甲泼尼龙联合霉酚酸对人系膜细胞增殖的影响

在肾小球疾病中,多数为机体免疫功能异常所致的系膜(MC)增生.系膜细胞增殖的直接结果是分泌多种炎症介质,以及细胞外基质(ECM)蛋白的过度合成,最终导致炎症性疾病以及肾小球硬化.     

IgA肾病患者合并高尿酸血症临床及病理特征分析

目的探讨IgA肾病高尿酸血症的临床病理特征及相关危险因素。 方法选取2010年1月至2015年7月于山西医科大学第二医院行经皮肾穿刺活检确诊为IgA肾病的188例患者,根据血尿酸水平将患者分为正常血尿酸组与高尿酸血症组,收集患者一般资料、尿蛋白定量、肾功能等临床生化指标以及病理指标,并对肾脏病理组织进行牛津病理分型。分析两组患者临床表现、肾脏病理特点,应用多元回归统计学方法分析高尿酸血症发生的影响因素。其他数据采用SPSS13.0软件进行统计分析。 结果本研究中心188例IgA肾病患者中合并高尿酸血症的患者有42例,高尿酸血症发生率为22.3%;高尿酸血症组中男性患者36例,女性患者6例;与正常血尿酸组(男性患者61例、女性患者85例)相比,高尿酸血症组男性患者明显增多(χ²＝25.2,P<0.001)。本组研究IgA肾病患者肾脏组织牛津病理分型以M1E1S0T0多见;与正常血尿酸组比较,高尿酸血症组患者肾小管－间质损伤重,差异有统计学意义(χ²＝5.056,P＝0.025)。肾组织免疫复合物IgA沉积于毛细血管袢者高尿酸血症发生率明显升高(χ²＝44.69,P<0.001)。IgA肾病患者合并高尿酸血症的相关因素为性别、体质量指数、甘油三酯、IgA沉积于毛细血管袢。 结论IgA肾病高尿酸血症的危险因素为男性、肥胖、高甘油三酯血症,并可能与IgA在毛细血管区沉积相关。     

二甲双胍阻断乳腺癌细胞-间质细胞的交互作用：基于抑制肿瘤相关成纤维细胞缺氧诱导因子-1α的表达

目的 探讨二甲双胍（Met）对乳腺癌肿瘤-间质细胞交互作用的影响及机制。方法 将肿瘤相关成纤维细胞（CAFs）与乳腺癌细胞共培养,运用二甲双胍进行干预,分为对照组和Met干预组,ELISA及RT-qPCR检测Met对CAFs中HIF-1α、p-AMPK、基质衍生因子-1(SDF-1)和白细胞介素-8(IL-8)等因子的表达变化以及Transwell检测肿瘤细胞侵袭能力的变化。运用外源性SDF-1、IL-8干预后,Transwell检测肿瘤细胞侵袭能力的变化。运用缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)shRNA或过表达质粒调节CAFs-HIF-1α的表达,以及AMPK-shRNA抑制AMPK的表达,并运用OG和2-OXO调节脯氨酸羟化酶的表达,及运用外源性TGF-β1干预后,Western blot及RT-qPCR检测CAFs中p-AMPK、HIF-1α、SDF-1、IL-8的表达,Transwell检测肿瘤细胞侵袭能力的变化。结果 相较于对照组,Met干预组中CAFs的p-AMPK、SDF-1和IL-8的表达水平升高（P<0.05）,HIF-1α表达水平下降（P<0.05）,A...     

中介素真核表达载体的构建及其在超声微泡介导下的肾脏表达

目的 构建大鼠中介素(IMD)基因真核表达载体IMD-pCDNA3.1(+),以超声微泡法介导其在大鼠体内肾脏局部高表达.方法 用HindⅢ和EcoRI双酶切IMD基因和目的载体pCDNA3.1(+),连接制备真核表达载体IMD-pCDNA3.1(+),命名为IMD-pCDNA3.1(+),并对重组表达载体进行酶切、测序鉴定.18只雄性Wistar大鼠随机分为未转染组、空质粒转染组以及IMD基因转染组,每组6只,采用超声微泡介导技术转染大鼠肾脏.RT-PCR、Western blotting检测IMD表达.结果 经限制性酶切鉴定及测序分析证实IMD-pCDNA3.1(+)载体序列正确;3组大鼠肝、肾功能差异均无统计学意义(P均＞0.05);实验各组均未见明显肾小球及肾小管、间质损害;半定量RT-PCR、Western blotting检测显示:IMD转基因组肾组织IMD mRNA及其蛋白表达较空质粒转染组和未转染组明显上调.结论 IMD-pCDNA3.1(+)表达载体构建成功,并在大鼠肾脏内成功表达.

Abstract：

Objective To construct eukaryotic expression vector encoding rat IMD gene and deliver it into rat renal tissue via ultrasound-mircobubbles. Methods IMD gene was inserted into pCDNA3.1 ( + )between Hind Ⅲ and EcoRI enzyme sites. The recombinant plasmid designated as IMD-pCDNA 3.1 wasconfirmed by restrictive enzyme digestion and sequencing. Eighteen male Wistar rats were randomized into 3groups, which were treated with no transfection, empty vector transfection and IMD transfection, respectively, in renal tissue via ultrasound-microbubbles. RT-PCR and Western blotting were applied to detect the expression level of IMD. Results Enzyme- digestion and sequencing data showed that IMD-pCDNA 3.1 was correctly constructed. The differences in ALT, AST, BUN and SCr were not significant; No obvious damage in the glomerular, tubular and interstitial was observed in all the treated groups;Compared with non-transfection group and empty vector-transfection group, IMD mRNA and protein expression in IMD transgenic renal tissue were significantly increased. Conclusion IMD-pCDNA 3.1 expression vector was successfully constructed and well expressed in rat kidney.     

intermedin对肾脏缺血再灌注损伤后血管再生相关因子表达的影响

目的 观察intermedin（IMD）对肾脏缺血再灌注损伤(IRI)后血管生长相关因子缺血诱导因子1α（HIF-1α）、血管内皮生长因子（VEGF）和血管生成素受体Tie-2表达的影响。探讨intermedin对肾脏IRI的修复作用。 方法 Wistar大鼠按随机数字表法分为4组：假手术组、IRI组、转空质粒组、转IMD质粒组。大鼠右肾切除后1周,用超声微泡造影剂介导的基因转染方法将大鼠IMD真核表达质粒转染大鼠肾脏,转染成功后夹闭左肾动脉45 min制作肾脏IRI模型。分别于再灌注1 d、2 d、3 d、4 d、7 d和14 d后留取肾组织标本,采用RT-PCR检测HIF-1α、VEGF和Tie-2的mRNA表达;Western印迹法检测肾组织VEGF的蛋白表达;ELISA检测HIF-1α和Tie-2的蛋白表达。 结果 与假手术组相比,IRI组HIF-1α mRNA和蛋白质表达于再灌注后1 d达到高峰,2 d时持续高表达,3 d时表达开始明显下降,4 d、7 d和14 d时接近于假手术组;VEGF和Tie-2表达均于再灌注后1 d开始增加,2 d达到高峰,3 d开始下降,4 d、7 d和14 d接近于假手术组;转IMD质粒组大鼠肾组织HIF-1α、VEGF和Tie-2 mRNA和蛋白质的表达于再灌注后1 d、2 d、3 d和4 d显著高于同时间点的IRI组大鼠（均P ＜ 0.05）,并且均于再灌注后1 d表达达到高峰,2～3 d持续表达,4 d开始下降,7 d和14 d的表达无明显改变。上述各指标在转空质粒和IRI组之间的表达差异无统计学意义。 结论 肾脏局部高表达的IMD不仅促进了肾脏IRI后血管再生相关因子HIF-1α、VEGF和Tie-2的表达,而且使表达高峰提前并延长了表达时间,可能参与了肾脏组织的修复和再生。     

中介素对大鼠近端肾小管上皮细胞缺氧复氧模型的保护作用

中介素(IMD)是2004年发现的降钙素基因相关肽(CGRP)超家族成员.在肾脏有很高的表达和分泌,可增加肾血流量、尿量.降低肾血管阻力[1].IMD可通过环磷酸腺苷(cAMP)蛋白激酶A(PKA)途径减轻心脏缺血再灌注(I/R)损伤[2].本研究以大鼠近端肾小管上皮细胞NRK-52E缺氧复氧(H/R)模型模拟在体I/R,探讨IMD对肾脏I/R损伤的作用.     

维生素E对大鼠肾脏缺血再灌注损伤诱导的肾小管上皮细胞凋亡的影响

目的 探讨维生素E对大鼠肾脏缺血再灌注损伤(IRI)诱导的肾小管上皮细胞凋亡的影响及可能的机制. 方法 健康雄性Wistar大鼠18只随机分为对照组、IRI组和维生素E组.动物右肾切除1周后,夹闭左肾动脉制作IRI模型,24 h后取肾标本,维生素E组右肾切除后给予维生素E 50 mg/d灌胃至再灌注24 h.半定量分析肾脏病理损伤、TUNEL检测肾组织凋亡、比色法测肾组织caspase-3活性. 结果 ①与对照组相比,IRI组肾脏病理损伤严重、肾小管上皮细胞凋亡明显增加、caspase-3活性明显增高(P<0.01);②与IRI组相比,维生素E处理组肾脏病理损伤明显减轻、肾小管上皮细胞凋亡明显减少、caspase-3活性明显减少(P<0.01). 结论维生素E能抑制肾脏IRI诱导的肾小管上皮细胞凋亡,其机制可能是通过抑制caspase依赖的细胞凋亡途径实现的.     

食管贲门双源癌组织中Rb 蛋白的表达

目的:探讨食管贲门双源癌组织中Rb蛋白表达的变化特征及其意义.方法:采用免疫组化ABC法和组织病理学方法,分析河南食管癌高发区林州市30例食管贲门双源癌患者Rb蛋白的表达状况.结果:在30例双源癌患者中,食管鳞癌和贲门腺癌组织中Rb阳性率分别为46.7%(14/30)和40%(12/30),差异无统计学意义(x2=0.272,P＞o.05).食管和贲门癌组织Rb一致阳性率为36.7%(26/30),一致阴性率为50%(15/30),食管鳞癌和贲门腺癌组织中Rb的表达相关(P＜0.05).结论:该地区食管癌和贲门癌存在较高的Rb一致性变化,提示二者可能具有相似的发病因素和分子机制.     

重组生长激素对肾病综合征患者血脂代谢的影响

目的 观察基因重组生长激素(rhGH)对肾病综合征(NS)患者血脂TG、TC、HDL、LDL,与IGF-1和IGFBP-3的作用. 方法 原发性NS患者100例,随机分为2组:治疗组50例,在常规治疗的基础上加上rhGH治疗2周;对照组50例用常规治疗.另选健康人10名作为正常组.以放射免疫法测血清IGF-1和IGFBP-3水平,全自动生化仪检测血清TG、TC、HDL和LDL水平. 结果与正常组相比,治疗组和对照组治疗前血清IGF-1、IGFBP-3水平均明显降低,两组在治疗前、后血清TC、TG、HDL和LDL水平均明显升高,差异具有统计学意义(P<0.01).与治疗前相比,治疗组rhGH治疗2周后血清IGF-1和IGFBP-3水平显著上升,TC和LDL水平显著下降,TG和HDL无明显变化;而对照组的各项检测指标在治疗前后均无统计学差异. 结论 IGF-1和IGFBP-3参与了肾病综合征血脂代谢紊乱的发生,短期小剂量rhGH可以通过提高IGF-1、IGFBP-3水平而改善患者的血脂代谢.     

上调intermedin表达对大鼠肾脏缺血再灌注的保护作用

目的 观察上调肾脏intermedin( IMD)表达对大鼠肾脏缺血再灌注(I/R)的影响.方法 24只健康雄性Wistar大鼠随机分为假手术组、肾脏I/R组、IMD+I/R组、空质粒+I/R组,每组6只.所有动物于I/R术24h后杀检,取肾组织进行光镜检查,留取血清测定尿素氮(BUN)和血清肌酐(Scr)的浓度.免疫组织化学方法、半定量RT-PCR、Western印迹检测肾组织IMD表达及部位.Western印迹测定内皮素1(ET-1)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)蛋白的表达.结果 HE、PAS染色结果显示,I/R组肾小管及间质病理损伤显著重于假手术组,IMD+I/R组小管间质损伤程度较肾脏I/R模型组及空质粒+I/R模型组明显减轻(1.5±0.8比7.6±2.3和7.0±1.8,均P＜0.05].与假手术组[(BUN 3.85±0.21 mmol/L,Scr(48.67±3.61) μmol/L相比,I/R组、IMD+I/R组以及空质粒+I/R组BUN(10.13±2.14) mmol/L,( 7.73±1.03) mmol/L,( 9.77±1.92) mmol/L和Scr(80.33±7.15) μmol/L,(58.50±:3.27)μmol/L,(75.67±7.58) μmol/L均明显升高(均P＜ 0.05),其中IMD+I/R组较I/R组以及空质粒+I/R组BUN和Scr水平显著降低(均P＜ 0.05).免疫组化结果显示,假手术组IMD呈弱阳性表达,主要位于肾小管间质细胞胞质内,I/R组肾组织IMD在肾小管上皮细胞和间质表达较假手术组上调;IMD+I/R组肾组织中IMD表达较I/R组明显上调(P＜0.01).与I/R组及空质粒+I/R组相比IMD+I/R组肾组织IMD mRNA,相对含量分别增加了60.7％、66.1％,蛋白相对含量分别增加了51.4％、55.9％.此外,与I/R组相比,IMD+I/R组肾组织ET-1、TNF-α蛋白表达显著降低(ET-1:0.17±0.02比0.08±0.02;TNF-α:0.35±0.02比0.21±0.04,均P＜0.05).结论 在大鼠肾脏I/R前上调IMD表达可能通过抑制ET-1、TNF-α表达保护肾脏结构及功能.