补骨脂素的植物雌激素作用及其机制探讨

目的:利用雌激素受体(ER)α,β阳性T47D细胞和子宫内膜癌Ishikawa细胞观察补骨脂素的雌激素样作用,并探讨其可能的作用机制。方法:以1×10^-8mol.L^-1雌二醇(E₂)为阳性对照药,利用MTT细胞增殖试验观察1×10^-5~1×10^-9mol.L^-1补骨脂素对T47D增殖的影响,同时观察1×10^-6mol.L^-1和1×10^-7mol.L^-1补骨脂素对Ishikawa细胞增殖的影响;以半定量RT-PCR法检测1×10^-6mol.L^-1和1×10^-7mol.L^-1补骨脂素对T47D细胞雌激素效应基因PR mRNA表达情况的影响;并以雌激素受体拮抗剂ICI 182,780为工具药进行干预。同时,通过流式细胞术检测1×10^-6mol.L^-1和1×10^-7mol.L^-1补骨脂素引起T47D细胞ER-α,ER-β含量的变化。结果:1×10^-5~1×10^-7mol.L^-1补骨脂素能够显著促进T47D细胞增殖;1×10^-6mol.L^-1和1×10^-7mol.L^-1补骨脂素对Ishikawa细胞增殖也有显著的促进作用;RT-PCR结果显示:1×10^-6mol.L^-1和1×10^-7mol.L^-1补骨脂素可使T47D细胞PR mRNA表达显著增加,表现出雌激素样作用,而且以上效应可被ICI 182,780拮抗。1×10^-6mol.L^-1和1×10^-7mol.L^-1补骨脂素还可诱导T47D细胞ER-α,ER-β表达明显增加。结论:补骨脂素具有植物雌激素作用,并且其作用是通过ER途径介导的。     

二仙汤雌激素样作用的实验研究

目的通过不同的实验方法来确定二仙汤及其拆方中是否在ICR小鼠体内有雌激素样作用。方法采用子宫增重实验、ELISA实验法，通过对幼龄小鼠子宫湿重和血清中相关激素的影响，观测是否具有雌激素的作用。结果子宫增重实验中，淫羊藿组和茅二组可使动物子宫系数明显升高。在血清雌激素与睾酮含量水平测定实验中可以看出，四温组明显能升高小鼠的血清雌激素水平（P〈0．01），巴茅组的雌激素水平反而降低（P〈0．05）。与正常组相比，二仙汤组、四温组、茅二组、淫羊藿组血清睾酮水平明显低于正常组（P〈0．01）。结论初步验证了二仙汤及其部分拆方的雌激素样作用。二仙汤各拆方组中，含有淫羊藿剂量大的组对小鼠子宫增重的幅度和雌激素水平明显大于淫羊藿剂量小和不含淫羊藿组，所以二仙汤的雌激素作用很可能是淫羊藿所发挥的．     

四物汤及其组方中药的药物血清对MCF-7细胞体外增殖和细胞周期的影响

目的:探讨四物汤及其组方的四味中药的药物血清对人乳腺癌细胞系MCF-7细胞体外增殖、细胞周期和凋亡的影响,评价其植物雌激素活性.方法:正常性未成熟雌性SD大鼠,体重70±5g,按体重均衡和随机的原则分为7组(正常对照组、己烯雌酚组、四物汤组、熟地组、白芍组、当归组和川芎组),每天分别早、晚两次灌胃给药,给药均持续4d,第5d腹主动脉取血,分离血清,0.22p.m微孔滤膜过滤,-20℃贮存备用.应用MTT法检测药物血清对MCF-7细胞增值率、流式细胞技术检测细胞周期和凋亡率.结果:白芍、当归和川芎等中药的药物血清均可显著促进MCF-7细胞体外增殖(P＜0.01),熟地可促进MCF-7细胞体外增殖(P＜0.05),熟地、当归和川芎等中药的药物血清均可显著促使MCF-7细胞S期细胞数和细胞增殖指数PI增加(P＜0.01),白芍的药物血清均可促使MCF-7细胞增殖指数PI增加(P＜0.05),而在本实验条件下四物汤复方的舍药血清使MCF-7细胞数略有增加,但无统计学意义(P＞0.05);白芍、当归、川芎和四物汤的药物血清均可显著抑制MCF-7细胞的凋亡(P＜0.01);结论:熟地、白芍、当归和川芎等中药有植物雌激素活性,本实验配伍比例条件下,四物汤复方的植物雌激素活性弱于其组方的各味中药.     

急性肺损伤大鼠体内明胶酶的活性变化及大豆胰蛋白酶抑制剂的干预效应

目的探讨急性肺损伤大鼠体内基质金属蛋白酶2,9(MMP-2,MMP-9)活性的变化以及大豆胰蛋白酶抑制剂(soybean trypsin protease inhibitor,SBTI)的干预效应。方法90只SD大鼠随机分为假手术组(Sham组,n=30)、内毒素组(LPS组,n=30)、大豆胰蛋白酶抑制剂组(SBTI组,n=30)。向LPS和STBI组大鼠气管内一次性注入0.3ml含LPS(6mg.kg-1)的生理盐水复制ALI模型,假手术组大鼠则在气管内一次性注入等量生理盐水。SBTI组于造模前1天腹腔注射给予100mg.kg-1.d-1SBTI(溶于0.5ml生理盐水),假手术组和LPS组大鼠腹腔注射等量的生理盐水,3组动物同步于气管内LPS灌注后d1、d3、d7分别随机处死10只。收集肺泡灌洗液,冰浴匀浆肺组织制备匀浆液,-80℃冻存。Bradford法测定血浆蛋白含量和肺泡灌洗液中蛋白含量,计算肺通透指数;酶谱法测肺组织匀浆液和支气管肺泡灌洗液上清中MMP-2、MMP-9酶活力及免疫组织化学方法检测肺组织MMP-2、MMP-9蛋白表达情况;并进行肺组织形态学观察。结果酶谱法显示:与LPS组相比,SBTI组大鼠肺组织、支气管肺泡灌洗液中MMP-2、MMP-9活性明显下降,在d7活性变化明显,但MMP-9变化较MMP-2更明显。免疫组化显示MMP-2、MMP-9在LPS组肺组织细胞高表达。SBTI组大鼠肺组织MMP-2、MMP-9表达明显减弱。肺组织病理提示SBTI治疗组肺损伤病变局限且程度较轻,肺泡内渗出明显小于LPS组,PMN和红细胞渗出较少。结论MMP-2、MMP-9在LPS诱导大鼠急性肺损伤中发挥重要的作用,SBTI通过抑制MMPs的分泌及激活,降低基底膜的降解,减轻肺水肿及炎症反应,发挥肺保护的作用。     

育泡饮对自身免疫性卵巢损伤小鼠卵巢颗粒细胞的超微结构影响

目的：观察育泡饮对自身免疫性卵巢损伤小鼠卵巢颗粒细胞的超微结构影响。方法：以成熟的SD雌性大鼠卵巢组织制备卵巢抗原。皮下多点注射免疫BALB／C雌性小鼠，建立卵巢早衰模型。在3次免疫后连续灌服育泡饮，以强的松为阳性对照，电镜观察小鼠卵巢超微结构变化。结果：模型组颗粒细胞胞体变小，各种细胞器明显减少。细胞核染色质凝聚，核膜消失，线粒体肿胀，嵴减少，紊乱，内质网扩张。育泡饮各剂量组可见颗粒细胞体积增大，胞质内细胞器数量增多，线粒体、内质网等结构大体正常，未见染色质凝聚。结论：育泡饮具有防止颗粒细胞凋亡的作用，能抑制颗粒细胞凋亡。     

四物合剂对顺铂肝毒性作用的实验研究

目的:观察四物合剂对化疗药物顺铂肝毒性的作用,并对其作用机制进行探讨。方法:小鼠腹腔注射顺铂,3·0mg/kg体重/日,连续7日,并灌饲四物合剂14日,观察血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性、肝脏系数、肝匀浆中SOD、GSH-PX、GSH和MDA含量变化及肝线粒体中NADH脱氢酶复合体(复合体Ⅰ)和琥珀酸脱氢酶复合体(复合体Ⅱ)活性变化。结果:注射顺铂7日后小鼠肝脏中SOD和GSH-PX活性及GSH含量下降,MDA含量升高,同时给予四物合剂小鼠肝脏中SOD含量上升,GSH-PX活性及GSH含量、MDA含量均下降;顺铂小鼠肝线粒体中NADH脱氢酶复合体(复合体Ⅰ)活性升高,琥珀酸脱氢酶复合体(复合体Ⅱ)活性下降,四物合剂可减弱该反应。结论:顺铂模型小鼠肝组织细胞潜在抗氧化能力明显下降,四物合剂可改善此现象,其作用机制可能与升高机体内抗氧化酶活性、减少自由基生成有关。     

红花等10种中药的植物雌激素活性研究

目的：评价红花、川牛膝、丹参、女贞子、枸杞、甘草、肉苁蓉、淫羊藿、补骨脂、菟丝子等10味中药的植物雌激素活性。方法：选用昆明种雌性乳鼠,随机分为A,B二组：A组又分为12组（溶剂对照组、己烯雌酚组和10个中药组）；B组也分为12组（溶剂对照组、己烯雌酚组和10个中药拮抗组）,其中中药拮抗组每天同时灌胃中药和己烯雌酚；各组给药4 d后分离血清。利用雌激素受体（ER）阳性MCF-7细胞,以MTT法检测中药含药血清对细胞增殖的影响。结果：A组中,红花、川牛膝、丹参、枸杞、肉苁蓉、淫羊藿、补骨脂和菟丝子等中药含药血清可显著促进MCF-7细胞增殖；而女贞子组可见细胞增殖受到明显抑制。B组中,红花、川牛膝、丹参、甘草、淫羊藿、补骨脂和菟丝子组可见己烯雌酚促细胞增殖的作用受到了显著抑制；而肉苁蓉可协同并显著增强己烯雌酚促细胞增殖的作用。结论：红花、川牛膝、丹参、淫羊藿、补骨脂、菟丝子等6种中药在单独用药时具有拟雌激素作用,在与雌激素同时用药时具有抗雌激素作用,其双向调节效应依赖于体内雌激素水平的高低。     

温脾汤对大鼠残余肾组织中核转录因子-κB/IκB表达的影响

目的了解5/6肾切除大鼠残余肾组织核转录因子κappaB(NF-κB/IκBα)的表达与肾功能损害的关系,并观察温脾汤对NF-κB/IκBα的影响。方法采用5/6肾切除方法建立肾纤维化大鼠模型,以NF-κB p65亚基单抗及IκBα多抗为一抗,采用二步法免疫组化染色检测大鼠残余肾脏中NF-κB p65/IκBα的表达,结合血清肌酐、尿素氮、24 h蛋白尿等肾功能指标及肾脏病理损害情况,分析它们在肾脏损害中的作用,在此基础上阐明温脾汤肾保护作用与核转录因子-κB/IκB的关系。结果模型组肾组织中NF-κB p65的表达较正常组织显著增高,与尿蛋白及血肌酐增高呈正相关关系,而IκBα表达明显低于正常肾组织。与模型组相比,温脾汤可上调IκBα的表达,抑制NF-κB p65的过度活化。结论温脾汤能减轻5/6肾切除对大鼠肾功能的损伤,这一作用与其能降低肾组织NF-κB表达的异常增强有关。     

从循证医学角度看阿尔茨海默病的治疗

目的:运用循证医学理论评价中西医疗法治疗阿尔茨海默病的证据强度,为未来的临床研究及决策提供参考依据。方法:依据制定的检索策略严格筛选评价合格文献。对所纳入的文献资料进行定性及定量分析,包括描述性分析、同质性检验、meta分析、敏感性分析及亚组分析。结果:目前,西医对阿尔茨海默病以神经传导介质类药物为主流,其疗效优于非神经传导介质类药物。中医治疗此病的优势尚需更多设计严谨的研究来证实。发表于2002年以后及以迷你心智状态检查表为疗效评价标准的研究同质性较高。比较性研究较试验性研究估算的比值比高1.5倍,以中医药学会制定的结果指标所估算的疗效为迷你心智状态检查表指标的2.58倍(4.79/1.86)。结论:符合纳入标准的试验不多,且入选的随机试验和(或)半随机试验质量不高,比较性研究之证据等级也不高,在此基础上的meta分析结果外在效度较低。中医药治疗阿尔茨海默病的有效性仍需要研究质量良好的随机对照试验之科研成果来支持。     

第八届全国中西医结合实验医学学术研讨会纪要

2006年10月25-29日,第八届全国中西医结合实验医学学术研讨会在扬州大学医学院召开：会议由中国中西医结合学会实验医学专业委员会主办、扬州大学医学院承办：本次学术研讨会其收到论文110篇,其中基础研究论义92篇,临床研究论文7篇,文献综述论文11篇,共有代表62名参加会议：会议就相荚领域的研究分别从：（1）中西医结合实验方法的基本思路、原则和方法;