中西药合用对帕金森病大鼠神经细胞凋亡的影响

目的：观察滋补肝肾、通络解毒中药与美多巴台用对帕金森病大鼠神经细胞凋亡的影响。 方法：实验于2003一03／200406在上海中医药大学科研实验中心完成。①选用雄性Wistar大鼠58只。7-8周龄。将其中40只大鼠用于制备帕金森病模型（以6-羟基多巴胺注射于大鼠脑右侧黑质，10d后腹腔注射阿朴吗啡0．5ms／kg诱发大鼠向一侧旋转，以开始旋转至30min内旋转圈数平均每分钟超过7次者为合格帕金森病模型），造模成功18只，随机分为2组：模型组、中西药治疗组，每组9只；另纳入9其正常大鼠为正常对照组（只固定大鼠，不进行任何处理），9只大鼠注射含0．2g／L抗坏血酸的等量生理盐水（其余条件与造模手术相同大鼠）为假手术组。②然后，正常对照组、假手术组、模型组：灌胃生理盐水2mL。中西药治疗组：灌胃中西药混悬液2mL[滋补肝肾、通络解毒巾药：汤药内含熟地、桑寄生、拘杞予、天麻、钩藤、僵蚕、丹参、莪术、白芍、生南星，按既定工艺煎煮成汤药，每毫升含原药材2．961g，由上海中医药大学附属龙华医院制剂室制备；蝎蜈胶囊内音全蝎、蜈蚣，0．3S／粒．由上海中医药大学附属龙华医院提供，批号；010813。按比例将胶囊混匀于汤药中，使浓度为3．006S／mL；含美多巴（上海罗氏制药公司产品，批号：052000，250mg／片）135mg／kg），1次／d，共45d。③实验结束后，每组取6只大鼠，处死，取出中脑组织，甲醛固定，梯度脱水，常规白蜡包埋，冠状切片，每块脑组织5张切片；每组取3只大鼠进行心脏灌注同定，后分离中脑黑质，制作电镜标本。用原位末端标记法染色和透射电镜（&;#215;9000）的方法观察中西药合用对神经细胞凋亡的影响。④组间比较采用方差分析。 结果：造模失败22只，由于造模失败脱失22只，进入结果分析36只。每组9只。①模型组标本中均能检测到原位末端标记法染色阳性细胞核，细胞核呈棕褐色。但主要集中在损毁侧黑质区内，细胞核体积缩小。或明显皱缩，形态呈圆形或不规整。模型组神经细胞凋亡数明显多于正常对照组、假手术组和中西药治疗组[（37．83&;#177;6．46），（1．67&;#177;1．9），（1．83&;#177;1．92），（1．28&;#177;4．75）个，P〈0.01]。中西药治疗组也能检测到凋亡细胞核，但与模型组比较，凋亡细胞数较少，单个散在分布。②电镜检查结果显示中西药合用组神经细胞病理变化明显比模型组轻，细胞膜稍有皱缩，细胞体积略缩小，线粒体等细胞器形态正常，细胞核稍呈皱缩状态，染色质有轻度凝聚成块并有边聚倾向，核膜基本完整。 结论：中西药合用对帕金森病犬鼠神经元细胞凋亡有明显抑制作用。     

超声造影联合2019版Bosniak分级在肾脏囊性占位中的诊断效能

目的 探讨超声造影(contrast-enhanced ultrasound, CEUS)联合2019版Bosniak分级(B₂₀₁₉)在肾脏囊性占位(cystic renal mass, CRM)诊断中的应用价值。方法 分析2011年10月至2021年10月复旦大学附属中山医院收治的经手术病理证实的99例CRM患者共99个病灶的病例资料，所有病灶均分别按照B₂₀₁₉、2005版Bosniak分级(B₂₀₀₅)进行评价。采用ROC曲线评价CEUS＋B₂₀₁₉和CEUS＋B₂₀₀₅对CRM的诊断效能。结果 CEUS＋B₂₀₁₉及CEUS＋B₂₀₀₅诊断CRM的曲线下面积(area under curve, AUC)分别为0.943、0.885，差异有统计学意义(P＜0.05)。CEUS＋B₂₀₁₉诊断CRM的特异度、准确度分别为97.80%、93.94%，明显高于CEUS＋B₂₀₀₅（84.40%、88.89%），灵敏度为90.70%，低于CEUS＋B₂₀₀₅（92.60%），差异均有统计学意义(均P＜0.05)。CEUS＋B₂₀₁₉、CEUS＋B₂₀₀₅诊断CRM的Kappa值分别为0.879、0.775。结论 在CRM的诊断中，CEUS＋B₂₀₁₉较CEUS＋B₂₀₀₅有更高的特异度、准确度，有助于避免良性CRM的误诊，减少不必要的随访及过度治疗。     

枸杞糖肽对缺氧乳鼠心肌细胞内游离钙浓度的影响

目的:研究低氧心肌细胞内游离钙(犤Ca2+犦i)浓度的变化,枸杞糖肽减轻缺氧诱导的心肌细胞钙超载以及对缺氧心肌的保护作用。方法:实验选用出生两三天的SD乳大鼠80只进行心肌细胞培养,建立心肌缺血模型,实验分3组:对照组;缺氧组:细胞缺氧6h;枸杞糖肽组:先加入终浓度为50mg/L的枸杞多糖,再行缺氧6h。以Fluo/AM荧光指示剂负载,通过激光扫描共聚焦显微系统和Flou-3/AM荧光指示剂标记技术,观察枸杞糖肽对缺氧心肌细胞游离钙含量的影响。结果:心肌细胞经缺氧处理6h后,细胞之间相互连接减少,大部分细胞肿胀,折光性减弱,部分细胞甚至呈圆形,少部分细胞胞膜破裂,提示心肌细胞损伤。枸杞糖肽处理组心肌细胞经缺氧后,可见部分细胞肿胀,内有颗粒,折光性减弱,但较缺氧模型组有一定的改善作用。心肌细胞Fluo-3/AM负载后在激光共聚焦显微镜下观察,细胞的分布和外形与倒置显微镜下所见相符,呈不规则棱形、多角形、星形细胞,轮廓清晰,成群的细胞出现自发性,同步性、有节律的搏动。经Flu3-AM标记后,细胞出现规律性闪烁。对照组心肌细胞犤Ca2+犦i荧光强度和吸光度(A值)较低,缺氧6h荧光强度明显增加(P<0.05);枸杞糖肽组心肌细胞犤Ca2+犦i荧光密度(62.86±28.71)低于缺氧组(156.76±55.39)(P<0.01)。结论:低氧导致心肌细胞钙超     

经食管超声心动图引导微创封堵缺乏边缘的房间隔缺损的应用价值

目的 评价经食管超声心动图(TEE)在微刨术中引导封堵缺乏边缘的房间隔缺损的应用价值.方法 经胸超声心动图检查诊断为房间隔缺损患者23例,拟行微创非体外循环下封堵治疗.术前行TEE检查,明确房间隔缺损的位置、类型、大小及边缘情况,用以确定选择合适的封堵器,术中TEE引导封堵器放置.评价即刻效果,术后1周内复查经胸超声心动图检查.结果 23例患者封堵成功,TEE显示20例无残余分流,3例少量残余分流;但术后1周经胸超声心动图随访,均见封堵器位置正常,无残余分流,且右房右室较术前缩小(P<0.05),肺动脉压力下降(P<0.05).结论 TEE在微创术中引导缺乏边缘的房间隔缺损封堵中起着主导作用.     

成骨细胞和破骨细胞衰老改变及其在增龄性骨丢失中的作用

背景：认识增龄过程中成骨细胞和破骨细胞变化规律，特别是高龄人群成骨细胞和破骨细胞的生物学特点，对骨质疏松有效合理的防治具有十分重要的意义。目的：回顾关于成骨细胞和破骨细胞数量和活性增龄变化的实验及临床研究结果，明确增龄过程中成骨细胞和破骨细胞的变化规律和衰老特点。数据来源：1995／2003 PubMed，2002／2004年万方数据库，本实验室研究结果。数据提取：PubMed 16篇，万方数据库1篇，本实验室数据。主要观察指标：细胞数量、酶活性、基因表达水平。结果：高龄人群成骨细胞骨形成作用和破骨细胞骨吸收作用对骨骼的影响都逐渐下降，但表现出不同的特点。①骨形成功能持续降低，主要表现为：成骨细胞分裂增生能力降低、基质合成减少、对钙调激素的敏感性降低。这些变化与骨髓中前体细胞的快速减少有关，使高龄人群骨骼中成骨细胞群由于缺乏新生细胞的不断补充而功能退化。②骨吸收功能短暂激活，主要表现为：破骨细胞数量一度增加，而其泌酸和蛋白酶功能基本得以保持。③成骨细胞调节能力降低，主要表现为成骨细胞中RANKL和OPG表达失偶联。结论：破骨细胞激活的机制和破骨细胞二次活跃产生不同骨平衡的意义值得探讨。作为建议，作提倡在基础领域重视骨髓微环境中前体细胞分化增殖的研究。     

血管内超声在自发性冠状动脉夹层诊断和治疗中的初步应用

目的初步探讨血管内超声（IVUS）在自发性冠状动脉夹层（spontaneous coronary artery dissection，SCAD）诊断和介入治疗中的应用价值。方法采用IVUS观察6例SCAD的显像特征，并指导3例SCAD的冠状动脉内支架植入治疗。结果6例患者IVUS均清晰显示内膜片结构，根据真假腔外侧壁的超声结构差异和假腔内血栓，6例患者均成功鉴别出真假腔。3例接受冠状动脉内支架植入治疗的患者，根据IVUS显像准确选择支架尺寸，指导支架在真腔内释放，并确定支架扩张充分和夹层完全闭合。结论应用IVUS有助于对SCAD进行精确的评估，准确地指导SCAD的冠状动脉内支架植入并评价其疗效。     

黄芪复方对实验性自身免疫性重症肌无力模型大鼠神经肌肉接头超微结构的影响

目的:复制实验性自身免疫性重症肌无力模型大鼠,观察中药黄芪复方干预后其神经肌肉接头超微结构的变化。方法:实验于2001-01/2004-12在辽宁中医药大学附属医院完成。①选取雌性Lewis大鼠24只,随机数字表法分为模型组、正常组、中药组、西药组,6只/组。②电鳐购于美国加州,捕捞后取出电器官空运,-60℃冻存。用冷磷酸盐缓冲液将电鳐的电器官制成匀浆,制备粗提物,亲和层析技术分离提纯乙酰胆碱受体用于大鼠免疫。③除正常组外,其余组均将含有30μg乙酰胆碱受体的弗氏完全佐剂200μL注射于鼠两后足垫皮内进行初次免疫,3周后行二次免疫,将含有20μg乙酰胆碱受体的弗氏完全佐剂200μL注射于鼠两前足垫皮内,建立实验性自身免疫性重症肌无力动物模型。④初次免疫后,观察各组大鼠肌无力症状(叫声低微与活动减少是判断实验性自身免疫性重症肌无力大鼠的首发症状),并根据Lennon标准进行评分(分为0～3分,分数越高代表症状越严重)。肌电图的改变亦是判断模型建立的重要指标,故采用肌电图检测重症肌无力衰减程度,以(第5个反应波幅-第1个反应波幅)/第1个反应波幅×100%表示。⑤成模后给予药物治疗。中药组灌胃给予自拟黄芪复方(黄芪、白术、枸杞、何首乌、枳壳、升麻)8.4g/(kg·d);西药组灌胃给予强的松片5.4mg/(kg·d);正常组及模型组均灌胃给予等体积生理盐水。各组给药1次/d,连续1个月。处死大鼠,电镜下观察神经肌肉接头超微结构的变化。结果:模型组2只、西药组1只大鼠因肌无力症状恶化于初次免疫后第3周死亡脱落,共21只大鼠进入结果分析。①肌无力症状Lennon标准检测结果:模型组、中药组、西药组大鼠于初次免疫后17d开始相继出现体质量下降、活动减少、叫声低微等肌无力症状,按Lennon分级评为1分;3只症状迅速恶化,呈濒死态,评为3分,随后1周内相继死亡,其余大鼠呈慢性发病。正常组大鼠均无肌无力症状表现。②重症肌无力肌电图检测结果:初次免疫后第4,8周,正常组大鼠腓肠肌电图波幅均无明显变化;而模型组、中药组、西药组大鼠肌电图波幅衰退程度均大于15%,证明造模成功。③给药1个月后各组大鼠神经肌肉接头超微结构电镜结果:正常组突触前、后膜结构完好;模型组突触间隙加大,神经肌肉接头褶排列紊乱,局部溶解消失,突触小泡数量减少;中药组出现新生轴突终末分支,内含丰富的突触小泡;西药组则无新生轴突,神经肌肉接头褶排列紊乱、溶解消失,突触前部线粒体及其他细胞器空泡化依然明显。结论:实验性自身免疫性重症肌无力动物模型经中药黄芪复方治疗后,可促进其神经肌肉接头新生轴突的产生,并增加突触小泡数量,从而减轻突触损伤。     

多普勒组织成像评价左室整体功能最佳部位的选择

目的应用DTI测量二尖瓣环6个节段的运动速度评价左室整体功能并探讨心尖窗最佳切面、二尖瓣环的最佳节段的选择.方法应用DTI测量33例冠心病患者和19例健康志愿者二尖瓣环后间隔、侧壁、下壁、前壁、前间隔和后壁处各位点的Sa、Ea、Aa及Ea/Aa之比.结果(1)冠心病组二尖瓣环6个节段Sa、Ea及Ea/Aa较正常组显著下降(P＜0.01).(2)冠心病组二尖瓣环6个节段平均Sa与左室射血分数呈高度正相关(r＝0.746,P＜0.001);平均Ea/Aa与二尖瓣血流频谱E/A之比也具有良好的相关性(r＝0.723,P＜0.001).(3)正常组和冠心病组心尖四腔切面的二尖瓣环侧壁缘Sa及Ea/Aa之比与6个节段平均参数的相关系数均为最大.结论测量二尖瓣环6个节段的平均运动速度可评价左室整体收缩和舒张功能,心尖四腔切面二尖瓣环侧壁缘是评价左室整体功能的最佳节段.     

实时三维超声心动图定量评价扩张型心肌病患者心室内收缩同步性的研究

目的探讨实时三维超声心动图评价扩张型心肌病(DCM)患者左室内收缩同步性的临床应用价值。方法对32例DCM患者和31例正常志愿者应用超声技术获取左心室的全容积图像。计算左室17节段达到收缩期最小容积点的时间(Tmsv),并计算出左室16节段、12节段及6个基底段达到Tmsv的标准差和最大时间差(即Tmsv16-SD,Tmsv16-Dif,Tmsv12-SD,Tmsv12-Dif,Tmsv6-SD和Tmsv6-Dif)。结果DCM组的各项收缩不同步指标均显著高于正常组(均P<0.01)。与DCM伴左室收缩功能轻度减退组相比,DCM伴左室收缩功能中重度减退组的Tmsv16-SD、Tmsv12-SD、Tmsv16-Dif等指标均显著增高(均P<0.01)。所有受检者的全容积三维法测量的左室射血分数与二维Simpson法的测值呈高度正相关关系(r=0.912,P<0.001)。结论实时三维超声心动图及其定量分析软件能在同一心动周期内比较左室各节段的同步性,并提供血流动力学方面的信息,为临床评价左室内不同步提供了简便、直观、无创性的新方法。