基于“三因制宜”原则探讨新冠肺炎不同中医方案的差异性

新型冠状病毒肺炎(新冠肺炎)爆发以来,中医药及时介入并发挥了重要作用,可以显著改善患者的临床症状、退热、止咳、缩短病程及降低轻中重病情转化率,同时在提高患者的生存率、改善患者的预后及生存质量等方面具有明显优势。为了更好地发挥中医药的治疗作用,尽早战胜疫情,各个省、市、自治区结合本地地域、气候和疫情情况,陆续出台了本地中医药治疗方案。该文从三因制宜角度分析了各地治疗方案的异同性,认为发病时令相同,治疗方案差异性多取决于地域和气候因素,结果显示全国七大区域,温湿地区如华中、华南、华东、西南早期证候表现多以"湿、温、热、毒"为特点,治疗方案多用清热解毒、健脾化湿类方药;寒冷地区如华北、东北、西北,早期证候表现多以"寒、湿、风、毒"为特点,治疗方案突出祛风散寒、化湿解毒作用。其中,以湖北疫情作为重要参照的国家方案,逐渐从各期的证候属性单一演变为寒热证型兼具与施治方法多样。随着疾病进展,疫毒、邪热闭肺为中期主要证候特点,治疗多侧重泄热解毒;重症期则以内闭外脱为主,治疗多急用开闭固脱之法;恢复期以肺脾气虚、气阴两虚为主,治疗多用健脾补肺,益气养阴方药;因体质因素多体现于预防方案,治疗方案中较少见。各地区新冠肺炎中医治疗方案显示出了明显的差异性,通过分析这些差异性,并总结出相应规律,这对于差异性防治类似新冠肺炎这类传染性疾病具有重要的意义。     

肾炎防衰液对5/6肾切除大鼠肾组织FN表达的影响

目的探讨肾炎防衰液对5/6肾切除(5/6nephrectomize,5/6NT)大鼠肾组织纤维粘连蛋白(fibronectin,FN)表达的影响。方法选用SD雄性大鼠,建立5/6NT大鼠肾纤维化模型。随机分为8组:正常组、假手术组、模型组、苯那普利组、尿毒清组和肾炎防衰液低、中、高剂量组。采用免疫组织化学方法,以苯那普利、尿毒清为实验对照,检测肾炎防衰液对肾组织FN表达的影响。结果模型组肾组织FN强阳性表达,在系膜基质和肾小管基底膜出现大量棕黄色颗粒;苯那普利组、尿毒清组FN中等量表达,在系膜基质和肾小管基底膜出现中等量棕黄色颗粒;肾炎防衰液低、中、高剂量组肾组织FN轻度表达明显少于模型组,在系膜基质和肾小管基底膜出现少量棕黄色颗粒,并呈剂量依赖关系。结论肾炎防衰液抑制5/6NT大鼠肾组织FN的表达,可能是该方减缓肾小球硬化和肾纤维化发展的作用机制之一。     

肝肾宝对5/6肾切除大鼠肾组织细胞外基质影响的实验研究

目的研究肝肾宝对5/6肾切除大鼠肾组织细胞外基质(ECM)如纤维粘连蛋白(FN)、层粘连蛋白(LN)、Ⅳ型胶原(ColⅣ)蛋白及其基因表达的影响.方法采用免疫组化、原位杂交方法检测肾组织FN、LN、ColⅣ及相应mRNA表达,使用TN-8502多功能图像分析系统对结果进行处理,采用SPSS统计软件统计.结果显示正常对照组、假手术组,均未见FN、LN、ColⅣ蛋白及其mRNA阳性反应物.5/6NT组,肾小球细胞细胞浆、肾小管细胞浆见FN、LN、ColⅣ蛋白及其mRNA强阳性黄色反应物.缬沙坦组FN、LN、ColⅣ蛋白及其mRNA阳性反应物减少,与5/6NT组比较,P<0.05;肝肾宝组FN、LN、ColⅣ蛋白及其mRNA阳性反应物明显减少,与5/6NT组比较,P<0.01.结论肝肾宝下调肾组织FN 、LN、ColⅣ蛋白及其基因表达,是防治肾纤维化作用机制之一.     

益气活血降浊复方对单侧输尿管梗阻大鼠肾组织TGF-β1-smad-ILK信号传导通路的影响

目的:研究益气活血降浊复方对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾组织转化生长因子β(TGF-β1),smad7,p-smad2/3,整合素连接激酶(ILK)蛋白表达,观察其对TGF-β1-smad-ILK信号传导通路的影响。方法:132只雄性SD大鼠以单侧输尿管结扎术建立肾间质纤维化动物模型,造模成功后大鼠随机分为正常组,假手术组,模型组,西药组,益气活血降浊复方高、中、低剂量组。根据大鼠体重确定具体给药剂量,益气活血降浊组高剂量组34.6 g.kg-1,中剂量组17.3 g.kg-1,低剂量组8.6 g.kg-1(分别为人服用量的20,10,5倍),ig给药,1次/d,模型组和假手术组、正常组灌入相应生理盐水。福辛普利钠10mg.kg-1(相当于成人用量的20倍)。考马斯亮蓝法测24 h尿蛋白定量;采用免疫组化方法检测肾组织中TGF-β1,smad7,p-smad2/3,ILK蛋白表达。结果:与正常组、假手术组相比,模型组大鼠第1,2,3周肾间质中TGF-β1,p-smad2/3以及ILK蛋白表达明显增多(P<0.01),正常组肾间质中均有较弱的表达,益气活血降浊复方高、中、低剂量组较正常组、假手术组在各个时间点TGF-β1,p-smad2/3以及ILK蛋白表达有所增加,但与模型组比较显著降低(P<0.01),西药福辛普利钠组较模型组表达也显著减少(P<0.01)。益气活血降浊高剂量组在各个时间点降低TGF-β1,p-smad2/3,ILK蛋白效果最好且与西药组相当,中、低剂量组虽然能降低TGF-β1,p-smad2/3,ILK蛋白,但和高剂量组和西药组存在差异。而模型组大鼠在第1,2,3周肾间质smad7蛋白表达较正常组、假手术组明显减少(P<0.01),正常组肾间质中均有较强的表达,益气活血降浊复方高、中、低剂量组较正常组、假手术组在各个时间点smad7蛋白表达有所减少,但与模型组比较显著增加(P<0.01)。结论:益气活血降浊复方通过抑制TGF-β1,p-smad2/3,ILK表达,上调smad7的表达,影响TGF-β1-smad-ILK信号传导通路,抑制肾间质纤维化的发展。     

三七总皂苷干预糖尿病肾病大鼠氧化应激及足细胞凋亡机制的实验研究

目的:探讨三七总皂苷(Panax notoginseng saponins,PNS)干预链脲佐菌素(Streptozotozin,STZ)诱导的大鼠糖尿病肾病(Diabetic nephropathy,DN)氧化应激及足细胞凋亡机制。方法:体内实验:44只SD雄性大鼠,单侧肾切除1周后一次性腹腔注射55mg/kg STZ造模,造模后,按体质量随机分为正常组,模型组,厄贝沙坦组(IRB组),三七总皂苷组(PNS组),每2周测体质量、24h时尿蛋白定量,12周后处死,记录肾质量体质量比;检测血清TG、BUN、Scr、NO、MDA和SOD浓度;进行肾组织HE、mallory、masson、六胺银染色,观察肾组织病理变化并评分;免疫组化检测肾组织TGF-β1、Caspase-3蛋白表达;原位杂交检测肾组织TGF-β1 mRNA表达。体外实验:用RT-PCR检测PNS对高糖刺激下体外培养足细胞Caspase-3 mRNA表达的影响。结果:与模型组比较,PNS组第8、10、12周体质量显著增加(P<0.05),肾组织病理评分、肾重体重比、血清TG、BUN、Scr等指标明显改善(P<0.05),血清SOD活性增强(P<0.05),同时MDA含量减少(P<0.05),肾组织TGF-β1 mRNA、Caspase-3蛋白水平下调(P<0.05);体外培养PNS组足细胞Caspase-3 mRNA表达减少。结论:PNS可能通过抗氧化应激抑制足细胞凋亡而对STZ诱导的大鼠DN起到一定的保护作用。     

补肾益髓生血法对苯与环磷酰胺诱导AA大鼠Th1/Th2细胞分泌细胞因子影响的实验研究

目的:探讨补肾益髓生血法对苯与环磷酰胺诱导AA大鼠血清细胞因子的作用。方法:清洁级SD大鼠85只,随机分为正常组10只,造模组75只,造模组皮下隔天注射苯(1 mL/kg)7周,取材前2周连续隔天腹腔注射CTX(25 mg/kg)3次,建立苯与环磷酰胺诱导AA大鼠模型。三周后灌胃前,按体质量随机分为模型组、康力龙组、益髓生血组、温肾生血组和滋肾生血组。第七周处死大鼠,股动脉取血,静置离心后,取上层血清,放免法检测血清中IFN-γ、TNF-α、IL-2、IL-4、IL-5、IL-10细胞因子的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠血清IFN-γ明显升高(P0.05),IL-2显著升高(P0.01),TNF-α有升高趋势,经过治疗后,IFN-γ、IL-2、TNF-α均有降低趋势;与正常组比较,模型组IL-4、IL-5水平明显降低(P0.05),IL-10显著降低(P0.01),经过治疗后,IL-4、IL-5、IL-10均有升高趋势。结论:补肾益髓生血法可降低AA大鼠血清细胞因子IFN-γ、IL-2、TNF-α负调控,增加细胞因子IL-4、IL-5、IL-10正调控,对AA大鼠免疫和造血系统有一定的调节作用,且滋肾生血方疗效优于益髓生血颗粒、温肾生血方。     

再生障碍性贫血T-bet/IFN-酌信号通路及中医研究进展

再生障碍性贫血（AA）是T 淋巴细胞介导的自身免疫性疾病。AA 的发病机制研究主要集中在免疫功能异常、造血干细胞损伤、造血微环境异常3 个方面。近年来,AA 免疫机制异常越来越受到中医药血液病研究者的关注。AA 发病机制中细胞因子及相关的细胞内信号转导通路尤其复杂,其中T-bet/IFN-γ信号通路在AA 发生发展过程中起着重要的作用。本文就T-bet/IFN-γ及其相关信号传导通路在AA 中的作用做一综述。     

上皮-间质转化信号转导在肾间质纤维化中机制的研究进展

上皮-间质转化（epithelial—mesenchymal transition，EMT）指上皮组织在发生局部损伤后诱发的上皮细胞向间质细胞表型的转化。上皮细胞失去极性及细胞-细胞、细胞-基质间的黏附性，同时重排其丝状肌动蛋白（F—actin）张力丝，表达丝状伪足（filopodia）和片状伪足（1amellopodia），获得迁移与侵袭能力，进人间质获得新的表型而最终成为间质细胞。人们在对肾间质纤维化的研究中发现，超过1／3的间质成纤维细胞来源于局部肾小管上皮细胞（TEC）发生的EMT，所以EMT可能是导致肾间质纤维化发生的最重要的机制之一，成为当今肾间质纤维化的一个研究热点。     

筛选乙二醇法复制大鼠肾结石模型最佳剂量的比较研究

目的：探讨乙二醇法复制大鼠肾结石模型的最佳剂量，建立乙二醇法复制规范化大鼠肾结石模型的方法。方法：采用不同浓度的乙二醇（1％、1．25％、1．5％、2％）分别与1％氯化铵溶液制作大鼠肾结石模型，实验用药第4周处死大鼠，用7150全自动生化仪测定血与尿Ca^2＋、Mg^2＋、P^3＋、UA含量，用变色酸比色法测定肾组织中草酸含量；无菌取肾组织，常规石蜡包埋、组织切片、比染色、偏光显微镜观察肾组织病理改变及大鼠肾成石情况。结果：在不同浓度的乙二醇4个剂量组中，血与尿Ca^2＋、Mg^2＋、P^3＋、UA，肾组织中草酸含量以及肾成石情况不以乙二醇浓度而增加，以1．25％乙二醇合1％氯化铵对大鼠肾成石作用为优。结论：1．25％乙二醇合1％氯化铵是复制肾结石模型的最佳剂量组，可以作为乙二醇法复制的规范化的大鼠肾结石模型。     

三七总皂苷对阿霉素肾病大鼠肾组织转化生长因子-β1表达的影响

目的：探讨三七总皂苷对阿霉素肾病大鼠肾组织转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1，TGF-β1）表达的影响。方法：将45只Wistar雄性大鼠，适应性喂养1周，测尿蛋白阴性后，随机分为正常组、假手术组、模型组、苯那普利组、三七总皂苷组，每组9只。每周测大鼠体重，每2周收集大鼠24h尿量，测24h尿蛋白定量；10周后处死大鼠，分离血清检测BUN、Scr、Cho、TG、TP和AIb，应用HE、Masson染色，观察肾组织病理学改变，免疫组化方法观察三七总皂苷对阿霉素肾病大鼠肾组织TGF—Bl表达的影响。结果：三七总皂苷能够减轻阿霉素肾病大鼠肾组织病理损害，增加阿霉素肾病大鼠体重，减少尿蛋白排泄、提高血TP和Alb水平，降低BUN和scr水平改善。肾功能；正常组及假手术组肾脏固有细胞胞浆中有较少的TGF-pl表达；三七总皂苷组TGF-pl的表达与模型组相比显著减少（P〈0．05）。结论：三七总皂苷能减轻阿霉素肾病大鼠的肾脏病理损害、降低BUN、Scr、调节TG、TP和Alb水平，对阿霉素肾病大鼠肾功能有一定的保护作用，其机制可能是通过降低阿霉素肾病大鼠肾组织TGF-p1的表达而发挥作用。