中国病理生理学会心血管专业委员会第十一届暨国际心脏病研究会(ISHR)中国分会第八届学术会议会议纪要

国际心脏研究会 (ISHR)中国分会第八届暨中国病理生理学会心血管专业委员会第十一届学术会议于 2 0 0 4年 9月 18- 2 2日在山东省威海市东山宾馆召开 ,会议由国际心脏研究会 (ISHR)中国分会和中国病理生理学会心血管专业委员会主办 ,威海市医学会、解放军总医院老年心内科和北京大学第三医院血管医学研究所承办。大会特邀ISHR前主席、加拿大BonifaceGen eralHospital心血管研究所所长NaranjanS .Dhalla教授 ,国际药理学会主席、香港大学药理系资深教授PaulM .Vanhoutte ,国际心脏研究会澳大利亚分会主席LindsayBrown教授等 8位国…     

β-肾上腺素受体介导成纤维细胞旁分泌IL-6促进心脏miR-21表达

目的:探讨β-肾上腺素受体(β-adrenergic receptor,β-AR)激动剂异丙基肾上腺素(isoproterenol,ISO)促进心脏微小RNA-21(miR-21)表达的调控机制。方法:采用酶消化法分离原代乳小鼠心肌细胞和心脏成纤维细胞,分别给予ISO(10μmol/L)处理1、6、12、24和48 h,采用real-time PCR法检测细胞miR-21表达水平,采用Western blot法检测细胞p-STAT3和STAT3的蛋白水平,采用ELISA法检测细胞上清中白细胞介素6 (IL-6)的浓度。给予细胞转染含miR-21启动子区萤光素酶报告基因质粒p GL3-21PPR,采用萤光素酶报告基因实验检测条件培养液对miR-21的转录活性的影响。结果:以ISO作用于心脏成纤维细胞产生的培养液上清作为条件培养液,其可使心肌细胞miR-21的表达量随ISO作用于成纤维细胞时间的延长而逐渐增高(P 0.05);该条件培养液可引起心肌细胞miR-21的转录活性显著增加,其中ISO作用24 h和48 h的培养液分别使其转录活性增加94.9%和77.1%(P 0.01);ISO作用成纤维细胞形成的条件培养液中IL-6浓度显著增加,通过旁分泌作用于心肌细胞,引起转录因子STAT3活性增强,促进了miR-21的转录和表达。结论:激动β-AR可介导成纤维细胞合成和表达IL-6,旁分泌作用于心肌细胞,通过IL-6/STAT3途径,上调心脏miR-21表达水平,参与心脏重构。     

人增生前列腺α1-肾上腺素受体亚型分析

采用离体组织收缩功能实验和放射配基结合实验，分析人增生前列腺α１肾上腺素受体（α１ＡＲ）三种亚型的分布及其介导的收缩效应。结果显示：在收缩功能实验中，标本经用氯乙基可乐定（ＣＥＣ）预处理后，去甲肾上腺素（ＮＥ）介导的最大收缩无明显下降，α１ＡＲ亚型选择性拮抗剂，５ＭＵ、ＷＢ４１０１、Ｓｐｉｐｅｒｏｎｅ、ＢＭＹ７３７８抑制ＮＥ介导前列腺收缩的ｐＡ２值与克隆α１ＡＡＲ亚型的ＫＩ值呈高度相关（ｒ＝０．９１）。在放射配基结合实验中，标本经ＣＥＣ预处理后，ＫＤ值没有变化，但最大结合容最（Ｂｍａｘ）由４６１±８８ｆｍｏｌ／ｍｇ蛋白明显下降到２０９±３９ｆｍｏｌ／ｍｇ蛋白（Ｐ＜０．０５）。α１Ａ，α１Ｂ和α１ＤＡＲ三种亚型分别约占３０％，４５％和２５％。结果表明，人增生前列腺组织中同时含有α１ＡＲ的三种亚型，但主要通过α１ＡＡＲ亚型介导前列腺平滑肌收缩。     

α-肾上腺素受体拮抗剂对兔阴茎海绵体收缩效应的影响

本文采用离体组织收缩功能实验，比较了５种α－肾上腺素受体（α－ＡＲ）拮抗剂对去甲肾上腺素（ＮＥ）介导的兔阴茎海绵体收缩效应的影响，结果显示，哌唑嗪的拮抗作用最强，其次为ｔａｍｓｕｌｏｓｉｎ。酚妥拉明，特拉唑嗪和育亨宾无显著拮抗作用。本实验结果为临床选用α－ＡＲ拮抗剂治疗阴茎勃起功能障碍提供了实验依据。     

大鼠α1肾上腺素受体及其亚型影响β肾上腺素受体介…

在大鼠心脏上同时激动α１肾上腺素受体（α１－ＡＲ）与β－肾上腺素受体（β－ＡＲ），较单独激动β－ＡＲ时产生的ｃＡＭＰ明显减少，α１Ａ－ＡＲ亚型抑制，而α１Ｂ－ＡＲ亚型增强β－ＡＲ刺激ｃＡＭＰ生成的作用。但α１－ＡＲ及其亚型激动不影响ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ引起的ｃＡＭＰ生成，亦不影响β－ＡＲ与〔＾１２５Ｉ〕吲哚洛尔的最大结合容量和解离常数。苯福林激动α１－ＡＲ对三磷酸鸟苷使丙肾上腺素与〔＾１２５Ｉ〕ＫＸ     

1-(2,6-二甲氧基)-2-(3,4-二甲基苯乙氨基)丙烷盐酸盐(DDPH)拮抗α1肾上腺素受体的特性

目的　研究DDPH对α1 肾上腺素受体 (α1 AR)及其亚型的拮抗作用。方法　放射配体结合实验和离体血管收缩功能实验。结果　DDPH对12 5I BE2 2 5 4与大鼠脑皮质和脾脏α1 AR结合呈竞争性拮抗作用。pKI 值在两者间无显著性差别 ,Hill系数均接近于 1 0。在分别稳定表达α1A,α1B或α1D AR的克隆HEK2 93细胞中 ,其拮抗的pKI 值α1A和α1D比α1B AR高约 2倍 ,Hill系数均接近于 1 0。并拮抗去甲肾上腺素 (NE)介导大鼠主动脉 ,肾动脉和脾脏收缩的 pA2 值 ,在三者间无显著差别 ,斜率接近 1 0。结论　DDPH对α1 AR有竞争性拮抗作用 ,但其作用对α1 AR亚型无选择性。     

α1A-肾上腺素受体在激动剂作用下向细胞内运动特征

目的：激动剂刺激下受体向细胞内的运动是很多G蛋白偶联受体的特征行为，本研究旨在探讨α1A-肾上腺素受体（α1A-AR）在激动剂苯肾上腺素（PE）作用下的内化运动。方法和结果：利用全内反射显微镜TIR-FM技术及拉曼光谱分析，发现活细胞膜下表面荧光标记的α1A-AR在PE作用下出现内化运动，撤去PE后一部分受体又回复到膜上。     

pREP8和pREP4质粒对HEK293细胞β2-肾上腺素受体的表达及其介导cAMP蓄积的影响

以质粒携带某一亚型受体的cDNA转染细胞株,通过亚细胞克隆得到稳定表达某亚型受体的亚克隆细胞株,是肾上腺素受体(AR)研究中常用的方法.我们最近的研究发现,α1A-、α1B-和α1D-AR全长cDNA分别由pREP8、pREP4和pREP9质粒携带 (pREP8/α1A 、pREP4/α1B、pREP9/α1D),转入人胚肾(HEK293)细胞并稳定表达后,均显著增加原先细胞天然β2-AR的表达量及其介导的cAMP蓄积最大效应.本研究拟排除上述作用是由于携带外源cDNA的质粒本身带来的影响,而非转入α1-AR的影响.     

银杏叶提取物舒张阴茎海绵体的机制

采用离体组织灌流的方法观察银杏叶提取物（ＥＧｂ）对人阴茎海绵体平滑肌的作用,初步探讨其作用机制。材料与方法标本来源于成年健康男性,生前自愿捐献器官者。ＥＧｂ为中科院上海药物研究所陈维洲教授馈赠。左旋硝基精氨酸等购于Ｓｉｇｍａ公司。将海绵体制成８ｍｍ×...     

大鼠左心耳三种亚型α1肾上腺素受体对β肾上腺素受体正性变力效应的不同影响

采用电驱动离体大鼠左心耳收缩功能实验研究三种亚型α₁-肾上腺素受体(AR)激动时对β-AR介导正性变力效应的影响. 结果发现,RS 17053(选择性拮抗α_1A-AR)或WB 4101(选择性拮抗α_1A和α_1D-AR)可使去甲肾上腺素(NE)的累积浓度 收缩效应曲线(CRC)显著左移;在BMY 7378(选择性拮抗α_1D-AR)和RS 17053存在下,NE仅激动α_1B和β-AR,其CRC较单独激动β-AR时显著左移;在WB 4101和去氧肾上腺素(Phe)同时存在下(仅激动α_1B-AR),异丙肾上腺素(Iso)的CRC较对照显著左移;用BMY 7378阻断α_1D-AR后,NE的CRC不发生明显的偏移;用RS 17053和螺哌隆阻断α_1A和α_1B-AR,用Phe仅激动α_1D-AR时,对Iso的CRC也无影响. 结果说明在大鼠左心耳α_1A-AR抑制,α_1B-AR增强,而α_1D-AR则不参与对β-AR介导正性变力效应的调节.