神经生长因子对新生鼠缺氧缺血性脑损伤闪光视觉诱发电位的影响

目的 探讨闪光视觉诱发电位(F-VEP)反映新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)的敏感性;研究神经生长因子(NGF)对新生鼠HIBD保护作用。方法 7日龄SD大鼠,制成HIBD动物模型后随机分两组:HIBD模型未治疗组,HIBD模型NGF治疗组;另设正常对照组。观察正常对照组及HIBD后F-VEP改变;NGF对HIBD模型新生大鼠体重增长、死亡率、左右脑重量及F-VEP波形影响。结果 HIBD模型NGF治疗组体重增长、死亡率、患侧脑重量与未治疗组相比均有显著差异(P均<0.01);治疗组左右脑重量无显著差异,而未治疗组左右脑重量差异显著(P<0.01);HIBD模型NGF治疗组与未治疗组即刻F-VEP潜伏期均较对照组明显延长(P<0.01),波幅显著降低(P<0.01).NGF未治疗组7 d后与对照组相比F-VEP潜伏期明显延长,波幅显著降低(P均<0.01).NGF治疗组与未治疗组相比F-VEP潜伏期明显缩短,波幅显著升高(P均<0.01)。结论 F-VEP主波潜伏期。波幅可较迅速反映HIBD后脑功能状态;NGF治疗可减轻HIBD后脑萎缩,改善脑功能。     

Lipoxin A4受体样蛋白基因转染增强Lipoxin A4拮抗结缔组织生长因子诱导的人肺成纤维细胞增殖

目的克隆Lipoxin A4受体样蛋白(LRLP)基因,并转染人肺成纤维细胞(HLF).观察其增强Lipoxin A4拮抗结缔组织生长因子(CTGF)诱导的细胞增殖作用.方法构建LRLP与绿色荧光蛋白(GFP)融合基因的真核表达载体pEGFP/LRLP,并转染HLF,用G418筛选稳定表达融合基因的细胞克隆株HLF/LRLP.用10 nmol/L Lipoxin A4预处理HLF和HLF/LRLP细胞30 min后,加入1 μg/mlCTGF诱导细胞增殖.MTT法检测细胞增殖抑制率.流式细胞术检测细胞周期.Western blot检测细胞周期蛋白D1的蛋白表达量.凝胶迁移率改变试验检测信号转导子和转录激活子3(STAT3)的DNA结合力.结果 (1)成功建立稳定表达LRLP和GFP融合基因的HLF/LRLP细胞株.(2) 1 μg/ml CTGF刺激24 h,可显著诱导HLF增殖.Lipoxin A4预处理对其有抑制作用,10 nmol/L Lipoxin A4对HLF/LRLP的细胞增殖抑制率显著高于对HLF细胞的增殖抑制率(P<0.05).(3)与未转染和空载体转染的HLF相比,10 nmol/L Lipoxin A4诱导更多的HLF/LRLP细胞生长停滞在G0/G1期(P<0.05).(4) 10 nmol/L Lipoxin A4拮抗CTGF诱导的细胞周期蛋白D1表达上调,并且对HLF/LRLP细胞的拮抗作用强于对HLF细胞(P<0.05).(5) 10 nmol/L Lipoxin A4拮抗CTGF诱导的STAT3 DNA结合力上调,并且对HLF/LRLP细胞的拮抗作用强于对HLF细胞(P<0.05).结论 LRLP基因转染,增强Lipoxin A4 拮抗CTGF诱导的人肺成纤维细胞增殖.     

以血尿、蛋白尿为首发症状的肝豆状核变性

肝豆状核变性(HLD)又称Wilson病,是以铜代谢障碍为特征的常染色隐性遗传性疾病,铜易在肝、脑(豆状核)沉积引起以急慢性肝损伤、锥体外系损伤.但HLD患者铜亦可在肾内沉积,从而引起肾脏损害,临床以血尿、蛋白尿为首发症状的HLD并不少见,极易误诊.     

母乳中脂联素水平及其影响因素的研究

【目的】调查母初乳和成熟乳中脂联素水平并探讨其与母婴之间的关系。【方法】应用ELISA测定母乳脂联素水平,分析母乳脂联素与母亲体质指数(body mass index,BMI)及母、脐血糖、胰岛素水平的关系。【结果】母乳中含有丰富的脂联素,初乳中脂联素水平(27.9μg/L,5.7-367.1μg/L)明显高于成熟乳(10.9μg/L,3.0-179.6μg/L)(P<0.01)。进一步,母初乳中脂联素水平与母亲妊娠晚期BMI呈临界相关(r=0.33,P=0.069),与母血脂联素水平呈显著正相关(r=0.53,P<0.01),母初乳脂联素水平亦与脐血糖(r=0.52,P<0.01)及脐血胰岛素水平正相关(r=0.53,P<0.01)。【结论】母乳中含有丰富的脂联素,且与母血及母亲BMI相关。母乳中持续存在的脂联素在母乳喂养儿代谢发育中可能有着潜在的意义。     

骨髓间充质干细胞向神经细胞分化的可塑性研究

骨髓中至少存在两种骨髓干细胞(BMSCs),即造血干细胞(HSCs)和间充质干细胞(MSCs)。其中MSCs除具有自我更新和多向分化的潜能外,更具有很强的可塑性。无论是在体外实验、还是在体内实验,MSCs都可以向中枢神经系统(CNS)神经细胞分化,包括神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞等。在此对以下三个方面的问题进行综述:MSCs可塑性在CNS组织维护和修复中发挥作用的研究现状、MSCs可塑性发生的可能机制以及目前MSCs可塑性研究中面临的挑战。     

73例低出生体重儿发育支持护理

发育支持性护理(development supportive care,DSC)是改变新生儿重症监护病房(NICU)环境和照顾方式,从而预先保障早产儿及其家人的身心健康的护理方式,它要求护理人员能预先估计早产儿生长发育的应激压力,给予支持性的措施,缓解压力,促进发育[1].我院新生儿重症监护病室2005年1月～2006年10月对收治的73例早产儿开展了新生儿个别化发育支持性护理.现将护理体会总结如下.     

支气管哮喘易感基因血清类黏蛋白1样蛋白3的研究进展

支气管哮喘(简称哮喘)是一种慢性气道炎症性疾病,由遗传及环境因素共同作用而形成,哮喘的遗传率高达36%～75%.     

心肌营养素-1在窒息新生大鼠心肌和外周血血浆中的表达及神经调节蛋白-1的干预作用

目的 探讨心肌营养素-1(CT-1)在窒息新生大鼠心肌和外周血血浆中的表达,以及神经调节蛋白-1(NRG-1)的干预作用.方法 新生7日龄大鼠90只,随机分成窒息组(n=40)、正常对照组(n=10)和NRG-1预处理组(n=40).采用颈动脉结扎联合缺氧法制备新生大鼠窒息模型.NRG-1预处珲组在缺氧缺血前30 min腹腔注射1 mg/kg NRG-1.分别在造模后6,12、24、48 h各时间点取其外周血和左心室前壁心肌,酶联免疫吸附法榆测其外周血血浆CT-1蛋白的表达.采用Western blot检测其心肌CT-1蛋白表达.结果 窒息组新生大鼠外周血血浆CT-1的表达在各时间点均显著高于正常对照组,24 h达到高峰(Pa<0.05);窒息后24 h,新生大鼠外周血血浆CT-1的表达与CK-MB水平呈显著正相关(r=0.733 P<0.01).窒息后新生大鼠心肌中CT-1的表达逐渐增加,在各时间点均显著高于正常对照组(Pa<0.05).其心肌中CT-1蛋白表达量在24 h组(1 211.9±237.7)(P<0.05);窒息后24 h,NRG-1预处理组外周血血浆CT-1蛋白表达[(1 287.7±18.9)ng/L]显著高于窒息组[(712.5±24.6)ng/L](P<0.05).结论 窒息可导致新生大鼠心肌和外周血血浆CT-1的表达增加.CT-1可能为心肌细胞损害的诊断提供一个新的检测指标.NRG-1可通过诱导CT-1表达上调,产生保护心肌的作用.     

CD2AP真核表达载体的构建及在COS-7细胞中的表达定位

目的:构建pEGFP-CD2AP真核表达载体,检测其在COS-7细胞中的表达.方法:PCR扩增CD2相关蛋白(CD2-associated protein,CD2AP)全长编码序列,PCR产物连接入pGEM T-Easy载体,经测序确认无误后,亚克隆入pEGFP-C2构建pEGFP-CD2AP真核表达载体,采用Lipofectamine 2000转染COS-7细胞,荧光显微镜检测报告基因表达产物EGFP.结果:pEGFP-CD2AP表达载体转染COS-7细胞后,可在细胞内观察到报告基因和目的基因的表达产物.结论:pEGFP-CD2AP真核表达载体构建成功,并可在细胞内表达,这将为今后的CD2AP功能研究奠定基础.     

大鼠骨髓间充质干细胞谷氨酸诱导后Smac基因的表达及其意义

目的探讨骨髓干细胞（BMSCs）经谷氨酸培养后Smac基因表达情况及其是否参与了谷氨酸诱导的BMSCs凋亡调控。方法将原代培养的大鼠骨髓间充质干细胞，用流式细胞术鉴定细胞表型；加入30mmol／L谷氨酸培养后，采用DAPI荧光染色法，观察凋亡细胞的形态；用PL／Annexin—V双染法流式细胞仪计数各组（0、10、30、50mmol／L谷氨酸组）凋亡细胞的比例，通过逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）观察经30mmol／L、50mmol／L谷氨酸作用24h后Smac基因mRNA的表达变化。结果培养的BMSCs经流式细胞术鉴定发现：CD29，CIM4和CD105表达阳性，CIM5，CD14和CD34表达阴性，具备BMSCs的特征；经谷氨酸培养后，可见BMSCs细胞核皱缩，边聚，双核状；谷氨酸诱导组较多细胞呈凋亡改变，且随着谷氨酸浓度的增加，凋亡细胞的百分率也相应地增加（分别为14．24％、30．72％、93．31％）；RT—PCR法发现经30和50mmol／L谷氨酸作用后，BMSCs Smac基因表达较对照组升高（P〈0．05），且随着谷氨酸浓度的增加，Smac基因表达也相应增加。结论BMSCs经谷氨酸培养后Smac基因存在高表达，它可能参与了谷氨酸诱导的BMSCs凋亡调控。