糖皮质激素受体通过细胞外信号调节激酶途径参与吗啡耐受机制

目的 探讨糖皮质激素受体参与吗啡耐受形成的机制及细胞外信号调节激酶(ERK)信号途径在其中的作用.方法 将40只健康雄性SD大鼠行鞘内置管后随机分为4组(n=10),盐水对照组(C组)鞘内注射生理盐水lOμl;慢性吗啡耐受组(M组)鞘内注射吗啡10μg;糖皮质激素受体拮抗剂组(MR组)鞘内注射吗啡10μg,再注射糖皮质激素受体拮抗剂RU38486 2μg;糖皮质激素受体激动剂组(MD组)鞘内注射吗啡10μg,再注射糖皮质激素受体激动剂地塞米松4μg,鞘内注射每种药物均为2次/d,连续7 d.采用甩尾实验评价大鼠热痛觉,于给药后第8天取出腰膨大处脊髓分别进行Western印迹检测μ阿片受体(MOR)、糖皮质激素受体(GR)、磷酸化ERK(pERK)蛋白表达及TUNEL染色.结果 地塞米松和RU38486分别对吗啡耐受诱导的热痛敏具有促进和抑制作用.与M组(凋亡细胞数5.4±1.1,蛋白表达MOR 37±5,GR 20±6,pERK1 39±4,pERK2 41±5)比较,MR组凋亡细胞数(3.2±0.4)显著少(P<0.01);MD组(16.0±1.6)显著多(P<0.01);MR组MOR(28±5)、GR(12±6)、pERK1(33±4)、pERK2(34±5)蛋白表达均下调(均P<0.01);MD组MOR(55±6)、GR(28±9)、pERKl(49±6)、pERK2(59±5)蛋白表达均上调(均P<0.01).结论 糖皮质激素受体的活性可影响吗啡诱导的脊髓神经凋亡及吗啡耐受中脊髓pERK的表达.

Abstract：

Objective To investigate the mechanism of glucocorticoid receptors(GR)participating in morphine tolerance development via the extracellular signal-regulated kinase(ERK)signal pathway.Methods Forty healthy male SD rats were implanted with intrathecal catheters and then randomized into 4 groups:Group C received an intrathecal injection of 10 μl saline,Group M 10μg morphine,Group MR 10μg morphine followed by 2μg GR antagonist RU38486 and Group MD 10μg morphine followed by 4μg GR agonist dexamethasone(DEX)respectively.Each intrathecal drug was administered twice daily for 7 days.Tail-flick test was employed to evaluate the thermal hyperalgesia.After tail-flick test at Day 8,the lumbar intumescentias were isolated by Western blot to examine the protein expressions of Mu opioid receptor(MOR).GR and pERK.And terminal deoxynucleotidyl transferase mediated X-dUTP nick end labeling(TUNEL)stain was performed.Results DEX and RU38486 enhanced and inhibited morphine induced hyperalgesia to heat respectively.Compared with Group M(count of spinal dorsal horn apoptotic cells 5.4±1.1,protein expression:MOR 37±5,GR 20±6,pERK1 39±4,pERK2 41±5),apoptotic cells decreased in Group MR(3.2±0.4)(P<0.01)and increased in Group MD (16.0±1.6)(P<0.01);the protein expressions of MOR(28±5),GR(12±6),pERK1(33±4)and pERK2(34±5)were down-regulated in Group MR(P<0.01)while up-regulated in Group MD(55±6,28±9,49±6,59±5)(P<0.01).Conclusion The activity of glucocorticoid receptors affects the morphine-induced spinal neural apoptosis and the expression of spinal pERK in morphine tolerance.     

舒芬太尼联合氟比洛芬酯自控静脉镇痛对胆囊切除术后患者T细胞亚群的影响

目的:研究不同剂量舒芬太尼和氟比洛芬酯对胆囊切除术患者术后自控静脉镇痛(PCIA)效果及T细胞亚群的影响。方法:选择45例择期开腹胆囊切除术患者,随机分成3组,每组15例。Ⅰ组为舒芬太尼2mg/L进行镇痛;Ⅱ组为氟比洛芬酯1g/L+舒芬太尼0.75mg/L镇痛;Ⅲ组为氟比洛芬酯1g/L+舒芬太尼0.50mg/L镇痛。分别在术后4、24、48h观察镇痛效果及镇痛评分(VAS法);在麻醉前,术后1、24、72h抽取静脉血,用流式细胞仪测定T细胞亚群CD3+、CD4+和CD8+的水平。结果:Ⅲ组镇痛VAS评分明显高于Ⅰ、Ⅱ组(P<0.05);3组患者术后1、24h与麻醉前相比体内CD3+、CD4+细胞数量及Ⅰ组CD4+/CD8+比值均下降(P<0.05),术后72h,Ⅱ组和Ⅲ组CD3+、CD4+细胞数量均恢复至术前水平,Ⅰ组仍低于术前水平。结论:采用氟比洛芬酯1g/L+舒芬太尼0.75mg/L术后静脉镇痛效果较好,引起的免疫抑制程度相对较轻。     

mTOR-自噬通路对脓毒症小鼠海马小胶质细胞表型的影响

目的 探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）-自噬通路对脓毒症小鼠海马小胶质细胞表型的影响。方法 54 只雄性 ICR 小鼠,按照随机数字表法分为 3 组（n=18）：假手术组（Sham 组）、脓毒症组（CLP 组）和脓毒症+mTOR抑制剂雷帕霉素组（CLP+Ra组）。Sham组只进行开腹手术操作;CLP组采用盲肠结扎穿孔术制备脓毒症小鼠模型;CLP+Ra 组于造模前 6 h腹腔注射雷帕霉素（1.5 mg/kg）。于造模后 24 h各组取 6只,采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测海马组织肿瘤坏死因子（TNF）-α、白细胞介素（IL）-1β、IL-10和转化生长因子（TGF）-β水平;采用免疫荧光染色法检测海马组织切片离子钙接头蛋白分子（Iba）-1/CD86和 Iba-1/CD206阳性细胞数量;采用蛋白免疫印迹法测定海马组织 mTOR磷酸化（p-mTOR）水平、自噬相关蛋白微管相关蛋白 1轻链 3Ⅱ（LC3Ⅱ）和 Beclin-1表达情况。结果 与 Sham组比较,CLP组 TNF-α、IL-1β、IL-10和 TGF-β水平升高,Iba-1/CD86和 Iba-1/CD206阳性细胞数量增加,p-mTOR水平上调,LC3Ⅱ和 Beclin-1表达下调（均 P＜0.05）。与 CLP组比较,CLP+Ra组 TNF-α和 IL-1β水平降低,IL-10和 TGF-β水平升高,Iba-1/CD86阳性细胞数量减少,Iba-1/CD206阳性细胞数量增加,p-mTOR水平下调,LC3Ⅱ和 Beclin-1表达上调（均 P＜0.05）。结论 mTOR-自噬通路通过调节小胶质细胞表型转化,影响脓毒症小鼠海马炎症反应。     

ATP敏感性钾通道在心肌缺血/再灌注损伤中的作用

心肌缺血/再灌注损伤是缺血性心脏病以及心脏手术后心功能不全的主要病理基础。寻找有效的心肌保护措施减轻心肌缺血/再灌注损伤具有重要意义。各种心肌保护措施,如心脏停搏液、缺血预处理和缺血后处理等成为人们研究的热点。ATP敏感性钾通道在缺血/再灌注心肌损伤的心肌保护策略中发挥了重要作用,是心肌保护的重要作用机制。     

改良序贯法测定蛛网膜下腔注射舒芬太尼用于分娩镇痛中的半数有效剂量

目的:采用改良序贯法测定蛛网膜下腔单纯注射舒芬太尼用于分娩镇痛中的半数有效剂量（ED50）。方法:选择足月妊娠、单胎、头位且自愿接受分娩镇痛的初产妇30例,美国麻醉医师协会（ASA）分级I～Ⅱ级,于腰-硬联合神经阻滞下接受分娩镇痛。根据改良序贯法增减给药,第1例产妇蛛网膜下腔单纯注射舒芬太尼5.0 μg,相邻剂量梯度为0.5 μg,若上1例产妇镇痛效果满意,则下1例产妇剂量减少0.5 μg;若上1例产妇镇痛效果不满意,则下1例产妇剂量增加0.5 μg。序贯给药后采用视觉模拟评分法（VAS）评估镇痛效果,VAS≤3分为镇痛有效。采用Dixon and Massey序贯分配试验法公式计算舒芬太尼蛛网膜下腔注射用于分娩镇痛中的ED50和95%可信区间。结果:蛛网膜下腔单纯注射舒芬太尼用于分娩镇痛中的ED50为2.85 μg,95%可信区间为2.31～3.43 μg。结论:采用改良序贯法测得的蛛网膜下腔单纯注射舒芬太尼用于分娩镇痛中的ED50为2.85 μg,且此法简便、高效、准确性高。     

不同麻醉深度对舌下微循环的影响

目的观察不同麻醉深度对舌下微循环的影响。方法20 例行甲状腺手术且ASA 分级Ⅰ~Ⅱ级患者。静脉注射咪达唑仑0.05 mg·kg-1、舒芬太尼0.3 μg·kg-1、罗库溴铵0.6 mg·kg-1,持续静脉靶控输注丙泊酚3.0 mg·L-1 进行麻醉诱导和麻醉维持,气管插管后行机械通气。目标靶浓度每隔4 min 增加0.5 mg·L-1 进行BIS 值调节。分别在 T1[脑电双频指数（BIS）基础值]、T2（50 0.05）;T3 时PVD、 TVD、PPV 和MFI 均下降（P < 0.05）;T4 时PVD、TVD、PPV 和MFI 下降明显（P < 0.01）;T2 和T3 相比,PVD、TVD、 PPV 和MFI 差异无统计学意义（P > 0.05）。结论将BIS 值控制在≤40~50 范围,能在较好地抑制手术引起的应激反应的同时,对微循环影响较小,且能保持血流动力学的相对稳定。     

急性血小板分离或自体血回输对体外循环冠状动脉旁路移植术患者血液保护的影响

?目的:比较急性血小板（Plt）分离与自体血回输对体外循环（CPB）冠状动脉旁路移植术（CABG）患者的血液保护效果。 方法:择期拟在CPB下CABG 患者60例,ASA分级Ⅱ级或Ⅲ级,年龄40～65岁,体质量70～103 kg。采用随机数字表法,将患者随机分为3组（n=20）:对照组（C组）、自体血回输组（Z组）和急性Plt分离组(APP组)。APP组在麻醉诱导后行APP,提取富Plt血浆,于CPB结束鱼精蛋白中和肝素后10 min回输,Z组在麻醉诱导后行自体血放血入枸橼酸保存液血袋,回输同APP组,C组不作处理。于麻醉诱导后5 min（T₁）、鱼精蛋白中和肝素后10 min（T₂）和术后即刻（T₃）,采集中心静脉血样,检测血常规和Sonoclot凝血及血小板功能,记录Hb、Plt、凝血速率（CR）及血小板功能（PF）。记录CPB时间、主动脉阻断时间、关胸时间、术后引流量和输血情况。结果:与C组比较,Z组和APP组T₃时Plt、CR升高,APP组T₃时PF升高,Z组和APP组术后24 h引流量减少,异体血浆输注量和红细胞输注量减少,异体红细胞输注率和异体血浆输注率降低（P<0.05或<0.01）。与Z组比较,APP组T₃时PF升高（P<0.05）。 结论:急性Plt分离或自体血回输对体外循环冠状动脉旁路移植术患者具有相似的血液保护作用, 但是前者可以增强血小板功能。