基于渗透速率及溶出曲线初步预测国产氯唑沙宗片的生物等效性

目的：从氯唑沙宗原料药的生物药剂学分类系统(BCS)分类出发,结合氯唑沙宗片的渗透速率及溶出曲线,对国产氯唑沙宗片仿制药与参比制剂的生物等效性进行初步预测。方法：采用人工仿生膜测定氯唑沙宗原料药渗透性,结合其在不同介质中的溶解度,对氯唑沙宗进行BCS分类判断。 选择水、pH 1.2盐酸溶液、pH 4.0磷酸盐缓冲液、pH 6.8磷酸盐缓冲液作为溶出介质,分别采用相似因子(f ² )法、AV值法及非模型依赖多变量置信区间法,对参比制剂与4家企业的国产氯唑沙宗片在不同介质中的溶出曲线进行相似性评价。计算仿制制剂与参比制剂在空腹肠及饱腹肠模拟液溶出介质中的渗透速率及总渗透量的90%置信区间,进行生物等效性预测。结果：氯唑沙宗为BCS Ⅱ类,低溶解度高渗透性药物。体外溶出试验显示国产氯唑沙宗片与参比制剂的相似性较低。渗透速率试验显示,在空腹肠模拟液溶出介质中,与参比制剂渗透速率的90%置信区间分别为101.05%~107.12%、 116.57%~120.13%、99.36%~105.72%、130.17%~139.62%之间,其中3家在80%~125%的生物等效接受标准范围内,1家不在范围内。在饱腹肠模拟液溶出介质中,与参比制剂渗透速率的90%置信区间分别为103.62%~115.49%、116.99%~134.85%、131.70%~141.93%、122.37%~127.23%,其中1家在 80%~125%的生物等效接受标准范围内,3家不在范围内。结论：基于溶出曲线结合渗透速率可在一定程度上较好地模拟药物在人体内的吸收转运过程,该联合应用方法可用于国产氯唑沙宗片与参比制剂生物等效性的初步预测。     

缩宫素注射液的有关物质研究

目的:针对缩宫素注射液现行标准中未对注射液中有关物质进行控制的情况,建立了缩宫素注射液有关物质的HPLC测定法,并对2010年国家评价性抽验中178批缩宫素注射液样品进行了测定。方法:采用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);以0.1 mol.L-1磷酸盐缓冲液作为流动相A,以水-乙腈(1∶1)作为流动相B,梯度洗脱,柱温40℃,流速为1.0 mL.min-1,检测波长为220 nm。结果:在本文色谱条件下,主峰和杂质峰能得到良好的分离;缩宫素在浓度0.36～23.04 IU.mL-1范围内峰面积与浓度呈良好线性关系,r=0.9999;平均回收率99.1%(n=9)。178批缩宫素注射液总杂质为25.9%～36.0%,单个最大杂质为6.1%～13.0%。结论:该法专属性强,灵敏、准确,可作为缩宫素注射液的质量控制方法。现行标准不能有效控制药品质量,体现在有关物质偏高。研究表明制剂中的有关物质部分是由原料引入,因此,必须修订并提高原料和制剂的质量标准,增加有关物质检查。建议原料生产企业采用固相合成工艺的缩宫素提高原料质量,加强生产过程中各个环节的质量意识。     

通塞脉微丸干预缺血性脑中风大鼠的脑组织代谢组学研究

目的研究缺血性中风模型大鼠脑组织代谢的变化特点和通塞脉微丸对异常代谢的调节作用,寻找通塞脉微丸治疗缺血性脑中风可能的代谢生物标志物,以探索通塞脉微丸治疗缺血性脑中风的作用机制。方法采用电凝法制造大鼠缺血性中风模型,将大鼠分为模型组、假手术组、通塞脉组和阳性药组,运用气相色谱-质谱(GC-MS)技术,对各组脑组织中内源性代谢物进行测定,采用偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA)对多变量数据进行分析,t检验方法进行显著性统计分析。结果模式识别中模型组大鼠能较好地与其他3组分开。与假手术组大鼠相比,模型组大鼠脑组织中的丙氨酸、丝氨酸、甲硫氨酸、柠檬酸、组氨酸、花生四烯酸(AA)和二十二碳六烯酸(DHA)的含量升高,而核糖、6-磷酸葡萄糖和肌苷的含量下降,提示脑组织中这10种内源性物质为脑缺血的潜在生物标志物。这些内源性物质在通塞脉组大鼠体内得到了不同程度的恢复,而花生四烯酸和二十二碳六烯酸在通塞脉组与模型组大鼠体内的含量有明显差异,说明通塞脉微丸对花生四烯酸和二十二碳六烯酸这两种潜在生物标志物有明显的调节作用。结论通塞脉微丸可以使造模后大鼠的体内代谢物含量有不同程度的恢复,提示其治疗作用可能与相关代谢通路的调节有关。     

木糖醇的小鼠骨髓细胞微核试验

目的 采用小鼠骨髓细胞微核试验,对木糖醇进行体内致突变安全性评价.方法 小鼠骨髓细胞微核试验共设5组,其中受试物3个剂量组(高、中、低剂量分为10、5和2.5g· kg-1体重),阴性对照1组(灭菌注射用水,40mL·kg-1体重)和阳性对照1组(环磷酰胺400mg·kg-1体重),每组每种性别动物5只.给药采用30h给受试物法,即两次给受试物间隔为24h,5组小鼠均采用口服灌胃方式给药,给药量为0.04mL·g-1体重.在第二次给受试物后6h,全部小鼠颈椎脱臼处死,取股骨骨髓制片,固定、Gimesa染色和阅片.结果 受试物3个剂量组的微柱率(以千分率(‰)表示)分别与相应的阴性对照组进行比较,均无明显差异.结论 木糖醇的小鼠骨髓细胞微核试验结果为阴性.     

美洛昔康对大鼠致畸敏感期的毒性试验研究

美洛昔康在受孕大鼠致畸敏感期(受孕后第6～15天)给药,剂量分别为7.0,3.5,1.8 mg/kg.结果未发现美洛昔康对胎鼠有致畸作用,但该药可使胎鼠体重减轻,吸收胎和死胎增多,骨骼发育迟缓,尤以给予高剂量美洛昔康时明显.     

离子色谱法测定注射用门冬氨酸钾镁中无水门冬氨酸钾镁含量

目的：建立测定注射用门冬氨酸钾镁中无水门冬氨酸钾镁含量的方法。方法：采用离子色谱法,色谱柱为CS12A（4 mm ×250 mm）,保护柱为CG12A（4 mm ×50 mm）;电导检测器,阳离子抑制器;流动相为25 mmol· L^-1甲烷磺酸溶液,流量为1 mL· min^-1;柱温30℃。结果：无水门冬氨酸钾在22.08～441.64μg· mL^-1范围内,色谱峰面积与其浓度成良好线性关系（Y＝0.0377X-0.0145,R^2＝1）,回收率为100.1％,RSD为0.7％;无水门冬氨酸镁在24.09～481.84μg· mL^-1范围内,色谱峰面积与其浓度成良好线性关系（Y＝0.0409X-0.0088,R^2＝1）,回收率为100.9％,RSD为0.4％。结论：本方法可简便、快速、准确地对注射用门冬氨酸钾镁中无水门冬氨酸钾镁含量进行测定。     

瑞舒伐他汀钙片体内外一致性评价研究

目的：通过体外溶出试验和体内生物等效性试验,考察瑞舒伐他汀钙仿制制剂与参比制剂的质量与疗效,同时采用GastroPlusTM进行群体药代动力学模拟,评估软件模拟预测的性能可靠性。方法：分别测定不同pH缓冲液（pH 1.0～8.0）中瑞舒伐他汀钙的溶解度;测定仿制制剂与参比制剂在pH 1.0盐酸溶液、pH 4.5醋酸盐缓冲液和pH 6.6枸橼酸盐缓冲液等3种溶出介质中的溶出曲线;采用f2因子法评价溶出曲线相似性。在28名健康成年中国志愿者中进行临床BE试验,评估两制剂的生物等效性。通过GastroPlusTM进行PK建模,在虚拟的28名健康成年中国人中进行群体药代动力学研究,将临床BE试验结果与GastroPlusTM模拟结果比较,验证虚拟生物等效性研究的可行性。结果：溶解度结果显示,瑞舒伐他汀钙属于高溶解性药物。体外溶出结果显示,仿制制剂与参比制剂在pH 1.0介质中,除批号170703的f2因子为49,其他批号的f2因子均＞50,两者基本相似;在pH 4.5介质中f2因子均＜50,溶出曲线不相似;在pH 6.6介质中,两者在15 min几乎完全溶出（> 85％）,溶出曲线相似。临床试验和软件虚拟预测BE结果均显示Cmax和AUC的几何平均比（仿制/参比）的90％ CI在80％～125％的范围内,仿制制剂与参比制剂生物等效。结论：仿制制剂与参比制剂生物等效,软件模拟BE可以用于仿制药一致性评价临床前的初步研究。     

毛细管电泳法分离测定血浆样品中盐酸多奈哌齐对映体

目的分离、测定血浆样品中盐酸多奈哌齐对映体的含量。方法建立高效毛细管电泳法血浆中加入内标L-酒石酸布托菲诺后，碱化并以异丙醇-正己烷(3∶97)提取血浆样品，采用未涂层熔融石英毛细管柱(70 cm×50 μm ID)，以25 mmol·L^-1磷酸-三乙胺(pH 2.5)为运行缓冲液，2.5%磺化β-环糊精为手性添加剂，进样电压为-20 kV，进样时间为15 s，运行电压为-20 kV。对盐酸多奈哌齐对映体进行电泳分离，并进行家兔血浆样品中盐酸多奈哌齐对映体定量分析的方法验证。结果在上述电泳条件下，盐酸多奈哌齐对映体可达基线分离。测得血浆样品中R(-)-多奈哌齐的回归方程为：A_s/A_i=0.024 2+0.289 2C，r=0.999 2，S(+)-多奈哌齐的回归方程为：A_s/A_i=0.010 8+0.273 7C，r=0.999 7，线性范围为0.1～5 mg·L^-1，检测限为0.05 mg·L^-1。结论本法与手性柱HPLC法相比，有高效、快速和经济等优点。     

自发性高血压大鼠血浆代谢组学研究及人参总皂苷作用机制初探

目的:探讨自发性高血压大鼠(SHR)和正常大鼠(WKY)血浆代谢组差异,确证高血压模型,在此基础上探讨人参总皂苷对SHR血压及代谢组的影响。方法:15只12周龄的雄性SHR和15只同龄WKY大鼠经2周适应性饲养后测量大鼠尾动脉收缩压(SBP)、舒张压(DBP),同时收集血浆应用GC/MS测定内源性代谢物,用主成分分析(PCA)和偏最小二乘方判别分析(PLS-DA)分析两组动物的代谢谱及引起高血压的生物标记物。将SHR随机分成3组,人参总皂苷组:100mg.kg.d-1;卡托普利组:100mg.kg.d-1;SHR模型组:等量0.5%CMC-Na及WKY组等量0.5%CMC-Na,连续灌胃4周,SHR模型组和人参总皂苷组继续给药至8周后,测量大鼠尾动脉SBP、DBP及血浆内源性代谢物。结果:与WKY组相比,SHR组的SBP、DBP及血浆代谢组均有显著差异,SHR组内源性代谢物中十六酸、吡喃半乳糖、十八碳二烯酸、羟基丁酸等化合物的浓度显著增高。给药后,卡托普利组能显著降低SBP(P<0.01)和SBP(P<0.01);尽管人参总皂苷组对血压的作用不如卡托普利组明显,但前者的代谢谱较后者向正常组代谢谱靠近的趋势更加明显。结论:SHR组和WKY组血浆代谢组有显著差异,这将为进一步探讨高血压病相关的致病基因提供物质基础。长期应用人参治疗,能改善血浆代谢组,使机体的功能趋于正常。