大鼠MeCP2-shRNA慢病毒表达载体的构建与鉴定

目的 构建并鉴定大鼠MeCP2-shRNA慢病毒表达载体,以便应用RNAi技术进一步研究MeCP2功能.方法 设计针对大鼠MeCP2 mRNA靶序列的小发夹状RNA,化学合成含茎环结构的正义链与反义链,退火形成双链后,与酶切后的pLentiLox3.7载体片段进行连接、转化.用菌落PCR法、酶切及DNA测序鉴定重组克隆.结果 重组克隆经菌落PCR及酶切证实shRNA正确插入慢病毒载体,DNA测序证实插入的序列正确.结论 两个大鼠MeCP2-shRNA慢病毒表达载体的成功构建为应用RNAi研究大鼠MeCP2功能打下了基础.     

Rett综合征与MECP2基因

Rett综合征是一种严重影响儿童精神运动发育的神经遗传病，诊断主要依靠国际上根据临床表现制定的标准，包括典型和非典型Rett综合征两类。该病的遗传方式尚无定论。致病基因是位于染色体xq128的MECP2基因，编码甲基化结合蛋白2。推测致病机制为MECP2基因突变导致蛋白结构和功能异常，使胚胎发育时期应当转录静止的基因继续转录，而这种“转录噪音”对神经系统的生长和发育具有致病作用。典型Rett综合征患儿MECP2基因主要有8种热点突变。MECP2基因作用的下游靶基因尚不清楚。     

高龄老年创伤性颅内血肿患者特点及护理

老年创伤性颅内血肿患者早期症状、体征常表现较轻，但实际伤情重，死亡率高。笔者回顾我院近10年来75岁以上高龄老年颅内血肿患者14例，占同期该年龄组颅脑损伤的82％，其中以跌伤最多见，同时颅内损伤后并发多脏器损伤、功能衰竭是造成或促使老年患者死亡的一个主要原因。     

过度惊吓反应症临床及遗传学特征（附６例报告）

目的　分析6例过度惊吓反应症患儿的临床及遗传学特征。 方法　对2011年6月至2018年5月于北京大学第一医院诊断的6例过度惊吓反应症患儿的临床表现、诊治过程、脑电图（EEG）及神经影像学、遗传学结果等进行分析。 结果　6例中男5例、女1例。6例均为新生儿早期起病，均可因不经意的听觉或触觉刺激诱发过度惊跳反应和全身僵硬症状，3例曾出现短暂窒息发作，1例曾惊吓后摔倒致外伤。6例点鼻反射均阳性，4例合并疝。EEG示1例正常，5例为不典型放电或一过性异常。4例曾行头颅磁共振检查未见明显异常。经遗传学分析，6例中3例携带GLRA1基因杂合突变，2例携带GLRB基因复合杂合突变，1例经全外显子测序未发现基因突变。6例给予氯硝西泮治疗， 1例全身僵硬及过度惊吓反应均基本消失， 5例全身僵硬症状消失、偶有惊跳反应。6例智力发育均正常，2例存在宽基底步态状行走姿势。1例有相同症状而窒息死亡的明确家族史。 结论　过度惊吓反应症具有典型临床表现，点鼻反射阳性，可行基因诊断确诊。该病对氯硝西泮有良好的治疗反应。早期经临床诊断及基因确诊，及时、恰当治疗，对于改善预后至关重要。     

Rett综合征患儿2例MECP2基因大片段缺失突变分析

目的研究Rett综合征患儿2例MECP2基因用常规突变筛查方法未检出异常者是否存在大片段的缺失突变。方法用标准的盐析法从外周血提取基因组DNA,用多重连接依赖的探针扩增法(MLPA)进行突变分析,对存在突变的样本进一步用长片段PCR-DNA直接测序进行验证,同时确定突变在基因组序列中的位置。结果2例典型的Rett综合征患儿发现第四外显子有大片段缺失突变。例1用MLPA方法发现在第四外显子的4d探针位置存在缺失,长片段PCR-DNA直接测序证实在cDNA的第905至1138位之间缺失234个核苷酸,并且插入三个核苷酸(c.905-1138delinsCAC);例2用MLPA方法发现在第四外显子的4d和4a探针位置存在缺失,长片段PCR-DNA直接测序证实在cDNA的第1047至1198位之间缺失152个核苷酸(c.1047-1198del152)。结论对于常规的突变筛查不能检出MECP2有突变的Rett综合征患儿,进一步进行MLPA筛查是必要的。MLPA不仅简便、快速,而且能够发现大片断缺失。     

儿童良性癫痫伴中央颞区棘波的变异型

目的：探讨儿童良性癫痫伴中央颞区棘波（BECT）变异型的电－临床特征、治疗及神经心理学预后。方法：对病程中出现失神样发作、粗大震颤、运动不协调（Ⅰ型）或言语及口部运动障碍（Ⅱ型）等变异型症状的BECT儿童进行系列视频脑电图（VEEG）监测，并对其发作表现、电生理特征、神经心理学损伤及对抗癫痫药物治疗的反应进行分析和随访。结果：9例患儿脑电图（EEG）均显示清醒和睡眠期大量Rolandic区棘慢波发放，慢波睡眠期棘慢波指数在50 ％～85 ％。Ⅰ型变异型症状中，5例失神样发作时EEG为继发双侧同步性2～3 Hz棘慢波节律暴发， 6例粗大震颤患儿经直立伸臂试验证实有局部负性肌阵挛发作，Ⅱ型变异型症状中，6例患儿有言语表达障碍，其中5例有口咽部失用，3例完全失语。2例患儿兼有Ⅰ型和Ⅱ型的电－临床表现。7例患儿有各种神经心理学损伤，Ⅰ型症状者更严重。6例患儿经丙戊酸单用或与氯硝西泮联合治疗有效，3例加用肾上腺皮质激素治疗后症状改善。结论：BECT变异型均伴有明显的EEG恶化。Ⅰ型主要表现为继发性不典型失神和负性肌阵挛发作，神经心理学预后不良；Ⅱ型以口咽部失用为特征，预后较好。丙戊酸、苯二氮卓类药物及肾上腺皮质激素治疗对改善BECT变异型的电－临床症状有效。     

儿童缺血性脑卒中的临床特点及病因分析

目的 总结儿童缺血性脑卒中(IS)的临床特点及病因.方法 对1997年9月-2008年7月在北京大学第一医院儿科住院的65例IS患儿病例资料进行回顾性分析.男42例,女23例;发病年龄3个月～15岁,平均5.2岁.结果常见的神经系统表现依次为肢体偏瘫[58例(89.2%)],中枢性面瘫[36例(55.4%)],惊厥[19例(29.2%)],语言障碍[17例(26.2%)],头痛[12例(18.5%)],感觉障碍[10例(15.4%)],锥体外系症状[5例(7.7%)].神经影像学(CT/MRI)检查显示梗死灶位于基底核区32例(49.2%),其中27例仅有基底核区梗死,5例同时伴其他部位梗死.多脑叶梗死26例(40.0%),顶叶梗死4例(6.2%),半球梗死3例(4.6%),颞叶梗死、丘脑梗死各2例(各3.1%),脑干梗死1例(1.5%).65例患儿中,40例进行了血管影像学检查,其中31例异常,以大脑中动脉受累最常见(26例,83.9%).常见病因为烟雾病(18例,27.7%),头部外伤(16例,24.6%)和感染(14例,21.5%),17例(26.2%)患儿为多病因共存,13例(20.0%)患儿末找到任何病因.结论儿童IS发病高峰为幼儿及学龄前期;最常见的神经功能障碍为肢体瘫痪;神经影像学显示基底核区梗死最常见;常见病因为烟雾病、外伤和感染.     

阵发性运动障碍性疾病的临床特征与分类探讨

目的：总结各类阵发性运动障碍性疾病的临床特征与治疗反应，并对其发病机理、分类加以探讨。方法：对12例阵发性运动障碍性疾病患儿进行了临床观察与随访，及录像脑电图（VEEG）、头颅CT和（或）MRI、铜蓝蛋白、角膜K－F环和肌电图（EMG）检查。结果：本组中6例为阵发性运动性舞蹈手足徐动（PKC），6例为阵发性肌张力不全舞蹈手足徐动（PDC），无阵发性运动诱发的肌张力不全（PED）。CT和（或）MRI、角膜K－F环及EMG无特殊，3例PKC患儿EEG有痫样放电。PKC对抗癫痫药反应良好，PDC无有效治疗。结论：阵发性运动障碍包含了一组少见的反复发作的运动异常性疾病，可以分为PKC、PDC、PED、阵发性睡眠诱发运动障碍（PHD）和其他。PKC由突发运动所诱发，发作频繁，持续时间短暂，抗癫痫药治疗效果显著，其发病机理可能与癫痫有关。PDC与运动无关，持续时间长短不一，尚无有效的治疗方法。     

旋转手法配合消骨膏药治疗颈椎病

颈椎病是引起头痛、头晕、失眠、手指麻木、上臂疼痛 ,颈部僵硬的常见病。发病年龄多在 40岁以上 ,给人们的生活及学习带来诸多不便。我院近2年收治的 398例颈椎病 ,经旋转手法配合外贴膏药治疗 ,均取得了良好的疗效。1　临床资料1 .1　一般资料　本组 398例中 ,男性 2 2 2例 ,女性 1 76例。年龄最小 36岁 ,最大 71岁 ,平均 47.6岁。病程最短为 2 1天 ,最长为 6.5年 ,平均 1 .9年。有颈部外伤史 2 1例 ,有落枕病史 78例 ,有长期从事低头及脑力工作者 1 65例 ,其他 1 34例。1 .2　症状和分型　颈椎病患者常有颈、肩、背痛 ,手指麻木、眩晕、…     

多羧酶缺乏患儿的临床与生化特点研究

目的了解多羧酶缺乏患儿的临床与生化特点及治疗情况。方法对5例多羧酶缺乏患儿进行临床观察，血生化、影像学和视听诱发电位检查及治疗反应的随访。结果1例为婴儿型多羧酶缺乏，表现为反复发作呼吸困难，嗜睡、昏迷，严重尿布疹。伴严重酸中毒，乳酸、血氨增高。4例为晚发型，其中脊髓受累2例，阵发性肌张力不全1例，惊厥和智力、运动倒退1例。部分患儿伴视力异常，智力、运动发育落后，皮疹、秃发和轻度酸中毒和乳酸升高。MRI示脊髓、脑白质、丘脑和桥脑均受累。视听诱发电位有传导延迟。治疗后表现均迅速改善或消失。结论多羧酶缺乏患儿临床多样，伴不同程度酸中毒、乳酸血症，经生物素治疗效果显著。