海洋纤溶活性化合物FGFC1和FGFC2影响血小板聚集特性的研究

目的：研究新型海洋双吲哚纤溶活性化合物FGFC1对血小板聚集的影响,发现纤溶活性化合物FGFC1与血小板相关因子变化的关系,同时比较双吲哚化合物FGFC1和单吲哚化合物FGFC2作用于血小板的异同。方法：从新鲜兔血收集血小板,调整反应体系血小板密度,以乙酰水杨酸为阳性对照,采用微量比浊法分析FGFC1和FGFC2对血小板聚集率的影响,用酶联免疫法测定FGFC1和FGFC2对血小板生理因子含量的变化。结果：FGFC1对ADP和AA诱导的血小板聚集具有抑制作用,最大抑制率分别达到42.58%±1.7%和47.82%±2.18%;FGFC2对ADP、AA和胶原诱导的血小板聚集均具有抑制作用,最大抑制率分别为50.12%±1.02%、45.28%±1.09%和50.28%±2.12%。FGFC1与FGFC2均能提升血小板内环磷酸腺苷含量,且FGFC2能明显降低血小板内血栓素A2含量。结论：海洋双吲哚纤溶活性化合物显著抑制血小板聚集,FGFC1通过影响血小板环磷酸腺苷的含量实现抑制血小板聚集,FGFC2可能通过不止一种途径抑制血小板聚集。吲哚化合物抑制血小板聚集与分子结构密切相关。     

海绵共附生疣孢菌FIM060022抑菌活性代谢产物的研究

目的 从海绵共附生疣孢菌FIM060022的发酵液中分离抑菌活性次级代谢产物.方法 采用多种色谱技术分离纯化获得活性化合物,并对化合物进行结构鉴定及活性测定.结果 从菌株FIM060022的乙酸乙酯提取物中分离得到6个化合物,根据化合物的光谱特征(ESI-MS、1D-NMR和2D-NMR)和理化性质分别鉴定为abyssomicin B(5)、C(1)、H(6),proximicin A(4),lumichrome(2)和腺嘌呤核苷(3).抗菌活性表明化合物1、3～6对藤黄微球菌的生长均有明显的抑制作用.化合物1还对金黄色葡萄球菌的生长有较强的抑制作用,而对枯草芽孢杆菌和短小芽孢杆菌生长的抑制作用相对较弱.此外,化合物4和5对黑曲霉生长具有较弱的抑制作用.结论 本研究从海绵共附生疣孢菌FIM060022中同时分离得到抗菌活性物质abyssomicin和porximicin,化合物2和3为首次从该属菌的代谢产物中分离得到,为进一步开发利用海洋稀有放线菌资源奠定了一定的基础.     

海洋来源放线菌Actinoalloteichus cyanogriseus WH1-2216-6 产浅蓝霉素A的发酵条件优化

目的 对海洋来源放线菌Actinoalloteichus cyanogriseus WH1-2216-6 产浅蓝霉素A的发酵条件进行优化,提高浅蓝霉素A的产量。方法 对培养基的组成、接种量、起始pH、盐度、发酵时间、前体浓度及大孔吸附树脂添加量等条件的研究,通过单因素和正交试验,选择最优发酵条件;结果 获得了浅蓝霉素A的最佳发酵条件,培养基组成(可溶性淀粉20 g,甘油20 g,蛋白胨20 g,CaCO₃2 g,2-吡啶甲酸400 mg,XAD-16大孔吸附树脂50 g,陈海水1 L)、装液量150/500 mL(体积分数)、5 d种龄、3.3%盐度、起始pH=7.5、摇床(180 r/min,28℃)发酵12 d。结论 以最佳发酵条件发酵,优化后的浅蓝霉素A的产量为优化前的7.0倍,达到610.5 mg/L。     

海洋芽孢杆菌B-9987中macrolactin生物合成基因簇分析及反式酰基转移酶高表达

目的 对海洋芽孢杆菌B-9987中macrolactin生物合成基因簇及其关键基因进行分析、鉴定及功能研究。方法 通过生物信息学手段对基因簇的基因组成和功能结构域进行了分析;构建了用于酰基转移酶基因高表达的大肠杆菌—芽孢杆菌穿梭载体,采用电击转化方法导入B-9987之中进行高表达。 结果 macrolactins是由位于同一个操纵子的8个基因bmmA-I所编码的反式酰基转移酶聚酮合酶体系组装而成,反式酰基转移酶(trans-acyltransferase,trans-AT)BmmA的高表达使macrolactin A的产量提高了约0.6倍。结论 macrolactin生物合成基因簇在具有生物防治活性的芽孢杆菌中普遍存在,且高度保守;反式酰基转移酶的高表达能够增加macrolactin A的产量。     

放线菌JX-JDN-F1次级代谢产物化学成分的分离与鉴定

目的研究放线菌JX-JDN-F1次级代谢产物,以期得到有抗肿瘤活性的先导化合物。方法采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、开放ODS柱色谱以及HPLC等方法进行分离纯化,通过理化性质和波谱手段分析确定化合物的结构。结果从放线菌JX-JDN-F1的乙酸乙酯萃取物中分离得到8个化合物,分别鉴定为环(亮-亮)[cyclo(Leu-Leu),1]、环(亮-脯)[cyclo(Pro-Leu),2]、环(酪-脯)[cyclo(Tyr-Gly),3]、环(脯-缬)[cyclo(Pro-Val),4]、环(羟脯-苯丙)[cyclo(4-hydroxyl-Pro-Phe),5]、环(酪-甘)[cyclo(Tyr-Gly),6]、1-氢吡咯-2-羧酸[1H-pyrrole-2-carboxylic acid,7]和N-(4-苯乙基)-乙酰胺[N-(4-phenylethyl)-acetamide,8)。结论化合物1⁸均为首次从游动属放线菌Actinoplanes sp.属中分离得到。     

唾液中放线菌与儿童龋病相关性的定量检测研究

目的建立检测内氏放线菌（Actinomyces naeslundii,An）与龋齿放线菌（Actinomyces odontolyticus,Ao）的实时荧光定量PCR（RT-PCR）。方法探讨An和Ao在唾液中的定植数量与乳牙龋失补牙面指数（dmfs）的关系。方法分别采集59名不同患龋状况儿童唾液样本,其中无龋组（dmfs=0）19名、中龋组（dmfs=4～6）21名和高龋组（dmfs﹥8）19名。提取细菌总基因组DNA,应用SYBR GreenⅡ模式的实时荧光定量PCR技术,对唾液中的内氏放线菌及龋齿放线菌进行定量检测,所得数据应用SAS9.2统计软件进行统计学分析。结果内氏放线菌占总菌的比例在三组中有显著差异（P〈0.05）,在高龋组中显著高于中龋组（P〈0.0001）,在中龋组与无龋组间无显著差异（P〉0.05）;龋齿放线菌占总菌的比例在三组中无显著差异（P〉0.05）。结论儿童唾液中内氏放线菌的数量与龋病的发生发展过程有明显相关性;龋齿放线菌与儿童龋病的发生发展无明显相关性。     

肺放线菌病1例

患者男,40岁。因反复咳嗽、咳痰、低热1年,于2008年8月12日住入浙江大学医学院附属第二医院呼吸科。多次X线胸片及肺部CT示：右肺下叶炎症（网1）,经过头孢类抗生素,莫西沙星等药物治疗后症状好转,但右下叶片状影吸收不明显。     

新天然来源抗生素-抗霉素A_(18)的抗肿瘤活性及其产生菌I07A-01824的生物学特征

目的检测抗霉素A18的体外抗肿瘤活性并对其产生菌I07A-01824的形态及培养特征,生理生化特征等进行研究。方法用MTT法检测抗霉素A18的肿瘤细胞生长抑制作用,用流式细胞术测定其对细胞周期的影响;按分类学常规方法研究菌株I07A-01824的形态及部分生理生化特征。结果抗霉素A18能够抑制人肝癌细胞HepG2、人口腔上皮癌细胞KB的生长;这两个细胞株均被阻滞在细胞周期的S期。菌株I07A-01824的形态及培养特征与已知种——黄白链霉菌(Streptomyces albidoflavus)一致。结论红树林内生放线菌是新抗生素的重要来源。     

新天然来源抗生素-抗霉素A18的抗肿瘤活性及其产生菌107A-01824的生物学特征

目的 检测抗霉素A18的体外抗肿瘤活性并对其产生菌107A-01824的形态及培养特征,生理生化特征等进行研究方法用MTT法检测抗霉素A18的肿瘤细胞生长抑制作用,用流式细胞术测定其对细胞周期的影响:按分类学常规方法研究株107A-01824的形态及部分生理生化特征.结果 抗霉素A18能够抑制人肝癌细胞HepG2、人口腔上皮癌细胞KB的生长:这个细胞株均被阻滞在细胞周期的S期.菌株I07A-01824的形态及培养特征与己知种-黄白链霉菌(Streptomyces albidofavus)一致.结论 红树林内生放线菌是新抗生素的重要来源.