加快中医药实验室标准操作程序(SOP)建设

１９９９年,北京中医药大学按照 ＧＤＰ的要求对实验室进行了规范化管理,结合申报国家中医药管理局三级实验室,率先在中医院校开展了标准操作程序（ＳＯＰ,Ｓｔａｎｄａｒｄ Ｏｐｅｒａｔｉｏｎ Ｐｒｏｃｅｄｕｒｅ）的制字工作。ＳＯＰ是将操作过程用书面的形式记录下来,即要求形成语言简洁、明确的指令性书面文件,使其操作有章可循,作到标准化、规范化。ＳＯＰ的制定要有科学性、合理性和可操作性,要有极高的重现性、稳定性和可遵循性。它使实验操作更具体、更详细,更易于掌握,是实验方法技术和注意事项等多方面的指南。 ＳＯＰ的制定和执行是一个漫长而艰巨的工程,是中医走向世界的重要步骤。 ＳＯＰ的制定将加快中医药行业走向世界的步伐。     

复方鳖甲软肝片抗肝纤维化机制的实验研究

目的　研究复方鳖甲软肝片 (FFBJRGP)抗肝纤维化作用机制 ,为FFBJRGP的临床应用及抗肝纤维化药物的研发提供参考。方法　应用Chevallier半定量计分系统、酶图法、免疫组织化学、核酸原位杂交及图像分析等技术方法 ,系统观测高、中、低剂量FFB JRGP治疗CCl4诱导肝纤维化模型后各时间段肝组织内关键性纤维化指标的变化 ,包括主要细胞外基质 (ECM)蛋白、基质金属蛋白酶(MMPs)及其抑制剂(TIMPs)表达量及酶活性 ,肝星状细胞 (HSC)的活化与增殖状况 ,以及MMP和膜型MMP(MT MMP)mRNA的表达等。结果　与对照组比较 ,不同剂量FFBJRGP治疗 3个月、6个月结束时及停药后 3个月和 6个月肝组织Chevallier纤维化评分均明显减少(P <0 0 1或P <0 0 5 )。各观察时间段肝组织内TIMP 1和TIMP 2表达量不同程度减少 ,其中高、中治疗剂量组于治疗 3个月结束时降至最低 ,而MMP 2、MMP 13酶降解活性达高峰 ,并维持较高水平至停药后 3个月 ,MMPs和MT MMPs酶蛋白及mRNA表达明显上调 ,肝组织内TGF β1及其mRNA表达、α SMA阳性HSC数量显著减少 ;Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原降解幅度与MMPs及MT MMPs表达量及酶活性大致呈平行关系。结论　FFBJRGP可能通过多靶位影响肝纤维化逆转及形成环节产生抗肝纤维化疗效     

痛经分虚实,药膳来调养

中医认为痛经主要是由情志所伤、起居不慎或外邪等引起,并与本人体质、经期及经期前后特殊的生理环境有一定关系,这个时期受到致病因素的影响,导致冲任气血运行不畅,经血运行受阻,以致“不通则痛”;     

ER介导鼠尾草酚抑制乳腺癌细胞MCF-7增殖效应的分子机制研究

目的研究迷迭香活性提取物鼠尾草酚抑制雌激素受体阳性乳腺癌细胞MCF-7增殖效应的分子机制。方法以雌激素受体ER-α、ER-β特异性拮抗剂MPP、PHTPP为工具药,采用MTT法观察鼠尾草酚对MCF-7细胞增殖的影响,采用流式细胞术检测不同浓度鼠尾草酚对MCF-7细胞周期的影响;采用Western blot法检测MCF-7细胞周期蛋白Cyclin B1的表达情况。结果1×10~(-4)～1×10~(-7)mol/L鼠尾草酚能明显抑制MCF-7细胞的增殖,抑制作用被雌激素受体拮抗剂ICI 182,780减弱,被ER-α拮抗剂增强,被ER-β拮抗剂减弱;鼠尾草酚使MCF-7细胞产生S期阻滞现象,同时使Cyclin B1表达减少。结论鼠尾草酚能抑制雌激素受体阳性乳腺癌细胞MCF-7的增殖,其作用机制可能是通过雌激素受体介导,其中ER-β比ER-α起着更主要的作用;同时,鼠尾草酚能使MCF-7细胞阻滞在S期可能是其抑制MCF-7细胞增殖、分裂的作用机制之一。     

基于GPER/PI3K/AKT 通路探究四物汤对成骨细胞的雌激素样效应及其分子机制

目的：利用SD大鼠颅骨原代培养成骨细胞研究四物汤的雌激素样效应及其分子机理。方法：40只未性成熟SD大鼠,体重50 g,按照随机分组原则分为5组：正常对照组、雌激素组和四物汤高、中、低剂量组。四物汤灌胃给药,持续4天后腹主动脉取血,制备含药血清。利用出生72 h内的乳鼠提取并培养原代成骨细胞（rats osteoblast,ROBs）,并选取第2或3代的细胞进行实验研究。用四物汤含药血清作用ROBs细胞,并分别加入G蛋白偶联雌激素受体（GPER）的特异性激动剂G1和特异性拮抗剂G15作为工具药,通过MTT法检测各组含药血清对ROBs细胞增殖的影响;通过细胞免疫荧光法检测含药血清对ROBs PI3K、AKT、p-Akt表达的影响。结果：显微镜下形态学观察和ALP结果表明,原代ROBs提取和培养成功;四物汤含药血清可促进ROBs增殖（P<0.05或P<0.01）,该促增殖作用在加入拮抗剂G15后明显减弱（P<0.01）,加入激动剂G1后明显增强（P<0.05或P<0.01）;利用细胞免疫荧光技术检测发现四物汤含药血清可提高PI3K、p-Akt在ROBs细胞的荧光表达强度,且该效应在加入G1后增强（P<0.05或P<0.01）,加入G15后减弱（P<0.05）。结论：四物汤可通过GPER通路发挥雌激素样效应,促进成骨细胞增殖,提高GPER介导下游信号分子PI3K、p-Akt的表达水平。     

复方鳖甲方治疗实验大鼠特发性肺纤维化的超微结构观察

目的研究复方鳖甲方治疗博莱霉素诱导的实验大鼠特发性肺纤维化(Id iopathic pulmonaryfibrosis IPF)的超微结构变化。方法180只SD雄性大鼠随机分为6组,假手术对照组、模型组、阳性药物对照组及复方鳖甲方高、中、低剂量组。在药物治疗的第7、14、28天,每次每组随机抽取大鼠10只麻醉后取材,常规固定制成切片,光镜观察其结构和胶原变化。通过图像分析系统,测定支气管周围及肺泡透光区、致密区的平均光密度。常规制造电镜切片观察其超微结构。结果光镜观察显示复方鳖甲方可降低肺纤维化程度。图像分析表明:假手术组和模型组在7、14、28 d之间光密度无显著性差异;其余各组三阶段之间有不同差异。电镜观察,复方鳖甲方各组在7、14、28 d胶原纤维含量均明显少于模型组和阳性药物组,基膜区域性折叠、扭曲或缺损。细胞外基质沉积、呼吸膜增厚等现象也明显好于模型组和阳性药物组。结论复方鳖甲方有明显抑制实验大鼠IPF胶原纤维增生的作用。     

雌激素或雌激素样物质对心血管系统的影响及其作用途径与机制

更年期女性因体内雌激素水平降低致雌激素效应减弱,使更年期心血管疾病发病率增高。作为1种重要的固醇类激素,雌激素的作用靶点分布广泛,生物学效应复杂多样,能参与机体多个器官系统功能的调节;但雌激素或雌激素样物质均是通过经典的雌激素受体(ER)α和ERβ或G蛋白偶联的雌激素受体(GPER)等介导的基因或非基因传导通路发挥生物学效应的。雌激素对心血管系统经受体介导的作用途径及其机制的研究对女性更年期心血管疾病的临床治疗具有重要指导意义。本文将就雌激素或雌激素样物质影响心血管系统的作用途径与机制进行综述。     

他莫昔芬对人子宫内膜癌细胞增殖及细胞内钙的影响

目的探讨他莫昔芬（Tamoxifen,TAM）对人子宫内膜癌细胞Ishikawa细胞周期及细胞内Ca^2＋的影响。方法利用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法测定TAM对细胞增殖量效的影响;采用流式细胞仪检测TAM对Ishikawa细胞周期的影响;应用激光共聚焦显微镜动态检测TAM作用后细胞内Ca^2＋的变化。结果TAM浓度为1×10^-9～1×10^-6mol/L时,呈剂量依赖性促进Ishikawa细胞的增殖,TAM浓度为1×10^-7mol/L时,作用最显著;TAM（10^-7mol/L）可促进细胞周期由G0/G1期进入S期,G0/G1期的DNA含量由51.58%下降到44.85%,S期的DNA含量由34.73%上升到43.64%;TAM使细胞内钙的荧光强度快速升高,约在20 s后开始增高,90 s左右到达峰值,约为静息状态的2.52倍,持续约120 s。结论TAM通过调节细胞周期和介导细胞内Ca2＋浓度的快速增高来促进Ishikawa细胞增殖。     

银杏叶活性成分的提取制备及质量标准、测定方法的研究进展

本文综述银杏叶活性成分的提取工艺、测定方法及其制剂质量控制的最新研究进展。     

肝血窦壁细胞的研究进展

肝窦壁细胞是肝脏的非实质细胞 ,对于肝脏的生理和病理都具有非常重要的作用。本文就肝窦壁细胞的形态、功能及其与肝脏的病理生理的关系进行了简要的概述 ,并就肝窦壁细胞的研究进展作一综述 ,以期为这方面的研究提供一些线索