银杏内酯诱导的缺血耐受及相关机制探讨

目的 研究银杏内酯（Gin）预处理诱导PC12细胞对缺血的耐受及相关机制。方法将大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC12株细胞随机分成对照组、缺血9h组、缺血预处理（IP）1.5h＋缺血9h组和银杏内酯预处理＋缺血9h组,用噻唑蓝比色分析、细胞形态学观察、Western印迹法以及凝胶电泳迁移实验等方法比较银杏内酯预处理对PC12细胞缺血模型的影响。结果在PC12细胞缺血模型中,9h缺血可明显降低PC12细胞活力,细胞存活率为（49．3±2．8）％。而银杏内酯24h预处理能显著提高9h缺血细胞的存活率（65．9±2．8）％（P〈0．01）;细胞形态学显示银杏内酯预处理后再缺血处理9h,可明显减轻缺血9h所致的细胞损害,较多细胞保留突起,突起网络依然存在,胞体完好。与对照组比,银杏内酯预处理能明显增加缺氧诱导因子-1d（HIF-1d）蛋白表达（P〈0．01）;银杏内酯预处理诱导表达的HIF-1具有生物学活性,它能与DNA结合,并激活下游基因促红细胞生成素（EPO）蛋白表达（P〈0．01）。结论银杏内酯预处理可以诱导PC12细胞对缺血的耐受,其诱导耐受的作用可能与银杏内酯预处理诱导PC12细胞HIF-1α稳定表达、提高HIF-1与DNA结合活性以及增加其下游基因EPO蛋白表达有关。     

Par-4基因沉默对人骨髓间充质干细胞中Smac基因表达和半胱氨酸蛋白水解酶3酶活性的影响及其抗凋亡作用

目的 研究Par-4基因沉默对人骨髓间充质干细胞(hBMSC)中Smac基因表达和半胱氨酸蛋白水解酶(Caspase)3酶活性的影响及其抗凋亡作用.方法 原代培养hBMSC.谷氨酸诱导hBMSC凋亡.设计和合成两对针对Par-4基因mRNA的小RNA干扰(siRNA)序列(Par-4-SiRNA-1、2),构建真核细胞表达载体,用脂质体介导转染hBMSC,利用G418筛选稳定表达细胞株.实时荧光定量PCR法检测Par-4 mRNA表达水平.流式细胞术测定细胞凋亡百分率.Western印迹测定Smac蛋白表达量.比色法测定Caspase-3酶的活性.结果 设计的Par-4-SiRNA-1、2可显著诱导hBMSC中Par-4基因沉默,Par-4 mRNA水平分别被降低88%、67%,谷氨酸诱导hBMSC凋亡,凋亡百分率为(58.9±8.9)%.Par-4-SiRNA-1可显著拮抗谷氨酸的诱导凋亡作用,凋亡百分率降为(37.2±6.3)%(F=58.26,P＜0.01).Par-4-SiRNA-1对谷氨酸诱导的hBMSC中Smac蛋白表达上调(P＜0.01)和Caspase-3酶活性上调(P＜0.01)有显著的抑制作用(P＜0.01).结论 Par-4基因沉默能拮抗谷氰酸对hBMSC凋亡的诱导作用.其机制可能与Smac基因表达和Caspase-3酶活性被抑制有关.     

蛋白酪氨酸磷酸酶2/核因子-κB途径介导脂氧素A4拮抗系膜细胞白介素6的合成

目的探讨脂氧素A4(LXA4)拮抗白介素(IL)1β促进肾小球系膜细胞IL-6合成的作用，及其信号转导机制。方法LXA4预处理培养的大鼠肾小球系膜细胞，加入IL-1β共同孵育，或单用IL-1β刺激肾小球系膜细胞。应用酶联免疫吸附(EIASA)法检测上清液中IL-6蛋白表达量。用RT—PCR法检测IL-6中mRNA表达量。用免疫印迹法检测含Sre同源区2(SH2)蛋白酪氨酸磷酸酶2(SHP-2)的磷酸化水平。用凝胶电泳迁移率试验(EMSA)检测核因子-κB(NF—κB)DNA结合活性。结果LXA4呈剂量依赖性抑制IL-1β诱导的系膜细胞IL-6蛋白分泌及mRNA表达，拮抗IL-1β诱导的SHP-2磷酸化与NF—κB的活化。应用NF—κB抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)可抑制IL-1β诱导的系膜细胞IL-6蛋白分泌与NF—κB活化。结论LXA4能够拮抗IL-1β促进肾小球系膜细胞IL-6合成，其机制涉及SHP-2／NF—κB信号转导途径。     

家长对哮喘患儿治疗依从性的影响

目的 分析家长对哮喘患儿治疗依从性的影响因素,提高儿童哮喘规范治疗的依从性.方法 通过对320例哮喘患儿家长学历、年龄及地区的调查,统计并分析影响治疗依从性的因素,并观察宣教后,不同患儿家长治疗依从性的变化.结果 不同学历的家长对哮喘患儿治疗依从性存在差异,随着学历的增高,其依从性也增高,大学以上学历家长依从性最好(42.7％),初中以下学历家长依从性最低(13.3％).宣教后,大学以上学历家长的提高幅度最大(P＜0.05).25-34岁年龄组家长依从性最好(50.5％),城市家长依从性均明显高于农村家长(P＜0.05).结论 不同年龄、不同学历及不同地区的家长对哮喘患儿治疗依从性不同,提示在临床上应根据不同组别的家长采取相应的对策,提高患儿规范治疗的依从性.     

骨髓间充质干细胞向神经细胞分化的可塑性研究

骨髓中至少存在两种骨髓干细胞(BMSCs),即造血干细胞(HSCs)和间充质干细胞(MSCs)。其中MSCs除具有自我更新和多向分化的潜能外,更具有很强的可塑性。无论是在体外实验、还是在体内实验,MSCs都可以向中枢神经系统(CNS)神经细胞分化,包括神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞等。在此对以下三个方面的问题进行综述:MSCs可塑性在CNS组织维护和修复中发挥作用的研究现状、MSCs可塑性发生的可能机制以及目前MSCs可塑性研究中面临的挑战。     

母乳中脂联素水平及其影响因素的研究

【目的】调查母初乳和成熟乳中脂联素水平并探讨其与母婴之间的关系。【方法】应用ELISA测定母乳脂联素水平,分析母乳脂联素与母亲体质指数(body mass index,BMI)及母、脐血糖、胰岛素水平的关系。【结果】母乳中含有丰富的脂联素,初乳中脂联素水平(27.9μg/L,5.7-367.1μg/L)明显高于成熟乳(10.9μg/L,3.0-179.6μg/L)(P<0.01)。进一步,母初乳中脂联素水平与母亲妊娠晚期BMI呈临界相关(r=0.33,P=0.069),与母血脂联素水平呈显著正相关(r=0.53,P<0.01),母初乳脂联素水平亦与脐血糖(r=0.52,P<0.01)及脐血胰岛素水平正相关(r=0.53,P<0.01)。【结论】母乳中含有丰富的脂联素,且与母血及母亲BMI相关。母乳中持续存在的脂联素在母乳喂养儿代谢发育中可能有着潜在的意义。     

谷氨酸对PC12细胞中磷酸化肌细胞增强因子2A蛋白表达的影响

目的研究兴奋性氨基酸谷氨酸对PC12细胞中磷酸化肌细胞增强因子2A(P-MEF2A)蛋白表达的影响与意义。方法体外培养PC12细胞,设立正常对照组,0.1、1.0、10.0 nmol/L谷氨酸处理组。Western blot测定P-MEF2A与突触素1的蛋白表达量,并进行2种蛋白表达相关性分析。结果谷氨酸诱导PC12细胞中P-MEF2A蛋白表达升高,呈剂量依赖性(F=51.54 P<0.01)。10.0 nmol/L谷氨酸处理24 h后,P-MEF2A蛋白的表达与突触素1的表达量呈显著负相关(r=-0.788 P<0.01)。结论谷氨酸诱导PC12细胞P-MEF2A表达升高,并与学习记忆调控相关基因突触素1的表达下调有关。     

心肌营养素-1在大鼠缺血再灌注心肌中的表达及神经调节蛋白-1对其表达的促进作用

目的研究大鼠缺血再灌注心肌中心肌营养素-1(CT-1)的表达及神经调节蛋白-1(NRG-1)对其表达的影响。方法制备大鼠缺血再灌注心肌模型,分为模型组(n=8),NRG-1预处理组(n=9),假手术组(n=8)和正常对照组(n=10)。利用RT-PCR技术检测各组CT-1 mRNA表达,计算CT-1 mRNA相对量,并作统计学处理。结果模型组CT-1 mRNA结果(63.96±9.34)高于假手术组(36.16±5.43)和正常对照组(36.84±4.64),三者比较差异有显著性(F=47.37 P<0.01);NRG-1预处理组(89.49±6.99)高于模型组,差异有显著性(t=6.43 P<0.01)。结论大鼠心肌缺血再灌注后CT-1 mRNA表达升高,其原因可能是缺血再灌注激活机体内源性保护机制,NRG-1预处理对心肌的保护作用可能与提高心肌细胞中CT-1的表达有关。实用儿科临床杂志,2006,21(1):29     

神经生长因子对新生鼠缺氧缺血性脑损伤闪光视觉诱发电位的影响

目的 探讨闪光视觉诱发电位(F-VEP)反映新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)的敏感性;研究神经生长因子(NGF)对新生鼠HIBD保护作用。方法 7日龄SD大鼠,制成HIBD动物模型后随机分两组:HIBD模型未治疗组,HIBD模型NGF治疗组;另设正常对照组。观察正常对照组及HIBD后F-VEP改变;NGF对HIBD模型新生大鼠体重增长、死亡率、左右脑重量及F-VEP波形影响。结果 HIBD模型NGF治疗组体重增长、死亡率、患侧脑重量与未治疗组相比均有显著差异(P均<0.01);治疗组左右脑重量无显著差异,而未治疗组左右脑重量差异显著(P<0.01);HIBD模型NGF治疗组与未治疗组即刻F-VEP潜伏期均较对照组明显延长(P<0.01),波幅显著降低(P<0.01).NGF未治疗组7 d后与对照组相比F-VEP潜伏期明显延长,波幅显著降低(P均<0.01).NGF治疗组与未治疗组相比F-VEP潜伏期明显缩短,波幅显著升高(P均<0.01)。结论 F-VEP主波潜伏期。波幅可较迅速反映HIBD后脑功能状态;NGF治疗可减轻HIBD后脑萎缩,改善脑功能。     

三种活检针在小儿肾穿刺中的应用比较

我科自 1 983年起 ,先后应用国产Ｍｅｎｇｈｉｎｉ活检针、意大利产ＴＥＭＮＯ半自动活检针、美国ＢＡＲＤ公司生产的ＭＯＮＯＰＴＹ自动穿刺针进行小儿肾穿刺活检 ,报告如下。对象与方法一、对象56例均为肾小球疾病患儿 ,男 31例 ,女 2 5例 ,年龄 3～1 4岁。在肾穿刺前均进行Ｂ型超声波和 (或 )静脉肾盂造影、凝血功能检查等 ,无肾穿刺活检的相对或绝对禁忌证 ,肾穿刺由本文作者操作。二、方法1 .定位 :采用实时超声引导 ,超声探头为 3 5～ 5ＭＨｚ。患儿俯卧于Ｂ超检查台上 ,上腹部下方垫以沙袋。选择右背部骶棘肌外缘与右肋下缘交界处作…