一例碳青霉烯类抗菌药物耐药的肺炎克雷伯菌耐药机制研究

目的研究1株碳青霉烯类抗菌药物耐药的肺炎克雷伯菌A1500的耐药机制。方法采用浓度梯度法（E-test）测定细菌的抗菌药物最低抑菌浓度（MIC）,采用接合实验、聚合酶链反应（PCR）、质粒抽提、探针杂交印迹试验（Southern blot）、等电聚焦电泳及耐药基因克隆测序分析细菌的耐药机制。结果接合实验、质粒电泳和Southern blot结果显示耐药基因位于一个50 kb的可转移质粒上;等电聚焦电泳显示3条β-内酰胺酶条带,等电点（PI）分别为9.0、6.7（KPC-2）、5.4。PCR产物克隆分析比对为blaKPC-2型。结论碳青霉烯类抗菌药物耐药的肺炎克雷伯菌A1500携带由质粒介导的KPC-2酶。     

革兰阴性杆菌中VEB-1型超广谱β-内酰胺酶的分布情况调查

目的　分析上海第二医科大学附属瑞金医院 (以下简称瑞金医院 )和上海交通大学附属第六人民医院(简称市六医院 )分离的 340株革兰阴性杆菌中VEB 1型超广谱 β 内酰胺酶 (ESBL)的分布 ,并分析瑞金医院灼伤科患者标本中分离的产VEB 1型ESBL铜绿假单胞菌是否有同源性。方法　用聚合酶链反应 (PCR)扩增细菌的veb 1基因 ,用PCR RFLP检测并分型整合子 ,以ERIC2为引物 ,采用随机引物扩增多态性DNA分型法(RAPD)对瑞金医院灼伤科分离到的 16株产VEB 1型ESBL的铜绿假单胞菌进行同源性分析。结果　市六医院分离的菌株中未检测到veb 1基因 ,瑞金医院仅在灼伤科来源的铜绿假单胞菌中检出VEB 1型ESBL ,且这些菌株用RAPD分析具有同源性。结论　瑞金医院灼伤科流行携带veb 1型ESBL基因的铜绿假单胞菌。     

多重PCR检测MRSA的SCCmec基因分型

目的了解我院MRSA的流行状况。方法收集2005年1—6月65株社区感染MRSA及60株医院感染MRSA，应用多重PCR对MRSA染色体Dlec基因盒（staphylococcal cassette chromosomeSCCmec）分型及杀白细胞毒素（PVI。）基因检测，应用K—B纸片法进行药敏分析。结果125株MRSA的mecA基因阳性，其中SCCmecII型1株，SCCmecⅢ型120株，SCCmecⅣ型3株，未分型1株；未发现携带PVL基因的MRSA。携带SCCmecII型、SCCmecⅢ型的菌株均为多重耐药株，而携带SCCmecⅣ型的菌株除对8内酰胺类药物耐药外，对其他类别的抗菌药敏感。结论本院分离的MRSA以SCCmecⅢ型为主，发现SCCmecIV型CA-MRSA，但不携带PVL基因；携带SCCmecⅡ、SCCmecⅢ的临床分离株耐药严重。     

血流感染病原菌AmpC酶及相关耐药机制的初步研究

目的了解血流感染病原菌中产AmpCβ-内酰胺酶（简称AmpC酶）菌株的分布情况和临床病例特点,并对相关基因ampC和ampD进行初步研究。方法收集2006年1月-2008年9月血流感染革兰阴性菌181株,分别采用头孢西丁初筛试验和三维试验筛选产AmpC酶菌株和高产AmpC酶菌株;对初筛试验阳性相关临床病例进行回顾性分析。同时对初筛试验阳性菌株ampC、ampD基因PCR扩增、测序和比对,Rep—PCR分析ampC阳性菌株基因型。结果181株病原菌中头孢西丁初筛试验法检出产AmpC酶39株,概率为21．5％（39／181）;三维试验法检出高产AmpC酶菌株的概率为43．6％（17／39）。PCR结果显示ampC和ampD基因阳性率分别为41％（16／39）和56．4％（22／39）。对16株ampC阳性菌进行基因测序,与GenBaak相应ampC核酸序列比对发现同源性达98％～100％;2株阴沟肠杆菌ampD基因的测序发现在ampD基因羧基端存在可疑的突变位点。结论本研究相关败血症患者血流耐药病原菌感染主要源自院内感染。在产AmpC酶的血流病原菌中,ampC基因突变比较少见,而阴沟肠杆菌ampD基因突变发生率比较高,且ampD蛋白羧基末端氨基酸的缺失或替代可能与AmpC酶去阻遏表达高度相关。     

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌外膜蛋白与耐药机制的研究进展

细菌的膜孔蛋白及其形成的孔道是细菌与外界交流的主要途径,也是抗生素透过细菌细胞膜的重要通道。细菌膜孔蛋白合成降低或膜孔蛋白缺失可阻碍抗生素进入细菌,从而引起细菌对抗生素耐药。在细菌的耐药机制研究方面,膜孔蛋白的作用日益受到关注,文章从大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌入手,对其膜孔蛋白的特点、构成、合成调控机制及其与细菌耐药的关系进行综述。     

用头孢西丁三相试验检测质粒AmpCs

为了解大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产质粒介导的Ⅰ型β-内酰胺酶(AmpC)的情况,利用头孢西丁三相试验的直接法和间接法,对55株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌进行检测,结果有2株阳性,3株可疑.     

对肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶的研究进展

碳青霉烯类抗菌药物在临床上可用于多重耐药的细菌感染，随着临床上碳青霉烯类抗菌药物的广泛使用，产生了对亚胺培南或美罗培南耐药的肠杆菌。至今为止对碳青霉烯类耐药的肠杆菌还比较少见，     

颅脑创伤121例耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的耐药性分析

目的 了解颅脑创伤患者耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的耐药情况,并提出对策.方法 采用纸片扩散法检测痰培养为MRSA的121例颅脑创伤病例,并对其耐药性进行统计分析.结果 121例MRSA对青霉素G、红霉素、环丙沙星、阿米卡星及头孢类抗生素耐药率达到了92.3%～100%,对替考拉宁及万古霉素完全敏感,对利福平、奈替米星、磷霉素的耐药率均较低,但对于磺胺异恶唑的耐药率从2001年的10%骤升到了2005年的95.2%.结论 MRSA的耐药性应引起高度重视,预防及合理使用抗生素是减少医院感染的重要手段.     

用斑点ELISA检测副溶血弧菌的耐热溶血毒(TDH)和TDH类似毒(TRH)

本文用斑点ELISA和溶血试验分别检测26株副溶血弧菌（VibrioParahaemolyticus，VP）的耐热溶血毒（TDH）和TDH类似溶血毒（TRH），TDH的阳性检出率分别为80．8％（21／26）和73．1％（19／26）TRH的阳性检出率分别为19．2％（5／26）和7．7％（2／26）。经卡方检验，两试验在统计学上无显著性差异（P＞0．05）。实验结果表明，斑点ELISA比溶血试验稳定，影响因素少。