含三七中成药用药规律研究

目的:分析2015年版《中国药典》及《中华人民共和国卫生部药品标准·中药成方制剂》(以下简称《中药成方制剂》)含三七方剂组方规律。方法:对《中国药典》及《中药成方制剂》中含有三七的方剂进行检索,收集资料,利用中医传承辅助平台(V2.5)软件构建含三七方剂数据库,采用频次统计、关联规则等数据挖掘方法,对含三七方剂的功能主治、证候分布、配伍组方规律进行分析,并对高频药对和高频证候进行深度分析。结果:含三七方剂共197首,涉及中药391种,常用药物组合67个,主治疾病14种,主治证候7种,高频药对"三七-当归","三七-红花"及高频证候"气滞血瘀"及"气虚血瘀"的药物组合分析显示三七在不同药对中功效大致相同,针对不同证候治疗作用具有差异。结论:《中国药典》与《中药成方制剂》中含三七方剂多具有活血止痛之功效,三七常与活血药、补益药、理气药同用,其组方规律与特点为临床新药研发提供依据,其针对"气滞血瘀"与"气虚血瘀"的药物组合为研究三七"生打熟补"作用机制提供理论基础。     

三七精准煮散饮片的研制——质量均一性分析

目的:饮片质量均一性是中药临床疗效稳定的基础,利用化学指纹图谱结合DNA分子鉴定技术考察三七精准煮散饮片与市售原饮片质量的均一性。方法:应用第二内转录间隔区(ITS2)序列DNA条形码对三七饮片进行分子鉴定;对比三七市售原饮片及精准煮散饮片的干膏收率;采用HPLC-DAD检测3批三七饮片混合粉碎前后的质量均一性和指纹图谱相似度。结果:三七煮散饮片出膏率显著高于原饮片出膏率;不同批次原饮片间指标成分三七皂苷R_1,人参皂苷Rg_1及Rb_1溶出量有明显的差异性,RSD分别为13.1%,32.7%及24.5%,混合制成煮散饮片后溶出量差异减小,RSD分别为3.6%,2.6%及3.5%;精准煮散饮片提取液中化学成分溶出量较原饮片高。混合粉碎后指纹图谱相似度提高,标定了共有峰14个,峰面积均有提高。结论:三七精准煮散饮片与市售原饮片基本属性相一致,但煮散饮片的浸出、有效成分溶出及质量均一性均有明显提高,提示煮散饮片可提高临床用药的精准性。     

基于UPLC-Q-TOF-MS分析通络清脑注射剂在大鼠体内的代谢产物

目的:研究大鼠尾静脉注射通络清脑注射剂后尿液中的代谢产物,为该制剂的作用机制分析提供参考。方法:大鼠尾静脉注射通络清脑注射剂,收集0~12 h尿液,采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱(UPLC-Q-TOF-MS)分析尿液样品,流动相0.1%甲酸水溶液-乙腈梯度洗脱,流速0.3 m L·min~(-1),电喷雾离子源,正离子模式,扫描范围m/z 100~1 400。结果:检测并鉴定到7个原型成分(黄芩苷,栀子苷,三七皂苷R1,人参皂苷Rg1,Rb1,Rd和Re)及10个可能的代谢产物(其中4个来源于黄芩苷,6个来源于栀子苷)。10个可能的代谢产物分别为葡萄糖基化代谢物(B-M1,G-M2和G-M4),葡萄糖醛酸化代谢物(B-M2),甲基化代谢物(B-M3),水解代谢物(B-M4),去甲基化代谢物(G-M1),脱氢代谢物(G-M3)和羟基化代谢物(G-M5和G-M6),而人参皂苷类成分则暂时未能在尿液中检测到代谢产物。结论:尾静脉注射通络清脑注射剂后,大鼠尿液中能检测到黄芩苷和栀子苷的原型及不同途径的10个代谢产物,而三七总皂苷各成分则只检测到药物原型,暂时未能检测到代谢产物。     

复方三七散外敷防治甘露醇所致静脉炎效果观察

目的:观察复方三七散防治静脉留置针输注甘露醇所致静脉炎的效果。方法:将脑出血、脑梗死或脑炎而使用甘露醇的患者136例随机分为硫酸镁治疗组和复方三七散治疗组。2组在使用静脉留置针输注20%甘露醇治疗时,硫酸镁治疗组穿刺静脉局部给予50%硫酸镁溶液浸湿纱布外敷;复方三七散治疗组给予复方三七散药粉和70%酒精混合的药糊外敷。对2组静脉留置针留置时间进行观察。对已发生静脉炎患者按静脉炎的程度分为Ⅰ级患者和Ⅱ级患者。每级患者又分为硫酸镁治疗组和复方三七散治疗组。每组给予相应的药物进行外敷治疗,以5天(120小时)为期,观察2组效果。结果:2组患者静脉留置针留置时间比较显示酸镁治疗组的留置时间(71.0±18.8)h少于复方三七散治疗组留置时间(98.0±14.3)h(P0.05)。已发生静脉炎的Ⅰ、Ⅱ级患者的治疗效果显示复方三七散治疗组优于硫酸镁治疗组(P0.05)。结论:复方三七散外敷具有防治静脉留置针输注甘露醇时所致的静脉炎的作用,且效果优于硫酸镁湿敷。     

土三七致肝小静脉闭塞症1例诊治报告

<正>肝小静脉闭塞症(Veno-occlusive Disease,VOD)是各种原因引起叶静脉梗阻的一种疾病,以肝大、腹水及水肿为主要症状,与布加综合征常常难以鉴别,其主要病因见于野百合碱中毒、化学药物使用及遗传因素等。VOD患者一旦确诊,治疗效果极不理想。因此,临床上VOD的早期诊断及预防极其重要。现将由土三七导致的VOD 1例诊治报告如下。     

三七通舒胶囊联合甲钴胺治疗糖尿病周围神经病变患者的效果

目的:观察三七通舒胶囊联合甲钴胺治疗糖尿病周围神经病变患者的效果。方法:回顾性分析2019年1月至2020年1月该院收治的93例糖尿病周围神经病变患者的临床资料,按治疗方法不同分为对照组(n=46)和观察组(n=47)。对照组采用甲钴胺治疗,观察组在对照组基础上采用三七通舒胶囊治疗。比较两组疗效,治疗前后正中神经和腓总神经传导速度,血清缺氧诱导因子(HIF-1α)、髓鞘碱性蛋白(MBP)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平,以及不良反应发生率。结果:观察组治疗总有效率为87.23%,高于对照组的67.39%,差异有统计学意义(P<0.05);治疗前,两组正中神经和腓总神经运动神经传导速度(MNCV)和感觉神经传导速度(SNCV),以及血清HIF-1α、MBP和hs-CRP水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05);治疗后,两组正中神经和腓总神经MNCV和SNCV均高于治疗前,且观察组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,两组血清HIF-1α、MBP和hs-CRP水平均低于治疗前,且观察组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:三七通舒胶囊联合甲钴胺治疗糖尿病周围神经病变患者效果显著,能够改善神经传导速度,降低血清HIF-1α、MBP、hs-CRP水平,且未增加不良反应。     

三七总皂苷玉米脂蛋白纳米粒对大鼠脑缺血再灌注损伤的药效学研究

对三七总皂苷（Panax notoginseng saponins,PNS）与卵磷脂、β-谷甾醇、玉米醇溶蛋白共组装制备的三七总皂苷玉米脂蛋白纳米粒（PNS-lipid-zein nanoparticles,PLZ-NPs）进行了体外细胞实验,以及大鼠脑缺血再灌注损伤的药效学研究。采用反溶剂沉淀法制备了PLZ-NPs,运用激光粒度仪和透射电镜显微镜对纳米粒进行表征,MTT法评价了纳米粒的细胞毒性,激光共聚焦和流式细胞术分析了Caco-2细胞对纳米粒的摄取情况。大脑中动脉闭塞（MCAO）法构建了大鼠脑缺血再灌注损伤模型,连续3 d灌胃给药后,取脑组织进行2,3,5-氯化三苯基四氮唑（TTC）染色,并检测脂质过氧化物丙二醛（MDA）、炎症因子IL-1β、TNF-α、凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2的水平。结果显示,PLZ-NPs平均粒径为（116.4 ± 0.81）nm,PDI为0.048,Zeta电位为-（31.5 ± 0.31）mV。MTT实验表明,玉米脂蛋白载体的生物安全性良好,且能显著提高Caco-2细胞对纳米粒的摄取（纳米粒组在4 h时细胞摄取量提高至游离组的1.76倍）。TTC染色中,PNS和PLZ-NPs组的梗死面积比模型组均有减少,另外MDA、IL-1β、TNF-α、Bax的含量明显下降,Bcl-2含量增加,而且PLZ-NPs组对脑缺血再灌注损伤的保护作用显著优于PNS组（P<0.05）。实验结果表明,本实验制备的玉米脂蛋白纳米粒具有良好的稳定性、药物负载能力和生物安全性,能显著提高肠上皮细胞对药物的摄取,有效改善脑缺血再灌注对大鼠造成的损伤。     

三七总皂苷对人乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的影响

目的 探究三七总皂苷对人乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的影响.方法 三七总皂苷作用于人乳腺癌MDA-MB-231细胞作为处理组,同时设置空白对照组;MTT法检测细胞活性变化,光镜观察检测细胞形态学变化,凋亡试剂盒检测细胞凋亡情况,casepase 3试剂盒检测casepase 3的酶活性情况.结果 与空白对照组相比,0.5、1.0和2.0mg/ml三七总皂苷组人乳腺癌MDA-MB-231细胞活性逐渐降低(P<0.05),呈时间和浓度依赖性;光镜观察下1.0、2.0mg/ml三七总皂苷组产生了凋亡小体;荧光观察下1.0、2.0mg/ml三七总皂苷组出现了核固缩现象;与空白对照组相比,0.5、1.0和2.0mg/ml三七总皂苷组人乳腺癌MDA-MB-231细胞casepase3的酶活性明显增加,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 三七总皂苷可降低人乳腺癌MDA-MB-231细胞的活性,具有促凋亡作用.     

中药三七对脑缺血再灌注损伤后神经可塑性的影响

目的 :探讨中药三七对局灶性脑缺血后神经再塑和功能恢复的影响。方法 :5 1只Wistar大鼠分为三七组、对照组和假手术组 ,采用线栓法阻断大脑中动脉制作局灶性脑缺血模型 ,缺血 1h后恢复再灌注 ,同时三七组经腹腔注射中药三七。在术后 6h ,1、3和 7d 4个时间点应用免疫组织化学方法检测 3组缺血灶周围皮质区和海马区神经可塑性分子标志物生长相关蛋白GAP 4 3和微管相关蛋白MAP 2表达的变化 ,并于再灌注后 6h评定肢体功能恢复情况。结果 :缺血后大鼠出现左前肢瘫痪 ,三七组恢复情况优于对照组 ;再灌注后 6h ,1、3和 7d时GAP 4 3表达水平逐渐上升 ,三七组高于对照组 (P <0 .0 5 )。缺血再灌注后MAP 2表达水平降低 ,于再灌注 1、3和 7d上升 ,三七组在相应时间点高于对照组 (P <0 .0 5 ) ,但低于假手术组。结论 :局灶性脑缺血后在缺血周围区神经元出现结构重塑 ,中药三七治疗可加速这一过程并促进功能恢复。     

人参-三七-川芎提取物延缓过氧化氢诱导的内皮细胞衰老中线粒体氧化应激的作用

目的 通过观察人参-三七-川芎提取物（GNC）对过氧化氢（H₂O₂）诱导的人脐静脉内皮细胞（HUVECs）衰老中线粒体氧化应激的影响,探讨GNC对衰老HUVECs的治疗机制。方法 本研究以HUVECs作为研究对象,H₂O₂诱导内皮细胞衰老作为模型,实验分为空白组,H₂O₂组,H₂O₂+DMSO组（DMSO）,白藜芦醇组（Resv）及GNC提取物低（GNC-L）,中（GNC-M）,高（GNC-H）质量浓度组,除空白组,H₂O₂组外,其余各组分别给予DMSO 1 mL·L^-1,Resv 8 μmol·L^-1,GNC 400,300,200 mg·L^-1药物干预,24 h后除空白组外给予300 μmol·L^-1 H₂O₂诱导HUVECs衰老,再给予正常培养基培养24 h。采用衰老特异性β-半乳糖苷酶（SA-β-gal）染色法鉴定细胞衰老程度,流式细胞仪分析细胞周期,采用Mito SOX RED荧光染色法测定细胞内线粒体活性氧（mtROS）水平,以JC-10为荧光探针检测细胞内线粒体膜电位变化,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测含锰超氧化物歧化酶（MnSOD）与磷酸化（p-）p66的蛋白表达。结果 SA-β-gal染色结果显示,与空白组比较,H₂O₂组SA-β-gal染色蓝染细胞显著增多（P<0.01）;与H₂O₂组比较,各浓度组SA-β-gal染色蓝染细胞显著减少（P<0.01）;细胞周期结果显示,与空白组比较,H₂O₂组G₀/G₁期细胞数量比例明显增多（P<0.05）,G₂/M期细胞比例明显减少（P<0.05）;与H₂O₂组比较,GNC各组及Resv组G₀/G₁期细胞数量比例明显减少（P<0.05）,GNC-H组,Resv组在G₂/M期细胞比例明显增加（P<0.05）。线粒体ROS荧光结果显示,与空白组比较,H₂O₂组强度明显减弱（P<0.05）;与H₂O₂组比较,GNC-H,GNC-M组强度明显增高（P<0.05）;线粒体膜电位结果显示,与空白组比较,H₂O₂组荧光强度显著下降（P<0.01）;与H₂O₂组比较,GNC-H,GNC-M,GNC-L组线粒体膜电位荧光强度显著增高（P<0.01）,Resv组明显增高（P<0.05）;Western blot结果显示,与空白组比较,H₂O₂组MnSOD含量明显降低（P<0.05）;与H₂O₂组比较,GNC-H与GNC-M组表达明显增多（P<0.05）;与空白组比较,H₂O₂组p-p66含量显著增高（P<0.01）;与H₂O₂组比较,各用药组表达显著降低（P<0.01）,表明用药后可减轻细胞内线粒体氧化应激反应。结论 中药人参-三七-川芎提取物可以延缓H₂O₂诱导的血管内皮细胞的衰老,药物干预后,细胞线粒体活性氧、线粒体膜电位及相关蛋白MnSOD,p-p66蛋白发生明显改善,氧化应激反应减轻,其机制可能是中药通过抑制线粒体氧化应激反应延缓血管内皮细胞衰老的进程。