血的作用机理

从中药复方的多重作用及中医的整体治疗观出发,作者提出“分子中药组学”的概念,认为中药复方是通过化学成分组合影响到信号分子组合,使紊乱的信号分子网络恢复平衡,从而达到治疗中医的证和相关疾病的作用和效果。分子中药组学的关键技术是化学组学、基因组学和蛋白质组学。用分子中药组学策略发现了四物汤补血的物质基础是多糖、川芎嗪、阿魏酸和芍药苷, 补血作用的分子机理是影响造血相关细胞因子的表达。     

人参、藜芦合用对大鼠肝P450酶活性及mRNA表达的调控作用

目的 :研究中药十八反中人参与藜芦合用对P450同工酶在酶活性及mRNA水平的调控作用。方法 :采用紫外分光光度法测定大鼠肝微粒体细胞色素P450与细胞色素b₅含量及氨基比林N 脱甲基酶 (APND)、对硝基苯酚羟化酶 (pNPH)活性。采用RT-PCR技术检测大鼠肝中 5种P450同工酶CYP1A1,CYP2B1/ 2 ,CYP2C11,CYP2E1及CYP3A1mRNA的表达。结果 :人参与藜芦合用可明显降低P450蛋白含量 ,可降低细胞色素b₅的含量 ,单药及其与藜芦配伍都能使APND活性下降。在mRNA水平上 ,藜芦可诱导CYP2C11的基因表达 ,与人参合用后却使得CYP2C11的表达下降。藜芦与人参配伍诱导了CYP1A1的表达。人参可抑制CYP2B1/ 2的基因表达 ,与藜芦合用后却明显诱导了CYP2B1/ 2的表达 ,人参与藜芦合用后也明显诱导了CYP3A1的表达。结论 :人参与藜芦配伍前后对一些CYP亚型调控作用发生明显变化 ,可能存在基于药物代谢酶机理的相反作用 ,需进一步结合代谢研究加以综合分析 ,阐明相反作用的机理。