构建Cx43特异性shRNA真核表达载体及体外干扰效率的鉴定

目的 本研究前期研究结果表明Cx43与穴位、经脉之间存在着密切联系,为了进一步研究Cx43在针刺活动中的作用,我们应用RNA干扰技术首先构建针对Cx43基因的特异性shRNA(small hairpin RNA)真核表达载体,并转染体外培养的NIH/3T3细胞,观察其对Cx43基因的沉默效果,从而挑选出一条能有效沉默Cx43表达的shRNA,为进一步在体研究作准备.方法 针对大、小鼠Cx43 mRNA同源序列的两个靶点,体外合成两对互补的寡核苷酸链.经退火连接形成双链,插入到Pgenesil-1真核表达载体.经酶切鉴定及测序等步骤后,将构建好的表达载体[分别命名为P-Cx43-shRNA(1)、P-Cx43-shRNA(2)]分别转染NIH/3T3细胞,G418筛选后应用免疫荧光、Western blot等方法观察P-Cx43-shRNA对Cx43蛋白水平的影响.结果 酶切鉴定及测序结果表明,成功构建了两个针对Cx43基因的shRNA真核表达载体及对照质粒(P-con-shRNA);Western blot结果说明两个Cx43特异性shRNA真核表达载体分别使Cx43蛋白水平下降了73.5%(P＜0.01)和10.8%(P＞0.05).阴性对照质粒(P-con-shRNA)对NIH/3T3细胞Cx43蛋白水平无明显影响.结论 重组质粒P-Cx43-shRNA(1)能较好的特异性抑制Cx43基因在NIH/3T3细胞中的表达,为进一步在体研究提供了实验依据.     

我院科研工作现状与对策

通过研究我院科研工作的现状(人员情况、获资助项目情况、成果获奖情况),分析本院存在的突出问题:①高学历医学研究人员缺乏,人才梯队建设不佳;②科室领导及医务工作者对科研工作的重要性认识不够;③科研管理经验不足,工作不到位。提出7条改进措施:①强化科研奖惩制度,激发科研热情;②加强科研人员培训、拓宽科研渠道;③大力引进人才,提升整体水平,建立人员档案,加强人员管理;④强化项目管理,保证项目按时完成;⑤加强与外单位的联系拓宽项目申报渠道;⑥构建科研平台,加强院内各专业间的合作和协作,促进科研团队的形成;⑦强化科教考核制度,为提升医院科研实力,建立符合自身实际的科研管理规范做探索。     

从抗炎角度探讨针刺治疗多囊卵巢综合征机制

多囊卵巢综合征(polycystic ovarian syndrome, PCOS)是常见的生殖内分泌及代谢紊乱疾病,全球育龄期妇女发病率为 5％～20％[1].PCOS 以高雄激素血症(hyperandrogenism,HA)、排卵障碍和卵巢多囊化改变为典型特征,常伴发胰岛素抵抗(insulin resist-anc...     

针刺对促排卵治疗的多囊卵巢综合征大鼠子宫内膜容受性的影响

目的：观察针刺对促排卵治疗的多囊卵巢综合征（PCOS）大鼠子宫内膜容受性的影响，探讨其作用机制。方法：皮下脱氢表雄酮（DHEA）的麻油溶液制作多囊卵巢综合征（PCOS）大鼠模型，对照组（Con）同期皮下注射麻油。PCOS大鼠随机分为模型组（M）、克罗米芬组（C）、克罗米芬＋针刺组（C＋A），其中M组不做任何处理，其他各组均于80日龄起进行干预5天。治疗结束后，各组部分大鼠断头处死，留取血清、子宫和子宫内膜标本。各组另部分大鼠与雄鼠交配，于妊娠第8天处死，观察大鼠胚泡着床情况。结果：与C组相比，C＋A组大鼠血清E2水平较高，子宫内膜发育更好，子宫内膜容受性的标志分子蛋白及mRNA表达水平也更接近对照组（P〈0．01），着床率和平均着床胚泡数也显著增加（P〈0．01）。结论：针刺能显著改善克罗米芬促排卵治疗导致的子宫内膜容受性不良状态，促进胚泡着床，可能通过调节血清E2水平、子宫内膜容受性的标志分子蛋白及mRNA表达而实现。     

补肾、活血法则治疗不孕症的文献回顾

祖国医学对不孕症的研究有着悠久的历史,在长期的医疗实践中积累了极其宝贵的经验,为中华民族的繁衍昌盛作出了巨大贡献.关于不孕不育的病因病机历代医家百家争鸣,开拓了妇人不孕不育的诊断和治疗思路,目前概括起来主要有肾虚、肝气郁结、瘀滞胞宫、痰湿内阻.     

复方5-Fu治疗外阴白色病变66例临床分析

外阴白色癌变系指一沮女明皮肤，粘膜营养障碍而致的组织变性及色素改变的疾病。既往被称为外阴白斑，现根据国际外阴疾病研究机构(ISSVD)的意见，统称为“慢性外阴营养不良”，我们从1987年开始运用复方5-FU注射作治疗本病66例，同时观察其局部的临床改变，证明其近期疗效显著，现报告如下。     

EFFECT OF ACUPUNCTURE STIMULATION AT SANYINJIAO （SP 6） ON CEREBRAL GLUCOSE METABOLISM IN DYSMENORRHEA PATIENTS

ABSTRACTObjective:TostudythecentralmechanismofacupuncturestimulationofSanyinjiao(三阴交SP6)inrelievingdysmenorrhea.Methods:Atotalof6dysmenorrheavolunteerpatientsweresubjectedintothis study.Onthefirstpositronemissiontomography(PET)scanexamination,theywerea…     

Influence of Acupuncture on Idiopathic Male Infertility in Assisted Reproductive Technology

From Oct. 1 999to Aug. 2 0 0 0 ,2 2 cases ofidiopathic male infertility treated by acupuncturehad been observed before and after intracyto-plasmic sperm injection ( ICSI) . The purpose ofthis study was to investigate the changes in semenmarkers,fertilization rate and embryo quality be-fore and after acupuncture.1　 MATERIAL AND METHODS1 .1　 Clinical DataFrom Oct. 1 999to Aug. 2 0 0 0 ,2 2 cases ofidiopathic male infertility at Reproductive MedicalCenter in Ulm,Germany were treate…     

雷公藤甲素对CIA大鼠γδT细胞胞内细胞因子表达的影响

目的观察雷公藤甲素对II型胶原诱导的关节炎(CIA)大鼠外周血γδT细胞表达细胞因子TNF-α和IL-10的影响,探讨γδT细胞在CIA中的作用机制和雷公藤甲素对γδT细胞的免疫调节作用.方法 Wistar大鼠背部及尾根部多点皮内注射牛Ⅱ型胶原诱导CIA动物模型,大鼠经雷公藤甲素治疗后,取外周血分离淋巴细胞,用流式细胞仪,通过直接荧光标记的抗TNF-α和抗IL-10抗体来检测单个细胞水平γδT细胞胞内细胞因子的表达.结果 CIA模型大鼠外周血中γδT细胞与正常大鼠相比较,所占淋巴细胞的百分比显著下降(6.96±0.74) %,γδT细胞胞内 TNF-α(2.22±0.36)%和IL-10(1.00±0.20)%的表达均明显降低(P<0.01).通过雷公藤甲素治疗后,γδT细胞的数量和TNF-α与IL-10的表达均恢复至正常水平.结论雷公藤甲素可调节CIA大鼠外周血γδT细胞的数量和TNF-α及IL-10表达水平,而达到治疗类风湿性关节炎的目的.