益气养阴合剂中10种有效成分的含量测定

目的：建立同时测定益气养阴合剂中丹参酮ⅡA、丹酚酸A、丹酚酸B、毛蕊异黄酮、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素、五味子乙素、丹皮酚含量的方法。方法：采用Hedera C₁₈ ODS-2色谱柱（4.6 mm×250 mm，5 μm），以乙腈-0.1%磷酸水溶液梯度为流动相，柱温30℃，流速1.0 mL·min^-1，检测波长215nm。结果：毛蕊异黄酮、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、丹皮酚、五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素、五味子乙素、丹参酮ⅡA、丹酚酸A、丹酚酸B浓度分别在2.93~62.76（r=0.999 6）、2.53~54.06（r=0.999 9）、2.78~59.64（r=0.999 9）、2.72~58.38（r=0.999 2）、2.79~59.76（r=0.999 6）、2.87~61.44（r=0.999 7）、2.61~63.66（r=0.999 2）、2.28~48.78（r=0.999 6）、2.99~64.08（r=0.999 5）、2.69~57.66（r=0.999 1）范围内与峰面积呈良好的线性关系，平均回收率在93.23%~100.68%之间。结论：3批样品测定结果表明，建立的方法可以用于同时测定益气养阴合剂中10种成分的含量。     

手足口病并心肌损害患儿血清细胞因子的变化

目的探讨IL-6、IL-17和IL-25在手足口病(Hand,Footand Mouth Disease,HFMD)并心肌损害发病中的作用。方法用ELISA法检测单纯HFMD组、HFMD合并心肌损害组和对照组儿童血清中IL-6、IL-17和IL-25的浓度,并分析这三种细胞因子的相关性。结果 IL-6的水平随病情加重而增高(P0.05)。IL-17和IL-25在单纯HFMD组增高(P0.05),在心肌损害组下降且与对照组无差别。在单纯HFMD组,IL-6与IL-17,IL-6与IL-25,IL-17与IL-25均成正相关关系(P0.05)。在心肌损害组,IL-6与IL-17、IL-25均无相关性,而IL-17和IL-25呈正相关关系(P0.05)。结论 (1)IL-6、IL-17和IL-25可能相互协同促进单纯手足口病的发展。(2)IL-6参与手足口病合并心肌损害的发生,而IL-17和IL-25可能不参与该过程。     

沉默Par-4基因表达可抑制肺泡上皮细胞凋亡

目的 研究促凋亡基因Par-4沉默对氧化应激导致的肺泡上皮细胞凋亡的影响.方法 培养人肺泡Ⅱ型上皮细胞A549细胞.利用过氧化氢诱导细胞凋亡.利用小RNA干扰(siRNA)技术,靶向诱导Par-4基因沉默.设立正常对照组(常规培养细胞)、过氧化氢组(1.0 mmol/L过氧化氢处理细胞)、过氧化氢+Par-4-siRNA组(1.0 mmol/L过氧化氢和Par-4-siRNA转染的细胞).设非抑制序列转染的对照组.流式细胞术测定各组细胞凋亡百分率.Western blot检测促凋亡基因Smac蛋白表达量.凝胶迁移率改变试验测定转录因子E2F1的DNA结合力.比色法检测Caspase-3酶活性.实验结果采用单因素方差分析(F检验和g检验).结果 过氧化氢+Par-4-siRNA组细胞凋亡百分率(29.7±2.3)%显著低于过氧化氢组(54.2±4.1)%,q=8.91,P＜0.01.Par-4-siRNA的转染显著抑制过氧化氢诱导的肺泡上皮细胞中Smac蛋白表达、E2F1DNA结合力和caspase-3活性上调.结论 采用siRNA诱导Par-4基因沉默,可减少氧化应激导致的肺泡上皮细胞凋亡.其分子机制可能和抑制Smac蛋白表达、抑制E2F1 DNA结合力和抑制caspase-3活性有关.

Abstract：

Objective To investigate the effects of Par-4 gene silence on hydrogen peroxide-induced apoptosis in alveolar epithelial cells. Method The alveolar epithelial cells A549 were cultured and exposed to hydrogen peroxide. The siRNA sequences targeted Par-4 gene was chemically synthesized and transfected to A549 cells with or without the exposure of hydrogen peroxide. The cells were divided into normal control groups, hydrogen peroxide-treated group(The cells were treated with 0. 1 mmol/L hydrogen peroxide), hydrogen peroxide and Par-4-siRNA-treated group(The cells were treated with 0. 1 mmol/L hydrogen peroxide after transfection of Par-4-siRNA), Non-specific DNA sequence transfection control group. The apoptosis of A549 cells was quantified by flow cytometry. The expression of Smac protein was detected by Western blot.Electrophoretic mobility shift assay was applied for evaluating the change of E2F1 DNA binding activity. Relative activity of Caspase-3 was detected by clolorimetric assay. Results The percent of apoptotic cells in hydrogen peroxide and Par-4-siRNA-treated group was (29.7 ± 2.3) %, which was significantly lower than that of hydrogen peroxide-treated group [(54.2 ± 4.1)%, q= 8.91, P ＜ 0.01)]. Par-4 siRNA could significantly suppress the increase of Smac protein, E2F1 DNA binding activity and caspase-3 activity induced by hydrogen peroxide in A549 cells. Conclusions Par-4 gene silence induced by siRNA might inhibit the apoptosis of alveolar epithelial cells, which might be resulted from suppression of the up-regulation of Smac gene expression, E2F1 DNA binding activity and caspase-3 activity.     

早产儿与足月儿肺动脉高压的原发疾病调查

目的：探讨新生儿肺动脉高压的相关高危因素。方法：收集近3年南京医科大学第一附属医院儿科收治的肺动脉高压新生儿41例,分为足月儿组和早产儿组,回顾性分析了两组的临床资料与新生儿肺动脉高压的关系。结果：早产儿组23例,足月儿组18例。早产儿组胎膜早破、胎盘早剥、绒毛膜羊膜炎、子痫的发生率高于足月儿组,差异有统计学意义（P＜0.05）。足月儿组的孕母妊娠期糖尿病5例（占27.8%）,早产儿组孕母妊娠期糖尿病共1例（占4.3%）,与足月儿组比较,差异有统计学意义（χ2=4.437,P=0.035）。与足月儿组相比,早产儿组的原发病以呼吸窘迫综合征为主（χ2=19.158,P＜0.001）,容易合并肺出血（χ2=4.433,P=0.035）、颅内出血（χ2=8.715,P=0.003）。足月儿组原发疾病主要为先天性心脏病（室间隔缺损）（χ2=10.786,P=0.001）。新生儿肺炎在两组均有较高发生率,但差异无统计学意义（χ2=0.327,P＞0.05）。两组之间并发代谢性酸中毒、新生儿低血糖、气胸、败血症等统计比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。早产儿组治愈21例,死亡2例,足月儿组治愈15例,死亡3例,治疗效果两组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。结论：早产儿肺动脉高压的高危原发疾病是呼吸窘迫综合征、重症肺炎、肺出血以及孕母有胎膜早破、胎盘早剥等并发症;患有先天性心脏病如室间隔缺损的足月儿,要重视可能伴有的肺动脉高压并及时诊治。     

青黛提取物对HEL细胞增殖、凋亡和分化的影响

目的研究青黛有效成分在体外对HEL细胞的增殖、凋亡和分化作用。方法应用MTT法检测青黛有效成分对HEL细胞的增殖抑制效应;流式细胞术检测CD14和CD11B,观察HEL细胞单核系分化趋势;流式细胞术AnnexinV-FITC/PI双标记法检测青黛有效成分对HEL细胞的早期凋亡诱导作用。结果与阴性对照组相比25,50,75和100μg/mL青黛有效成分作用下HEL细胞均出现单核系分化趋势,其中100μg/mL的分化趋势最明显;MTT结果显示25,50,75及100μg/mL药物对HEL细胞的生长抑制率分别为16.01%,39.12%,50.06%和59.28%;青黛有效成分可诱导HEL细胞凋亡:25,50,75及100μg/mL药物对HEL的早期凋亡率分别是5.60%,13.7%,17.8%和18.4%,明显高于对照细胞的自发凋亡率(2.70%)(P<0.05)。结论青黛有效成分对体外培养的HEL细胞具有显著抑制增殖作用,且可诱导细胞早期凋亡和单核系分化。     

针灸综合治疗糖尿病周围神经病变的研究概况

针灸综合治疗糖尿病周围神经病变（DPN）可明显改善糖尿病周围神经病变的的相关临床症状,但由于针灸综合治疗方法繁多,如何选择最佳疗法却报道较少.本文通过对近7年来针灸综合治疗糖尿病周围神经病变的相关临床报道做-系统对比与评价,以期判断出临床疗效最佳的方案,从而为临床制定规范化的针灸综合治疗方法提供依据.     

俯卧位用于患儿催吐洗胃效果观察

目的 探讨俯卧位催吐在口服中毒患儿洗胃中的应用价值.方法 将30例误服药物患儿随机分为观察组和对照组各15例.观察组采用俯卧位进行反复催吐洗胃,对照组采用常规坐位反复催吐.比较两组催吐成功率、药物残留率、洗胃并发症发生率以及患儿合作情况.结果 除药物残留项外,另3项观察组显著优于对照组(均P＜0.01).结论 俯卧位催吐应用于患儿洗胃效果好,安全,易于被家长及患儿接受.     

SP-D基因真核表达质粒的构建及鉴定

目的构建并鉴定含肺表面活性蛋白D(SP-D)基因的重组真核表达质粒。方法提取A549细胞的总RNA为模板,用RT-PCR方法扩增含SP-D基因的cDNA,将产物克隆进真核载体pGEFP-N1内,构建含SP-D基因的重组真核表达质粒。将pGEFP-N1-SP-D重组质粒和pGEFP-N1空载体分别转染293T细胞,Western blot法检测SP-D的蛋白表达。结果双酶切鉴定及核酸序列分析证实,SP-D已成功插入真核载体pGEFP-N1内。转染pGEFP-N1-SP-D的293T细胞中检测到高表达的SP-D蛋白。结论成功构建含SP-D基因的重组真核表达质粒,并能在293T细胞中高表达。     

急性早幼粒细胞白血病的并发症及其危险因素分析

目的：总结儿童及青少年急性早幼粒细胞白血病诊治中的主要并发症,分析其发生的危险因素。方法：回顾性分析 2010年1月—2021年5月南京医科大学第一附属医院收治的43例初诊急性早幼粒细胞白血病儿童及青少年病例,总结分析各类并发症的发病率,根据分化综合征临床诊断标准分为分化综合征组和非分化综合征组,采用多因素Logistic回归分析分化综合征发生的危险因素,采用Kaplan-Meier生存分析评估患者的累积无事件生存率和总生存期。结果：43例急性早幼粒细胞白血病患者中,与非分化综合征组比较,分化综合征组的维甲酸诱导后血清铁蛋白、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)、白蛋白都高于非分化综合征组,差异有统计学意义(P ＜ 0.01)。多因素Logistic逐步回归分析显示,外周血白细胞数(white blood cell,WBC)最高值(WBC_max)、血清铁蛋白、LDH和IL-6显著升高是诱导治疗期间发生分化综合征的独立危险因素(P ＜ 0.01)。高危组和低危组累积总生存率和无事件生存率相比,差异无统计学意义。结论：儿童及青少年急性早幼粒细胞白血病诊治过程中可出现出血和分化综合征等多种并发症。维甲酸诱导治疗后的WBC、LDH、血清铁蛋白和 IL-6 等炎症因子过度升高是发生分化综合征的危险因素。