沉默Par-4基因表达可抑制肺泡上皮细胞凋亡

目的 研究促凋亡基因Par-4沉默对氧化应激导致的肺泡上皮细胞凋亡的影响.方法 培养人肺泡Ⅱ型上皮细胞A549细胞.利用过氧化氢诱导细胞凋亡.利用小RNA干扰(siRNA)技术,靶向诱导Par-4基因沉默.设立正常对照组(常规培养细胞)、过氧化氢组(1.0 mmol/L过氧化氢处理细胞)、过氧化氢+Par-4-siRNA组(1.0 mmol/L过氧化氢和Par-4-siRNA转染的细胞).设非抑制序列转染的对照组.流式细胞术测定各组细胞凋亡百分率.Western blot检测促凋亡基因Smac蛋白表达量.凝胶迁移率改变试验测定转录因子E2F1的DNA结合力.比色法检测Caspase-3酶活性.实验结果采用单因素方差分析(F检验和g检验).结果 过氧化氢+Par-4-siRNA组细胞凋亡百分率(29.7±2.3)%显著低于过氧化氢组(54.2±4.1)%,q=8.91,P＜0.01.Par-4-siRNA的转染显著抑制过氧化氢诱导的肺泡上皮细胞中Smac蛋白表达、E2F1DNA结合力和caspase-3活性上调.结论 采用siRNA诱导Par-4基因沉默,可减少氧化应激导致的肺泡上皮细胞凋亡.其分子机制可能和抑制Smac蛋白表达、抑制E2F1 DNA结合力和抑制caspase-3活性有关.

Abstract：

Objective To investigate the effects of Par-4 gene silence on hydrogen peroxide-induced apoptosis in alveolar epithelial cells. Method The alveolar epithelial cells A549 were cultured and exposed to hydrogen peroxide. The siRNA sequences targeted Par-4 gene was chemically synthesized and transfected to A549 cells with or without the exposure of hydrogen peroxide. The cells were divided into normal control groups, hydrogen peroxide-treated group(The cells were treated with 0. 1 mmol/L hydrogen peroxide), hydrogen peroxide and Par-4-siRNA-treated group(The cells were treated with 0. 1 mmol/L hydrogen peroxide after transfection of Par-4-siRNA), Non-specific DNA sequence transfection control group. The apoptosis of A549 cells was quantified by flow cytometry. The expression of Smac protein was detected by Western blot.Electrophoretic mobility shift assay was applied for evaluating the change of E2F1 DNA binding activity. Relative activity of Caspase-3 was detected by clolorimetric assay. Results The percent of apoptotic cells in hydrogen peroxide and Par-4-siRNA-treated group was (29.7 ± 2.3) %, which was significantly lower than that of hydrogen peroxide-treated group [(54.2 ± 4.1)%, q= 8.91, P ＜ 0.01)]. Par-4 siRNA could significantly suppress the increase of Smac protein, E2F1 DNA binding activity and caspase-3 activity induced by hydrogen peroxide in A549 cells. Conclusions Par-4 gene silence induced by siRNA might inhibit the apoptosis of alveolar epithelial cells, which might be resulted from suppression of the up-regulation of Smac gene expression, E2F1 DNA binding activity and caspase-3 activity.     

中国20个城市2～<7岁儿童血清维生素A和维生素D水平现况调查

目的调查我国20个城市2～<7岁儿童血清维生素A和维生素D水平。方法横断面研究, 2018年9月至2019年9月在中国20个城市中共招募2 924名2～<7岁健康儿童, 按年龄分为2～<3岁、3～<5岁和5～<7岁组。对入组儿童进行人口经济学特征及相关健康知识问卷调查, 测定儿童体重和身高, 采用高效液相色谱-串联质谱法检测儿童血清维生素A、D水平。采用χ2检验和多因素Logistic回归分析维生素A、D缺乏和不足的影响因素。结果 2 924名儿童年龄4.33(3.42, 5.17)岁, 男1 726名(59.03%)、女1 198名(40.97%)。总体儿童维生素A、D缺乏率分别为2.19%(64/2 924)和3.52%(103/2 924), 不足率分别为29.27%(856/2 924)和22.20%(649/2 924)。10.50%(307/2 924)的儿童维生素A、D均不充足。3～<5岁和5～<7岁组儿童维生素A(χ2=7.91、8.06, 均P=0.005)、维生素D(χ2=71.35、115.10, 均P<0.001)...     

高氧肺损伤新生大鼠肺组织中SPOCK2基因表达的研究

目的：探讨 SPOCK2 基因在高氧肺损伤新生儿支气管肺发育不良（bronchopulmonary dysplasia,BPD）大鼠模型中的表达意义。方法：利用高氧肺损伤诱导 BPD 动物模型,将新生 SD 大鼠随机分成空气对照组、高氧模型组。HE 染色观察肺组织病理改变,qPCR 法检测肺组织中 SPOCK2 mRNA 的表达水平,免疫组化法测定肺 SPOCK2 蛋白的表达。同时在体外利用高氧刺激 A549 人肺上皮细胞,qPCR 法检测细胞 SPOCK2 mRNA 的表达水平。结果：成功构建 BPD 新生大鼠模型。HE 染色显示高氧模型组肺组织均产生类似 BPD 的病理损伤,并且生后10、14 d高氧模型组大鼠肺组织辐射状肺泡计数（pulmonary radical alveolar counts,RAC）值较空气对照组显著减少,差异有统计学意义（P < 0.05）。免疫组化显示空气对照组 大鼠肺组织中SPOCK2 蛋白表达量高于高氧模型组,生后10、14 d空气对照组肺组织SPOCK2 蛋白表达呈阳性。qPCR结果示空气对照组大鼠肺组织中SPOCK2 mRNA 表达量随时间递增,于生后18 d时表达量最高,生后24 d时仍处于高值（P < 0.05）,成年时下降;与空气对照组比较,高氧模型组大鼠肺组织中SPOCK2 mRNA 表达量降低,生后10、14 d时两组差异有统计学意义（P < 0.05）。高氧模型组 A549细胞SPOCK2 mRNA 表达量高于空气对照组（P < 0.05）,且有先上升后下降的趋势。结论：SPOCK2 基因可能参与肺发育过程,并可能在高氧刺激时对肺组织起保护作用。     

儿科病房健康教育的实施体会

本科在原有经验的基础上通过不断补充、完善,采取适时宣教、按需宣教、反复宣教的儿科病房健康教育方法,取得良好效果,现报告如下。1临床资料1.1对象与分组以2006年3月至2008年8月收治的患儿231例为研究对象,随机分为观察组和对照组。对照组103例,其中男61例,女42例,平均年龄3.8岁。其中,呼吸道感染59例,肠炎4例,     

ORMDL3基因第一内含子中新启动子区的鉴定

目的构建表达血清类黏蛋白1样蛋白3(ORMDL3)基因第一内含子中新启动子区的质粒,并研究其功能特征。方法以人基因组DNA为模板,PCR扩增ORMDL3基因第一内含子内新转录起始位点上下游776bp启动子区片段,酶切并连接此片段至pGL3-basic载体,构建含有ORMDL3基因第一内含子中新启动子区的基因重组体,并转染人胚肾293细胞。荧光素酶检测报告基因启动子的活性,计算相对活性单位。生物信息学方法分析转录因子结合位点。结果成功构建含有新启动子的重组质粒。与pGL3-basic空载体相比,新启动子活性明显增强,并定位于转录起始位点-363bp至-63bp之间,且该区域存在Sp1、GATA-1等转录因子的结合位点。结论 ORMDL3基因第一内含子中新转录起始位点上游具有启动子活性,在-363bp至-63bp区域存在转录调控元件,且Sp1、GATA-1等转录因子可能参与其转录调控。     

早产儿与足月儿肺动脉高压的原发疾病调查

目的：探讨新生儿肺动脉高压的相关高危因素。方法：收集近3年南京医科大学第一附属医院儿科收治的肺动脉高压新生儿41例,分为足月儿组和早产儿组,回顾性分析了两组的临床资料与新生儿肺动脉高压的关系。结果：早产儿组23例,足月儿组18例。早产儿组胎膜早破、胎盘早剥、绒毛膜羊膜炎、子痫的发生率高于足月儿组,差异有统计学意义（P＜0.05）。足月儿组的孕母妊娠期糖尿病5例（占27.8%）,早产儿组孕母妊娠期糖尿病共1例（占4.3%）,与足月儿组比较,差异有统计学意义（χ2=4.437,P=0.035）。与足月儿组相比,早产儿组的原发病以呼吸窘迫综合征为主（χ2=19.158,P＜0.001）,容易合并肺出血（χ2=4.433,P=0.035）、颅内出血（χ2=8.715,P=0.003）。足月儿组原发疾病主要为先天性心脏病（室间隔缺损）（χ2=10.786,P=0.001）。新生儿肺炎在两组均有较高发生率,但差异无统计学意义（χ2=0.327,P＞0.05）。两组之间并发代谢性酸中毒、新生儿低血糖、气胸、败血症等统计比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。早产儿组治愈21例,死亡2例,足月儿组治愈15例,死亡3例,治疗效果两组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。结论：早产儿肺动脉高压的高危原发疾病是呼吸窘迫综合征、重症肺炎、肺出血以及孕母有胎膜早破、胎盘早剥等并发症;患有先天性心脏病如室间隔缺损的足月儿,要重视可能伴有的肺动脉高压并及时诊治。     

男性肾病综合征患儿行为及其影响因素的调查

目的 了解男性肾病综合征（NS）患儿的行为及其影响因素。方法 采用Achenbach’s儿童行为量表（CBCL）对32例男性NS患儿（NS组）及45名正常儿童（正常组）进行调查。结果 NS组体诉、社交退缩及攻击性行为因子评分显著高于对照组（p〈0．05，P〈0．01）。痰病病程、年均住院次数、年均复发次数及临床类型为影响NS患儿行为的因素（P〈0．05，P〈0．01）。结论 男性NS患儿的行为问题主要表现为体诉、社交退缩及攻击性，需早期行心理干预治疗。     

以特殊表现为首发症状的小儿急性白血病

目的 观察小儿急性白血病的特殊首发临床表现；以期引起儿科医师对不典型白血病的警惕，减少误诊。方法 回顾分析86例小儿急性白血病的特殊首发临床表现。结果 86例小儿急性白血病中，以特殊临床表现为首发症状者共有32例，占急性白血病患儿的37.21%，其中骨关节痛15例（46.88%)，肿块形成10例（31.25%)，肾脏浸润2例，牙痛2例，胸膜，心包浸润1例，腹痛1例，肛周脓肿1例，有9例被误诊为其它疾病（9/32，28.13%)。结论 急性白血病可累及全身各组织器官，由于累及部位不同，临床表现各异，以发热、贫血、出血和肝脾淋巴结肿大起病者诊断不难，但以特殊表现为首发症状出现时，易误诊为其它疾病。     

小儿伤寒耐药性和抗生素治疗二十年回顾与分析

伤寒在我国较为常见 ,耐药伤寒时有发生 ,而对伤寒沙门氏菌的耐药性和临床抗生素选择的变迁报道较少。本文总结 1980年至 1999年南京医科大学第一附属医院儿科及南京医科大学第二附属医院儿科收治的伤寒患儿 2 16例 ,对其耐药性及临床抗生素选择的变迁作回顾性分析 ,现报告如下。临床资料一、一般资料本组 2 16例伤寒患儿 ,均经细菌学和 /或血清学检验证实。按前 10年及后 10年分Ⅰ组 (1980年～1989年 ) 132例 ,男 73例、女 5 9例 ,平均年龄 (7 0±0 3)岁 ;Ⅱ组 (1990年～ 1999)年 84例 ,男 4 4例 ,女4 0例 ,平均年龄 (6 2± 0 4 )岁。两…     

视觉诱发电位监测丹参对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤疗效的研究

视觉诱发电位 (VEP)属脑功能学检查 ,近 10年来国外学者研究认为 ,测试新生儿闪光视觉诱发电位 (F- VEP)以评估评其中枢神经系统功能状态有灵敏反应。关于 VEP在新生儿缺氧缺血性脑病 (HIE)发生早期动态改变特征的报道国内外尚不多见 ,因此本课题建立了缺氧缺血性脑损伤(HIBD)动物模型 ,并设丹参治疗组 ,对其 F- VEP改变进行研究。一、材料和方法1.研究对象 :选择正常 7日龄、体重 14～ 18g SD新生大鼠 ,雌雄不拘 ,由南京医科大学动物实验中心提供。2 .实验方法 :实验动物分组 :SD新生鼠共 12 0只 ,按同窝随机分为 3组 :假手术组…