中介素减轻大鼠肾脏缺血再灌注损伤

目的 探讨中介素(IMD)对大鼠肾脏缺血再灌注损伤(IRI)的影响,及其过程中一氧化氮合酶(NOS)的作用和机制.方法 将健康雄性Wistar大鼠分为4组:假手术组,行右肾切除术,1周后单纯分离左侧肾蒂及肾动脉,而不夹闭肾动脉；肾脏缺血再灌注(IR)组,行右肾切除术,1周后行左肾缺血再灌注手术；IMD基因转染组,右肾切除后左肾行超声微泡介导的IMD-pCDNA3.1(+)质粒转染术,饲养1周,再行左肾缺血再灌注手术；空质粒转染组,右肾切除后左肾行超声微泡介导的pCDNA3.1(+)质粒转染术,饲养1周,再行左肾缺血再灌注手术.大鼠于缺血再灌注术后24 h处死,用免疫组织化学方法检测肾组织IMD表达,取肾组织进行病理学观察,取血清测定尿素氮(BUN)和肌酐(Cr)浓度,检测肾组织中内皮型NOS(eNOS)、诱导型NOS(iNOS)以及神经型NOS(nNOS) mRNA及其蛋白的表达.结果 假手术组大鼠肾组织中IMD位于肾小管及间质细胞胞浆内,其表达灰度值为66±35;肾脏IR组大鼠肾小管上皮细胞和间质中IMD表达灰度值为176±48,高于假手术组(P＜0.01)；IMD基因转染组肾组织中IMD表达灰度值为262±68,高于肾脏IR组(P＜0.01)；空质粒转染组IMD表达灰度值为180±51,和肾脏IR组间表达的差异无统计学意义(P＞0.05).与肾脏IR组相比较,IMD基因转染组大鼠肾脏组织病理损伤程度较轻,血清BUN和Cr较低(P＜0.05),eNOS mRNA及eNOS表达升高(P＜0.05),iNOS mRNA及iNOS表达降低(P＜0.05),而两组间nNOSmRNA及nNOS表达的差异无统计学意义(P＞0.05).结论 中介素可能通过促进eNOS表达、抑制iNOS表达从而减轻大鼠肾脏IRI.     

甲基泼尼松龙对人肾小球系膜细胞增殖和细胞周期的影响

目的：探讨甲基泼尼松龙（methylprednisolone,MP）对体外培养的人肾小球系膜细胞增殖和细胞周期的影响。方法：采用四甲基偶氮唑盐法（MTT）检测不同浓度的甲基泼尼松龙处理后系膜细胞的增殖情况,用流式细胞仪检测不同浓度的甲基泼尼松龙分别作用24 h后系膜细胞的细胞周期的改变。结果：（1）作用24 h、48 h和72 h后,浓度为1～100 mg/L的甲基泼尼松龙能抑制系膜细胞的增殖,且随着甲基泼尼松龙浓度的增大,抑制作用更显著,呈一定的剂量效应关系。（2）浓度为1～100 mg/L甲基泼尼松龙作用24 h后,G0/G1期的系膜细胞百分比增高,S期的系膜细胞百分比降低,细胞周期阻滞于G0/G1期。结论：甲基泼尼松龙显著抑制体外培养的人肾小球系膜细胞增殖,并能使体外培养的人肾小球系膜细胞的细胞周期阻滞于G/G期。     

大鼠肾脏缺血再灌注损伤中垂体中叶素及降钙素受体样受体的表达

目的 观察垂体中叶素（IMD）及其受体降钙素受体样受体（CRLR）在大鼠肾脏缺血再灌注损伤中的表达变化。 方法 将健康雄性Wistar大鼠随机分为假手术组和手术组,夹闭大鼠双侧肾动脉制作肾脏缺血再灌注损伤（IRI）模型,于缺血再灌注后0、6、12、24、48、72 h 6个时间点各取6只大鼠,留取血清及肾组织标本,对肾脏病理损伤评分并行半定量分析; Western印迹法半定量分析肾组织IMD及其受体CRLR的表达变化;放射免疫法检测血浆中IMD的表达变化。 结果 手术组大鼠发生了急性肾小管坏死（ATN）,以缺血再灌注48 h时病理损伤最重。与假手术组比较,IMD及CRLR在缺血再灌注12、24、48、72 h表达显著增高（均P < 0.01）;血浆中IMD在缺血再灌注12、48、72 h表达显著增高（均P < 0.05）。 结论 IMD及受体CRLR在大鼠肾脏缺血再灌注损伤中表达增加,血浆中IMD表达上调,提示其可能在肾脏缺血再灌注损伤病理生理过程中发挥作用。     

氯沙坦对血管紧张素Ⅱ诱导人足细胞分泌VEGF的影响

目的：研究血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）对人足细胞分泌血管内皮细胞生长因子（VEGF）的影响及氯沙坦的保护作用。方法：将人足细胞与干预药物共培养。（1）按AngⅡ浓度梯度0、1、10、100nm和时间梯度0、3、6、12、24h分组培养,用RT-PCR检测VEGF的mRNA表达水平;（2）用100nm AngⅡ刺激足细胞,并按不同浓度氯沙坦干预分组培养,用RT-PCR检测VEGF的mRNA表达水平。结果：AngⅡ可以剂量和时间依赖性的诱导足细胞表达VEGF增高,而氯沙坦可以剂量依赖性的阻断VEGF表达增高。结论：AngⅡ对VEGF基因表达的增高呈剂量和时间依赖性,氯沙坦可拮抗AngⅡ诱导人足细胞表达VEGF增高。     

肾上腺髓质素对大鼠肾缺血再灌注损伤中肾小管上皮细胞凋亡的影响及机制研究

目的 观察肾上腺髓质素(adrenomedullin,AM)对大鼠肾缺血再灌注损伤(ischemia reperfusion injury,IRI)中肾小管上皮细胞凋亡的影响,并探讨其机制.方法 Wistar大鼠32只,随机分为4组:假手术组和IRI组各6只,转染空质粒组和转染AM质粒组各10只.大鼠右肾切除后1周,用超声微泡造影剂介导的基因转染方法将大鼠AM真核表达质粒转染大鼠肾脏,1周后采用免疫组织化学方法检测转染效率.转染成功后夹闭左肾动脉45 min制作肾IRI模型,于再灌注24 h后留取肾组织标本.TUNEL染色检测肾组织细胞凋亡,RT-PCR检测肾组织Bcl-2、Bax和Fas的mRNA表达,蛋白质印迹法检测caspase-3、caspase-8和caspase-9蛋白质表达.结果 转染AM质粒组的AM表达显著高于转染空质粒组(0.51±0.09和0.23±0.05,P＜0.05).与假手术组相比,IRI组肾组织细胞凋亡率明显增加[(38.79±7.52)%和(2.89±0.52)%,P＜0.05];肾组织Bax、Bcl-2、Fas、caspase-3、caspase-8和caspase-9表达上调,分别为0.72±0.18和0.23±0.04、0.80±0.12和0.38±0.06、1.24±0.25和0.39±0.09、0.76±0.13和0.38±0.08、0.92±0.14和0.32±0.06、0.89±0.12和0.42±0.09(P＜0.05),Bax/Bcl-2升高(0.91±0.18和0.61±0.08,P＜0.05).转染AM质粒组肾组织凋亡细胞数、Bax、Fas、caspase-3、caspase-8和caspase-9表达下调,分别为(19.36±6.78)%、0.48±0.11、0.62±0.07、0.53±0.08、0.46±0.08、0.51±0.12,与IRI组比较差异均有统计学意义(P＜0.05);Bcl-2表达进一步上调为1.23±0.25,Bax/Bcl-2降低为0.44±0.12,与IRI组比较差异均有统计学意义(P＜0.05).转染空质粒组和IRI组比较,上述各指标差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 AM能减轻肾IRI引起的肾小管上皮细胞凋亡,其部分机制可能是通过抑制caspase依赖的内、外源性凋亡途径实现的.

Abstract：

Objective To investigate the effect and mechanism of adrenomedullin (AM) on apoptosis of renal tubular epithelial cell in rats induced by renal ischemia reperfusion injury. Methods Thirty-two Wistar rats were randomly divided into 4 groups: control group, IRI group, empty plasmid group and AM group. One week after removing the right kidney, eukaryotic expression vector encoding rat AM gene was transfected into the left kidney using an ultrasound-microbubble mediated system. After 1 week the transfer efficiency was detected by immunohistochemical method . Renal IRI model induced by clamping left renal arteries for 45 min followed by reperfusion for 24 h. Tubular cell apoptosis was detected by TUNEL assay. Bcl-2, Bax and Fas expressions were examined by RT-PCR. The expressions of caspase-3, caspase-8 and caspase-9 were determined by Western bolt analysis. Results The expression of AM in the AM group was significantly higher than the empty plasmid group (0.51±0.09 vs 0.23±0.05; P<0.05). Compared with the control group, the apoptosis rate of renal tubular cell in the IRI group was significantly higher [(38.79±7.52)% vs (2.89±0.52)%; P<0.05]. The expressions of Bax, Bcl-2, Fas, caspase-3, caspase-8 and caspase-9 were also significantly increased (0.72±0.18 vs 0.23±0.04, 0.80±0.12 vs 0.38±0.06, 1.24±0.25 vs 0.39±0.09, 0.76±0.13 vs 0.38±0.08, 0.92±0.14 vs 0.32±0.06, 0.89±0.12 vs 0.42±0.09; P<0.05). Bax/Bcl-2 was also significantly increased (0.91±0.18 vs 0.61±0.08; P<0.05). Compared with the IRI group, AM pretreatment significantly decreased the apoptosis rate of renal tubular cells [(19.36±6.78)% vs (38.79±7.52)%; P<0.05]. AM inhibited the up-regulation of Bax, Fas, caspase-3, caspase-8 and caspase-9, while promoting the up-regulation of Bcl-2 (0.48±0.11 vs 0.72±0.18, 0.62±0.07 vs 1.24±0.25, 0.53±0.08 vs 0.76±0.13, 0.46±0.08 vs 0.92±0.14, 0.51±0.12 vs 0.89±0.12, 1.23±0.25 vs 0.80±0.12; P<0.05). Bax/Bcl-2 significantly decreased (0.44±0.12 vs 0.91±0.18; P<0.05). The above parameters had no significant diffe-rence between the empty plasmid group and the IRI group (P>0.05). Conclusion AM can reduce apoptosis of renal tubular epithelial cell induced by renal IRI, the mechanism of which might be achieved by inhibiting caspase-dependent intrinsic and extrinsic pathways.     

甲钴胺治疗糖尿病神经病变的临床疗效

目的：分析甲钴胺治疗糖尿病神经病变的临床疗效。方法选取2013‐10—2014‐10我院收治的80例糖尿病神经病变患者,随机分为实验组和对照组各40例。对照组给予常规治疗,实验组在常规治疗的基础上使用甲钴胺治疗。结果实验组总有效率为95％明显高于对照组的63％,实验组不良症状均比对照组有明显改善,2组差异有统计学意义（ P＜0.05）。结论糖尿病神经病变患者使用甲钴胺治疗具有良好临床疗效,值得推广应用。     

血液灌流对IL-6、TNF-α、CRP的影响

自血液净化技术问世以来,终末期肾病（ESRD）患的生存期和生活质量有了明显的改善,但维持性血液透析患还存在多种影响生活质量的临床并发症.研究表明,细胞因子如白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）及C-反应蛋白（CRP）是导致并发症发生的原因之一,而常见血液净化方式如血液透析、腹膜透析等不仅不能清除这些中、大分子物质,反而由于可刺激外周血单核细胞分泌细胞因子增多而使其水平进一步升高.     

血液灌流对Lp(a)的影响

目的观察血液灌流对血液透析患者血脂[Lp(a)]的影响.方法选取多个血液净化中心血液透析患者40例,比较单次血液透析串联血液灌流前后患者血脂的变化.结果慢性肾衰竭患者多数存在血脂代谢的紊乱,血液灌流后血Lp(a)以及甘油三酯(TG)的浓度下降,高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、载脂蛋白A(APOA)、载脂蛋白B(APOB)、总胆固醇(TC)的浓度无明显变化.结论血液灌流可以降低维持性血液透析患者的Lp(a)及TG,改善其脂代谢紊乱.     

肾病综合征患者尿蛋白成分分析的临床意义

<正>肾病综合征是肾内科常见疾病之一,其基础的病理生理改变为大量蛋白尿。蛋白尿的选择性,以及尿中一些特殊蛋白成分与病理类型、临床表现、治疗反应及预后诸方面具有一定的相关性。我们选择2000—2007年于我科住院的100例资料完整、     

肾康治疗大鼠抗Thy-1抗体系膜增殖性肾炎的实验研究

目的:探讨肾康对鼠抗Thy-1系膜增殖性肾炎(MsPGN)TNF-α及IL-6的影响.方法:本研究应用大鼠抗Thy-1系膜增殖性肾炎(MsPGN)动物模型,将大鼠随机分为4组:正常对照组、模型组、酶酚酸酯组、肾康治疗组,每组10只大鼠.各实验组于第35 d处死大鼠,颈动脉取血,用于IL-6、TNF-α实验指标的检测.结果:模型组大鼠血浆TNF-α和IL-6水平明显高于正常对照组(P<0.05),MMF组及肾康组血浆TNF-α和IL-6水平明显下降(P<0.05),两组间比较无统计学差异(P>0.05).结论:肾康与酶酚酸酯比较具有相似的作用,能有效降低大鼠抗Thy-1系膜增殖性肾炎血浆TNF-α和IL-6水平,抑制系膜细胞增殖及细胞外基质增加,可能是治疗MsPGN作用机制之一.