体外培养羊骨髓间充质干细胞增殖及表型特征

目的：关于鼠、兔等小动物骨髓间充质干细胞的研究较多，而对大动物骨髓间充质干细胞研究较少。实验拟了解体外培养的羊骨髓间充质干细胞的生物学特性，以便于组织工程研究使用。 方法：实验于2006-01/2007-01在天津市天津医院完成。①实验材料：天津医院动物实验中心提供的健康中国山羊，10月龄，实验过程中对动物处置符合动物伦理学标准。②实验方法：抽取羊骨髓5 mL，梯度离心制备单个有核细胞，并接种于无菌的50 mL塑料培养瓶中，培养体系为含体积分数为0.10 FBS的DMEM。利用多孔培养板对培养的骨髓间充质干细胞进行细胞生长曲线测定。选用抗CD44单克隆抗体，应用免疫组化学方法对培养的骨髓间充质干细胞进行表型鉴定。 结果：①培养的骨髓间充质干细胞黏附贴壁、呈纺锤状，并有多个突起。②一般细胞接种密度下的骨髓间充质干细胞，三代细胞生长周期基本一致，均为接种培养后前二三天，生长较缓慢，为生长迟滞期。3 d后细胞生长加速，有一快速增长过程，达到对数生长期，于七八天时，细胞数达最高值，为生长平台期，其后生长速度减缓。③免疫细胞化学染色后显示所培养细胞的细胞膜抗原CD44有阳性表达。 结论：培养的骨髓间充质干细胞具有较强的遗传稳定性和增殖能力，培养的细胞不是骨髓造血干/祖细胞，而是一群均一的间充质干细胞，具有独特的增殖和表型特征。     

磷酸钙骨水泥改性研究进展

磷酸钙骨水泥（calcium phosphate cement，CPC），又称为羟基磷灰石骨水泥（hydroxy apatite cement，HAC），是由Brown和Chow首先研制出来的一种自固型非陶瓷羟基磷灰石类人工骨材料。因其具有良好的生物相容性和骨传导性、生物安全性、能任意塑形、在固化过程中的等温性，CPC作为一种新型的骨组织修复和替代材料，受到了国内外众多学者的广泛关注，已成为临床组织修复领域研究和应用的热点之一。然而由于CPC脆性大、抗水溶性（血溶性）差、     

紫花烧伤膏与碘伏联用治疗烧伤创面35例体会

我院应用山东华润制药有限公司生产的紫花烧伤膏与碘伏治疗烧伤创面35例，临床效果较好，报告如下。互临床资料互．l一般资料本组35例，男29例，女6例。年龄1．5～50岁。沸水烫伤5例，火焰烧伤4例，瓦斯燃烧伤26例。面颈部烧伤27例，双上肢及双手烧伤26例，双下肢及双足烧伤8例，躯干及会阴部烧伤16例。烧伤面积按新九分法计算，深度按国度四分法，面积最小5％，最大47％，平均285％。除个别区域为且度烧伤外，大部分为I度～深刀度烧伤创面。其中26例为集体烧伤来院，全组患者来院后并发有休克14例，呼吸道烧伤3例，11例患者为复合性损伤。…     

前路腰椎椎体间融合术的生物力学研究

前路腰椎椎体间融合术(ALIF)具有诸多优势,临床应用越来越多.关于ALIF的生物力学稳定性研究国外开展较多,但结果并不完全一致.应根据不同需要合理选择ALIF试验模型,人类尸体,动物尸体、有限元模型、其他替代模型等各有优缺点.单纯ALIF术后椎间获得即刻稳定性是根据"撑开一压缩"原理.前路椎间植入融合器后能够增加除了后伸动作以外的其他各方向稳定性,目前大多数关于ALIF的生物力学测试均针对即刻稳定性,然而融合器植入椎间隙后纤维环弹性逐渐丧失及融合器陷入终板内均会使椎间稳定性逐渐降低,因此椎间融合稳定性还取决于界面骨长入速度等术后因素.影响ALIF稳定性的因素有预负荷、辅助内固定、相邻椎体骨质量等.     

老年人急性阑尾炎106例临床分析

老年人急性阑尾炎属特殊类型阑尾炎，诊断和治疗均较困难，常易误诊和漏诊。随着社会老龄人口增多，老年人急性阑尾炎的发病率也相应提高。我院2005年5月-2009年5月共收治60岁以上的老年人急性阑尾炎106例，现将诊治情况报告如下。     

侧脑室穿刺置管引流结合腰大池引流治疗重型脑室出血22例临床分析

脑室出血无论是原发性还是继发性，均为出血性脑血管疾病之重症类型，其病情凶险，死亡率高达40%-83.3%，单纯采用内科保守治疗，开颅血肿清除等措施，疗效均差。我们采用侧脑室穿刺置管尿激酶溶解引流并结合腰大池引流，取得了较满意疗效，现将结果报告如下。     

可体内、外示踪的BMP2真核表达载体的构建和表达

目的 拟构建双顺反子增强型绿色荧光蛋白标记的人骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein-2,BMP2)真核表达载体,为其在真核细胞体内外示踪定位打下基础.方法 以重组质粒pcDNA3.1/CT-hBMP2为模板,结合已设计好的特异性引物,采用PCR方法获得BMP2片段,将其分别与克隆载体pTA2-T-easy和真核表达载体pSELECT-GFPzeo-MCS连接,转化入感受态DH5α细胞中,通过筛选得到含有绿色荧光蛋白的重组表达载体pSELECT-GFPzeo-hBMP2,并进行测序鉴定.将质粒转染CHO细胞后Western Blot检测BMP2蛋白表达,用RT-PCR检测BMP2mRNA表达.结果 琼脂糖电泳显示PCR产物为一条长约1216 bp的带,重组表达载体pSELECT-GFP zeo-hBMP2经双酶切可得到约1216 bp的片段,测序证实与Genebank中hBMP2序列完全相符,重组表达载体脂质体法转染CHO细胞48～72 h后荧光显微镜下证实转染成功,经RT-PCR证实CHO细胞中存在BMP2基因表达,采用免疫荧光化学方法证实载体中CHO细胞表达BMP2蛋白.经Western Blotting鉴定重组蛋白为分泌蛋白,相对分子质量在17×103左右.结论 成功构建可体内外示踪增强含双顺反子绿色荧光蛋白人BMP2真核表达载体.     

伴或不伴黄韧带骨化的胸椎和胸腰段椎间盘突出症的术式选择

目的 探讨伴或不伴黄韧带骨化的胸椎和胸腰段椎间盘突出症的术式选择.方法 2004年6月至2009年12月,手术治疗伴或不伴黄韧带骨化的胸椎和胸腰段椎间盘突出症患者31例,男22例,女9例;年龄24～71岁,平均54岁;病变节段T4～L2.根据Anand和Regan临床分类:2度1例,3a度2例,3b度3例,4度6例,5度19例;Frankel分级:B级2例,C级6例,D级11例,E级12例.18例不伴黄韧带骨化者行前路手术,采用椎体后缘切除、椎体后侧开槽或椎体次全切除减压并植骨内固定.13例伴有明显黄韧带骨化者行后路半关节突和全椎板切除减压术,未切除前侧突出的椎间盘.结果 前路术后发生硬膜囊撕裂1例,神经根袖损伤1例,肋间神经痛3例,肺不张1例,取髂骨区麻木2例.后路术后发生椎管内血肿1例,脑脊液漏2例,切口感染1例,肺部感染1例.随访6～48个月,平均18个月.末次随访时Frankel分级:C级3例,D级7例,E级21例;Anand和Regan分类:1度2例,2度1例,3a度1例,4度2例,5度10例,15例无明显症状.X线片示内固定均无失败,植骨融合良好.结论 胸椎和胸腰段椎间盘突出以脊髓前侧压迫为主者可选择前路椎体后侧开槽或椎体次全切除减压植骨融合术,伴黄韧带骨化导致脊髓前后侧压迫者可行后路半关节突和全椎板切除减压术.     

可动式椎间盘镜下单侧开窗双侧减压治疗腰椎管狭窄症

目的 探讨可动式椎间盘镜下单侧开窗双侧减压治疗腰椎管狭窄症的疗效.方法 2007年6月至2009年6月采用可动式椎间盘镜下单侧开窗双侧减压治疗退行性腰椎管狭窄症32例,男14例,女18例;年龄56～74岁,平均65岁.均为双侧椎管狭窄合并椎问盘突出,有间歇性跛行和坐骨神经痛等症状,双下肢症状以一侧为重.在症状严重侧行棘突旁2 cm纵切口,在可动式椎间盘镜下行单侧椎板间隙开窗,神经根通道减压、突出髓核摘除;在棘突和椎板腹侧分别向上、下方用棉片压低保护硬膜囊,潜行咬除棘突基底部,在棘突基底、椎板腹侧与硬膜囊背侧之间形成工作空间,经此空间潜行咬除对侧椎板下缘和增厚的黄韧带,直至显露松解对侧神经根起始部.结果 术中无神经损伤发生,无中途转开放手术病例.发生硬膜囊撕裂2例,用棉片将其压低后完成手术.手术时间5～100min,平均70min;术中出血量50～350ml,平均150ml.术后CT示减压充分,中央椎管和对侧椎管扩大,对侧椎板、关节突和椎旁肌等结构保留完好.全部病例随访6～24个月,平均12个月.根据Macnab标准,优21例,良11例.结论 可动式椎间盘镜下单侧开窗双侧减压治疗腰椎管狭窄症操作简便,能保留对侧结构,达到双侧减压目的 ,早期随访结果优良.对双侧严重骨性狭窄者应慎用.