一株靶向CD90+MHCC97-L细胞单克隆抗体治疗肝癌的实验研究

目的:研究抗人肝癌干细胞单抗28C10体内外功能，为肝癌干细胞的靶向治疗提供有应用价值的候选治疗剂。方法:采用无血清成球实验、侵袭实验和CCK-8方法等检测分析28C10单抗对MHCC97-L sphere的细胞自我更新、侵袭和耐药的影响。裸鼠体内治疗实验研究单抗28C10联合顺铂对MHCC97-L移植瘤生长的作用。Western-Blot方法鉴定该单抗识别抗原的分子量。结果:流式细胞检测结果显示单抗28C10能够识别MHCC97-L中CD90阳性细胞的比例为2.75%。体外功能实验结果显示单抗28C10能显著抑制MHCC97-L sphere细胞的无血清成球能力和侵袭能力，抑制率分别达33.33%和53.8%。28C10能显著抑制MHCC97-L sphere的顺铂耐药能力，其IC50为0.74 μg/ml，而对照组的IC50为1.42 μg/ml。抗体体内治疗实验结果显示，低、高剂量抗体28C10均能抑制肝癌移植瘤的生长，抑制率分别达到了24.0%和67.7%，单独顺铂组肝癌移植瘤的抑制率为35.9%，而顺铂联合高剂量抗体28C10组对肝癌移植瘤的抑制率达到70.1%。Western-Blot结果显示单抗28C10识别的抗原蛋白分子量约100 kD。结论:筛选获得了1株抗肝癌干细胞的功能性单抗，为靶向肝癌干细胞治疗肝癌奠定了重要的基础。     

江苏某钢铁企业高强度钢品种技术改造项目卫生学评价

目的对江苏某钢铁企业精品中棒生产线投产试运行时的职业病危害控制效果进行评价。方法通过职业卫生现场调查、现场检测、职业健康检查等方法,分析各岗位接触职业病危害浓度(强度),评价职业病防护设施的合理性和符合性。结果该项目存在的主要职业病危害因素包括:粉尘、CO、NO_2、混合烃类、噪声、高温等,其中冷剪、红检、调整、轧钢岗位接触的噪声声级不符合国家职业卫生标准的要求,其他岗位接触的有害因素均符合要求。试生产期间未发现职业病或疑似职业病病例,但未对接触CO人员进行专项检查。职业病防护设施、职业卫生管理制度基本符合相关法律、法规的规定。结论该项目为职业病危害较重行业,噪声为关键控制因素。     

血栓弹力图在下肢静脉曲张患者围术期中的应用研究

目的探讨血栓弹力图(TEG)在下肢静脉曲张患者围术期高凝状态中的应用价值。方法选择80例下肢静脉曲张行大隐静脉剥脱联合透光旋切术患者,分别于术前24 h及术后1 d、3 d、7 d进行TEG监测[凝血反应时间(R值)、血凝块形成时间(K值)、凝固角(Angle角)、最大振幅(MA值)、凝血指数(CI值)],记录患者围术期各时段凝血功能的变化趋势,统计患者发生高凝状态情况。结果与术前24 h比较,患者术后1 d、3 d、7 d的R值、K值均明显降低(P均0.05);R值术后3～7 d有明显升高趋势,K值术后1～3 d呈明显降低趋势; Angle角、MA值和CI值术后均明显升高(P均0.05)。术后第3天处于高凝状态的患者共18例(22.5%),其中凝血因子型高凝5例(27.8%),血小板型高凝9例(50.0%),混合型高凝4例(22.2%),经及时给予针对性处理,未发生静脉血栓形成及出血等不良事件。结论 TEG是判断下肢静脉曲张患者围术期血液高凝状态的敏感指标之一,能科学、准确地监测出患者的高凝状态,并根据高凝类型进行预防性抗凝干预,对术后早期防治下肢深静脉血栓形成的发生具有重要指导意义,值得临床推广应用。     

单抗N糖分析系统适用性对照品的建立

目的建立单抗N糖分析方法的系统适用性对照品,并设定相应的系统适用性要求。方法利用液质联用(LC-MS)仪对N糖系统适用性对照品进行N糖型的表征鉴别,并对对照品进行稳定性评价。结合方法特点和验证数据,对系统适用性要求进行设定。结果建立的系统适用性对照品具有良好的稳定性,其糖型涵盖了单抗主要的N糖型种类。针对3种药典拟收录的单抗N糖分析方法,设定了以下系统适用性要求,包括:图谱与典型图谱相似、G1F(1,6)和G1F(1,3)的分离度应满足具体要求、G0F%应在规定的范围内、G0F保留时间的RSD应≤4%。结论建立了单抗N糖系统适用性对照品,可配合3种2020年版《中国药典》拟收录的N糖分析方法使用。     

慢性酒依赖患者的失匹配负波改变与其人格特征的关系

目的:探讨慢性酒依赖(CAD)患者失匹配负波(MMN)改变与其人格特征的关系。方法:采用改良的艾森克人格问卷(EPQ-R)对33例CAD患者(CAD组)和33名健康对照志愿者(对照组)进行评估,同时进行事件相关电位(ERP)检测,分析CAD患者MMN指标与其人格特征的关系。结果:CAD组EPQ-R中神经质(N)、精神质(P)和掩饰性(L)维度评分显著高于对照组(P<0.05或P<0.01);ERP各通道MMN潜伏期显著延长(P<0.05或P<0.01)。相关分析显示,CAD患者MMN指标与其人口学资料及人格特征无相关性。结论:CAD患者具有神经质、精神质的人格特征,其MMN潜伏期延长,但MMN改变与其人格特征无相关性。     

经颈静脉肝内门体分流术治疗原发性胆汁性肝硬化门静脉高压的效果及安全性

目的探讨经颈静脉肝内门体分流术(TIPS)应用于失代偿期原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者的短期疗效及安全性。方法对2009年1月-2015年5月于南京大学医学院附属鼓楼医院行TIPS治疗的26例失代偿期PBC患者的临床数据进行回顾性分析。对比术前术后门静脉压力、肝功能、生存率等指标及术后1年的随访情况。用Friedman检验进行多个相关样本的秩和检验,Wilcoxon检验进行配对秩和检验,对整个随访期内患者生存率作Kaplan-Meier分析曲线。结果 26例患者术后平均门静脉压力为19.11(16.35~22.05)mm Hg,较术前27.93(25.26~30.87)mm Hg显著下降,差异具有统计学意义(Z=-4.199,P0.001)。术后3个月内TBil、终末期肝病模型评分、胆汁酸等较术前明显上升(χ2值分别为26.000、18.429、16.353,P值均0.001)。术后最常见并发症为发热,发生率为80.77%(21/26),其次为肝性脑病,发生率为19.23%(7/26),术后6、12个月生存率均为92.3%(24/26)。结论 TIPS治疗失代偿期PBC患者短中期疗效及安全性较好,长期疗效尚需进一步观察。     

高迁移率族蛋白1参与脓毒症大鼠急性呼吸窘迫综合征时中性粒细胞的凋亡

目的 探究脓毒症大鼠急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)时高迁移率族蛋白1(high mobility group box 1,HMGB1)参与中性粒细胞(polymorphonuclear neutrophils,PMN)凋亡延迟的相关机制及正丁酸钠(sodium butyrate,SB)的干预效果. 方法 采用随机数字表法将90只健康成年雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为正常对照组(NS组,6只)、内毒素(lipopolysaccharide,LPS)致伤组(LPS组,42只)、HMGB1抑制剂SB干预组(SB组,42只),LPS组、SB组又分为7个时相点(LPS致伤后0.5、1、2、6、12、24、48 h),每个时相点6只动物.LPS组,腹腔注射LPS 5 mg/kg;SB组,腹腔注射LPS 5 mg/kg后0.5 h静脉注射SB,每次剂量500 mg/kg;NS组,腹腔注射生理盐水1 ml.LPS组、SB组于LPS注射后各时点,颈静脉取血检查PMN,取血后左肺灌洗收集支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF),取右肺中叶行HMGB1 mRNA检测;于LPS注射12h时点(NS组大鼠留取颈静脉血、收集BALF、取右肺中叶行HMGB1 mRNA检测),3组大鼠收集左肺BALF后,取右肺下叶检测肺组织湿/干重比(wet/dry weight ratio,W/D),取右肺上叶进行病理组织学检查;于24、48 h时点,LPS组、SB组取右肺下叶检测肺组织W/D、取右肺上叶进行病理组织学检查. 结果 与NS组比较,LPS组肺组织中HMGB1 mRNA表达量明显增高,24 h达最大值,差异有统计学意义(P＜0.05);SB组的HMGB1 mRNA表达量减少,差异有统计学意义(P＜0.05).LPS组BALF中凋亡早期PMN表达量与NS组类似,但凋亡晚期PMN变化则不同,LPS组外周血中凋亡晚期PMN细胞高于NS组(P＜0.05),LPS组BALF中凋亡晚期PMN细胞均低于NS组(P＜0.05).LPS 12 h组BALF的PMN百分比明显高于NS组[(49.1±6.8)、(2.7±0.5)],差异有统计学意义(P＜0.01).LPS组肺组织光镜下可见肺泡腔水肿,支气管壁中发现PMN浸润,肺泡壁毛细血管扩充血.LPS24 h组肺组织的W/D明显高于NS组[(6.71±0.12)、(4.18±0.26)],差异有统计学意义(P＜0.05).SB干预组的HMGB1 mRNA表达量减少,早期凋亡率类似,SB组的BALF晚期凋亡率高于同时点LPS组的BALF,SB外周血组晚期凋亡低于同时点LPS外周血组,差异有统计学意义(P＜0.05).SB组BALF的PMN百分比、肺组织病理损伤程度、W/D均低于LPS组,差异有统计学意义(P＜0.05). 结论 在大鼠ARDS中,HMGB1 mRNA表达较晚,但持续时间长,SB对HMGB1有潜在的治疗作用,HMGB1可能参与PMN凋亡机制的调节.     

S100A12在重症急性胰腺炎治疗中的潜在作用

目的探讨钙结合蛋白S100A12在小鼠重症急性胰腺炎治疗中的潜在作用。方法采用连续7次腹腔注射雨蛙素50μg/kg(每次间隔1 h)及脂多糖建立小鼠急性胰腺炎模型。将160只SPF级雌性ICR小鼠随机分为对照组(A组,生理盐水)、轻型组(B组,雨蛙素)、重症组(C组,雨蛙素+脂多糖)、干预组(D组,S100A12重组抗体+雨蛙素+脂多糖),每组40只。在首次注射雨蛙素后8 h、12 h和24 h采血,分别检测各时段血清中S100A12、淀粉酶(AMY)、C反应蛋白(CRP)、白介素(IL-1β、IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF-α)的含量,观察小鼠胰腺的病理形态并进行评分。结果与C组相比,D组各时段血清中AMY、CRP、IL-1β、IL-6、TNF-α、S100A12含量明显降低(P0.05);与B组相比,D组各时段血清S100A12浓度明显降低(P0.05),胰腺病理形态也有明显改善。结论 S100A12重组抗体能够有效降低小鼠急性胰腺炎的严重程度,S100A12可以作为重症急性胰腺炎治疗的一个有效靶点。     

比色板与电脑比色仪比色准确性的分析

目的 通过分析比色板与电脑比色仪比色的准确性,探讨电脑比色仪对比色板色标未能覆盖颜色的精确表达作用.方法 选取天然牙颜色分布相对均一的单颗前牙全瓷冠修复患者120例,按照随机数字表分为两组(V组和S组),每组60例.V组采用比色板,S组采用电脑比色仪,对患者的天然牙进行比色;再根据测色结果分为色标颜色组(V1、S1)和中间颜色组(V2、S2).修复后使用电脑比色仪对所有修复体及V组比色参照的天然牙进行测色,分别计算每组修复体中部与天然牙中部的总色差△E*ab,对结果进行配对t检验.结果 V组△E*ab(3.92±1.59)与S组△E*ab(2.23±0.96)的差异有统计学意义(P＜0.01);V1组△E*ab(2.29±0.88)与V2组△E*ab(4.42±1.42)的差异有统计学意义(P＜0.01);S1组△E*ab(2.12±0.84)与S2组△E*ab(2.27±1.01)的差异无统计意义(P=0.014).V2组AE*ab与S2组△E*ab的差异有统计学意义(P＜0.01);V1组△E*ab与S1组△E*ab的差异无统计学意义(P=0.698).结论 对于比色板色标未能覆盖的颜色,电脑比色仪的定位与表达比单纯用比色板比色更准确,利于指导修复体的颜色再现.