人p27^kip1基因的克隆及其真核表达载体的构建

目的克隆人p27^kip1基因并构建其真核表达载体，为进一步研究其功能奠定基础。方法根据p27^kip1已知序列设计引物，分别在上下游引入Mlu I和Spe I酶切位点，从人肾脏组织中提取总RNA，经逆转录PCR得到cDNA，亚克隆入携带GFP报告基因的pWPXL真核载体中，经筛选获得正确的克隆，并通过双酶切凝胶电泳及测序鉴定。将成功构建的质粒在脂质体介导下转染肾癌786．0细胞，并通过RT—PCR及Western-blot检测表达情况。结果克隆了人p27^kip1基因，与GenBank中序列比对无误；真核表达载体经酶切鉴定表明为正确重组子，成功构建了真核表达载体。转染肾癌786-0细胞48h后，p27^kip1蛋白出现高表达。结论成功克隆了p27即基因，构建了其真核表达载体并在肾癌细胞中成功表达，为p27^kip1在肾肿瘤中的进一步研究提供了工作基础。     

促肾上腺皮质激素非依赖性库欣综合征患者肾周及皮下脂肪组织的炎症及纤维化

目的 探讨促肾上腺皮质激素(ACTH)非依赖性库欣综合征患者不同部位脂肪组织炎症及纤维化程度.方法 收集行后腹腔镜下肾上腺肿物切除术的ACTH非依赖性库欣综合征患者的肾脏周围及皮下脂肪组织,RT-PCR检测白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、金属蛋白酶类组织抑制剂1(TIMP1)、早期生长反应因子1(EGR1)及脂肪因子CCAAT增强子结合蛋白β(CEBPβ)、解耦联蛋白-1(UCP-1)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α(PGC1α)及细胞死亡介导的DNA碎片因子样受体a(CIDEA)mRNA的表达.结果 ACTH非依赖性库欣综合征患者肾周脂肪组织中CIDEA mRNA的表达显著高于皮下脂肪组织(P<0.05).而脂肪因子CEBPβ、UCP-1及PGC1αmRNA的表达在肾脏周围脂肪及皮下脂肪组织中差异无统计学意义.皮下脂肪组织IL-6、TIMP1及EGR1 mRNA的表达显著高于肾脏周围脂肪组织(P<0.05).肾周脂肪组织及皮下脂肪中TNF-α及MMP-2 mRNA的表达相似.结论 库欣综合征患者的皮下脂肪组织中的炎症及纤维化程度高于肾脏周围脂肪.提示不同部位脂肪组织具有不同的生物学特性,长时间较高水平的皮质醇刺激可能导致皮下脂肪炎症.     

荧光差异双向凝胶电泳筛选肾透明细胞癌及癌旁组织中的差异表达蛋白

目的 寻找肾癌相关肿瘤标记物,用于肾癌临床诊断、药物治疗靶点的选择及预后监测.方法 采用荧光差异双向凝胶电泳技术筛选15例肾透明细胞癌及癌旁正常肾组织差异表达蛋白质点.统计学采用t检验进行定量比较,以两组蛋白含量比值在1.5倍及以上,P<0.05,被认为是差异表达蛋白质点.用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱或串联质谱技术进行差异表达蛋白质点鉴定.结果 共筛选分离出27个差异表达蛋白质点,经质谱技术共成功鉴定了26种蛋白质,11种蛋白质在肾癌组织中上调,15种蛋白质下调.其功能覆盖细胞活动的多个方面,其中线粒体短/支链特异性酰基辅酶A脱氢酶、醛糖1-表异构酶、PRDX4、CAPG、β-防御素107、微纤丝相关糖蛋白4等6种蛋白是我们首次采用蛋白质组学技术成功筛选的肾癌差异表达蛋白质,并发现了1个预测蛋白(UCRIL).结论 荧光差异双向凝胶电泳在肾癌组织中获得较好的筛选效果,新筛选的差异表达蛋白有望成为肾癌分子生物学标记物,为后续研究提供了实验依据.     

坦索罗辛对BPH患者夜尿影响的观察（附36例报告）

目的：评价坦索罗辛对BPH患者夜尿的影响程度。方法：007年10月～2008年12月对36例BPH患者采用超选择性α1A受体阻滞剂坦索罗辛进行治疗。并着重观察其对夜尿的影响。结果：经8周的治疗，患者IPSS评分、QOL评分及夜尿次数均出现减少，与治疗前比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）；而夜间多尿系数的变化差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：对于夜间膀胱容量减低型或混合型夜尿，坦索罗辛具有良好的治疗效果，可有效改善BPH患者的夜尿症状。     

膀胱癌膀胱全切术后继发性阴茎癌1例

膀胱癌术后发生阴茎转移者少见,我院收治1例,报告如下.     

肾外伤的影像学检查选择(附74例报告)

目的探讨肾外伤的影像学诊断方法的选择和临床意义。方法回顾我院74例肾外伤的影像学检查方法,评价静脉尿路造影、B超、CT对肾外伤的诊断价值。结果静脉尿路造影、B超、CT诊断阳性率分别为89%(43/49)、80%(55/68)和100%(51/51)。结论静脉尿路造影方法快捷,B超无创且廉价,CT检查准确。     

口腔患儿心理护理探讨

随着医学模式的改变,社会心理因素对人体的健康和疾病所产生的作用,越来越被人们重视。心理护理是通过护士与患儿的交往来帮助患儿获得最佳身心状态的一项技术措施,是一个互动的过程。也就是给患儿以心灵上的护理,它是现代医学模式的重要组成部分,也是影响治疗的重要条件。心理护理从护士与患儿接触的一瞬间就已开始,每一项护理操作都渗透着心理护理的内容,随时随地的给患儿心理上产生影响。在儿童口腔疾病治疗中,医护人员不仅要有医学知识,而且要懂得心身医学和心理学,通过各种方法解除患儿忧虑自愿接受治疗。心理护理是由表及里的复杂过程,它要通过分析、综合、推理、判断等思维过程,而这些过程的难度较之躯体护理要大得多,因此心理护理更具有深刻的意义。近年来,儿童口腔疾病的发生状况已引起人们极大的关注。我国乳牙龋齿的发生率均在52 %以上。1临床资料临床检查时,患儿的合作与否对整个治疗时间、医生的操作都有很大影响。从2002年到2003年我们通过对102例3岁～14岁患儿进行调查,其中包括龋齿、急、慢性牙髓炎、根尖周炎及乳牙滞留等。其中幼儿期51名(3～7岁) ,童年期20名(8～12岁) ,少年期31名(13～15岁)。2调查结果口腔是痛觉极为...     

案例中心教学法在泌尿外科教学中的探索与实践

为了克服传统教学法中学生自主学习意识差、对知识的综合运用能力不足的缺点,案例中心教学法被应用于泌尿外科教学.教学结果显示这一教学方法对于提高学生的自主学习能力及综合素质具有积极的作用,但在现有的教学规划及考核体系下,其优势仍难以得到最为充分的发扬.     

膜细胞骨架蛋白-ezrin差异表达与肾癌转移、侵袭的关系

目的:探讨细胞骨架连接埃兹蛋白(Ezrin)在肾细胞癌中的表达及与肿瘤转移、侵袭的关系.方法:收集50例肾癌组织及40例相应癌旁正常肾组织,按肾癌组织(有无淋巴结转移,有无腔静脉瘤栓形成),癌旁正常肾组织,伴有淋巴结转移的肾癌组织,伴有腔静脉瘤栓形成的肾癌组织分组.采用RT-PCR,Western Blot,免疫组化检测ezrin的表达.结果:RT-PCR,Western Blot结果显示,在肾癌组织及癌旁正常肾组织中均可检测到ezrin mRNA及蛋白,且肾癌组织表达水平显著高于癌旁正常肾组织.免疫组化检测ezrin蛋白阳性表达率在肾癌组织中为96%(48/50),癌旁正常肾组织组为75%(30/40)(X2=10.350,P=0.002);ezrin mRNA表达阳性率肾癌组为82%(41/50),癌旁正常肾组织组为62.5%(25/40)(X2=4.321,P=0.038),肾痛组均显著高于癌旁正常肾组织组.免疫组化评分及ezrin mRNA阳性表达率,淋巴结转移组显著高于无淋巴结转移组[(9.500±2.502)vs(7.232±3.045),13/14 vs 16/36,P<0.05];腔静脉瘤栓形成组显著高于无腔静脉瘤栓形成组[(9.315±3.027)vs(7.563±2.991),14/14 vs 22/36,P<0.05].肾癌组织中ezrin蛋白,ezrin mBNA表达水平与患者的性别、年龄、肿瘤分期、分级、肿瘤大小及肿瘤病理类型无关(P>0.05).结论:ezrin在肾癌组织中表达及其强度与肾痛淋巴结转移及腔静脉瘤栓形成有关,ezrin可能参与了肾癌的发生、侵袭和转移,测定肾癌组织中ezrin mRNA及蛋白有助于进一步评估肾细胞癌的预后和制定合理的治疗方案.     

尿钾浓度测定在氯胺酮相关性膀胱炎中的临床价值

目的 探讨24 h尿液钾离子浓度测定在治疗氯胺酮相关性膀胱炎过程中的应用方法和价值. 方法 氯胺酮相关性膀胱炎患者43例.男29例,女14例,年龄17 ～ 29岁,平均22岁.患者按入院治疗期间是否留置尿管分为A组(非留置组,32例)和B组(留置组,入院后即留置尿管,11例),两组均以抗炎、抗氧化、改善微循环、解痉镇痛及修复膀胱黏膜屏障为基础治疗方案.对照组为健康志愿者30名.各组均于治疗前后检测24 h尿钾、尿钠和尿肌酐浓度.24 h尿钾、尿钠浓度均以24 h尿肌酐浓度作为内参,标准化后进行比较.A、B组于治疗前后行盆腔疼痛与尿急/尿频(PUF)评分.分析治疗前后组间、组内尿钾浓度的变化并分析与PUF评分的关系. 结果 各组治疗前后24 h尿肌酐、尿钠浓度差异无统计学意义(P＞0.05).尿钾浓度:①治疗前:A、B组及对照组分别为(1.80±0.67)、(6.22 ±0.92)、(6.47±0.97)mmol K/mmol Cr,A组与B组、对照组比较差异均有统计学意义(P =0.0001).②治疗后:3组分别为(6.23±1.42)、(6.02±0.98)、(6.47 ±0.97)mmol K/mmol Cr,A组与B组、对照组比较差异均无统计学意义(P＞0.05).PUF评分:①治疗前A组23.19 ±3.64,B组21.95±3.86,差异无统计学意义(t=1.302,P=0.200);A组PUF评分与尿钾浓度呈负相关(r=-0.637,P=0.0001),B组与PUF评分无显著相关性(r=0.581,P=0.188);②治疗后A组18.31 ±2.19,B组17.18±2.68,差异无统计学意义(t=-0.331,P=0.742);A、B组PUF评分与尿钾浓度均呈负相关(A组:r=-0.427,P=0.015;B组:r=-0.779,P=0.005).43例患者治疗前PUF评分22.77±3.63,治疗后18.12±2.83,治疗前后比较差异有统计学意义(t=6.347,P=0.0001). 结论 尿钾浓度测定能较好评估氯胺酮相关性膀胱炎患者的病情及判断治疗效果.