大麻素受体-1对内毒素诱导的大鼠小肠肌电活动的影响

目的研究不同浓度脂多糖（lipopolysaccharides,LPS）对大鼠小肠肌电活动的影响及大麻素1受体（CB1受体）激动剂HU210和拮抗剂AM251对这些影响的干预作用,以探讨LPS影响肠道运动的可能的机制。方法将48只SD雄性大鼠分为3大组8小组（每小组6只）：LPS处理组（包括LPS低浓度组、LPS高浓度组）,CB1受体激动剂干预组（包括HU210组、LPS低浓度＋HU210组、LPS高浓度＋HU210组）,CB1受体拮抗剂干预组（包括AM251组、LPS低浓度＋AM251组、LPS高浓度＋AM251组）。分别经腹腔注射各种相应药物,用Power Lab八道生理记录仪记录大鼠小肠平滑肌峰电活动的频率及振幅等,观察腹腔注射LPS、大麻素受体激动剂及拮抗剂后这些指标的变化。结果腹腔注射不同浓度LPS后,大鼠小肠平滑肌峰电频率和振幅均有明显降低（P〈0.05）;注射HU210后,大鼠小肠平滑肌峰电频率和幅度也均明显降低（P〈0.05）;而注射AM251后,大鼠小肠平滑肌峰电频率及幅度明显增加（P〈0.05）;腹腔注射不同浓度LPS和HU210,分别与LPS单独注射的比较,小肠平滑肌峰电频率更为降低,注射后30-60 min之间降低最为显著（P〈0.05）;腹腔注射不同浓度LPS和AM251,分别与LPS单独注射比较,肠平滑肌峰电频率升高,AM251逆转LPS的效应主要在注射后的30 min内,尤其对放电频率的逆转作用明显（P〈0.05）。结论腹腔注射LPS有降低大鼠小肠平滑肌电峰电频率和振幅的作用,且有浓度依赖性;CB1受体激动剂和拮抗剂对LPS诱导的大鼠小肠平滑肌峰电活动变化均有不同程度的影响,揭示CB1受体存在于大鼠体内,并参与内毒素血症时肠道运动紊乱的调节。     

褪黑素对胃肠运动的影响

目的: 研究不同浓度褪黑素(melatonin)对小鼠胃肠运动的影响。方法: 雄性C57BL小鼠腹腔内注射1 mg/kg、5 mg/kg、50 mg/kg和75 mg/kg浓度的褪黑素,分别在15 min和45 min后,检测结肠排出玻璃珠的变化;同时,在注射褪黑素75 mg/kg前腹腔内注射褪黑素拮抗剂luzindole(5 mg/kg),研究其对褪黑素作用的影响。另外,通过全胃肠道运输实验(伊文斯蓝排出实验)检测腹腔内注射不同浓度褪黑素(1 mg/kg、5 mg/kg、25 mg/kg和75 mg/kg)时胃肠运动的变化。结果: 腹腔内注射褪黑素后15 min,在低剂量组(1 mg/kg)结肠排出玻璃珠的时间缩短,与对照组比较差异显著(P<0.01);在高剂量组(75 mg/kg)结肠排出玻璃珠的时间明显延长(P<0.01),该抑制作用可被褪黑素拮抗剂luzindole有效拮抗(P<0.01)。腹腔内注射褪黑素后45 min,在5 mg/kg剂量时,结肠排出玻璃珠的时间明显缩短(P<0.01);而在1 mg/kg和50 mg/kg时,与对照组比较并无显著差异;在高剂量组(75 mg/kg)结果同上,即结肠排出玻璃珠的时间延长(P<0.05)。在胃肠道运输实验中,腹腔内注射褪黑素1 mg/kg和5 mg/kg后,运输时间缩短,排出伊文斯蓝粪粒所需时间减少,与对照组比较差异显著(均P<0.01);大剂量褪黑素(75 mg/kg)也明显延长胃肠道运输时间(P<0.01)。结论: 低剂量褪黑素促进胃肠运动,高剂量褪黑素降低胃肠运动,后者作用可被褪黑素受体拮抗剂luzindole阻断。     

急性胰腺炎大鼠血清、腹水对离体胰腺腺泡细胞的损伤

目的：观察急性胰腺炎（AP）大鼠血清、腹水对大鼠离体胰腺腺泡细胞的损伤作用，探讨AP细胞钙超载的可能机制。方法：采用大鼠胰胆管逆行注射3％去氧胆酸钠复制AP模型，分别在1、5、10h取动物的血清、腹水备用。胶原酶法分离、培养正常大鼠胰腺腺泡细胞，给予1、5、10hAP大鼠血清、腹水刺激；采用MTT法检测胰腺腺泡细胞的存活率；用荧光染料Fura-2／AM负载后，给予1、5、10hAP大鼠血清、腹水刺激，采用钙离子成像系统，观察单个胰腺腺泡细胞游离钙水平的变化。结果：AP模型复制后1h，血清淀粉酶活性即明显升高，同时胰腺组织破坏严重；经AP腹水、血清刺激的胰腺腺泡细胞，其存活率降低；胰腺腺泡细胞内游离钙浓度明显升高（P〈0．05），且随AP病程时间延长，AP腹水、血清的刺激作用越明显。结论：在AP大鼠血清、腹水刺激下，胰腺腺泡细胞存活率下降，同时有细胞钙超载发生。     

维拉帕米减轻脂多糖导致的大鼠胰腺腺泡细胞损伤机制的研究

目的：研究维拉帕米（Vera）对脂多糖（LPS）导致的大鼠胰腺腺泡细胞损伤的拮抗作用及其机制。 方法：胶原酶法分离大鼠胰腺腺泡细胞，预先经Vera (50 mg/L、100 mg/L) 处理15min后, 再经LPS (10 mg/L)或正常培养液处理，在不同的时点（30 min、1 h、4 h、10 h）采集上清液,检测其中丙二醛含量、超氧化物歧化酶、磷脂酶A2的活性；采用MTT 法检测胰腺腺泡细胞的活性；部分胰腺腺泡细胞经Fluo-3/AM负载后，于相应的时点采用灌流方式给予药物或刺激剂，激光共聚焦显微镜观察单个胰腺腺泡细胞［Ca2+］i的变化。 结果: Vera可减轻LPS所致的细胞损伤（P<0.05）；抑制LPS诱发的胰腺腺泡细胞 ［Ca2+］i 升高（P<0.05）；降低细胞培养上清液中丙二醛含量和磷脂酶A2的活性、增强超氧化物歧化酶的活性。 结论：Vera可能通过抑制钙超载、增强抗氧化能力以及减少胰酶活化的机制，减少LPS所致的胰腺腺泡细胞损伤，从而发挥对胰腺腺泡细胞的保护作用。     

急性胰腺炎大鼠胰、肝组织IκBα的表达及中药新清胰汤的影响

目的:研究核因子κB抑制蛋白（IκBα）在急性胰腺炎（AP）大鼠胰腺和肝脏组织中的表达及中药新清胰汤Ⅱ号［Qing Yi Tang Ⅱ(QYT)］的影响。 方法:70只SD大鼠随机被分为正常对照组（n=10）、AP＋QYT组（n=30）、AP＋生理盐水（NS）组（n=30）。经胰胆管逆行注射4%去氧胆酸钠复制AP模型；给予QYT（AP+QYT组）或NS（AP+NS组）灌胃，每5 h重复1次。造模后1 h、4 h和10 h分批处死动物。荧光定量RT-PCR、Western blotting分别检测胰腺和肝脏组织IκBα在mRNA水平和蛋白水平的表达，后者包括磷酸化形式和非磷酸化形式；ELISA法检测血清白三烯C4（LTC4）浓度；HE染色观察胰腺和肺组织病理学变化。 结果:AP大鼠肝脏组织中IκBα mRNA 表达在各个时点均显著高于正常对照组（P<0.01，P<0.05）;AP+QYT组显著低于AP+NS组(P<0.05)。与IκBα的mRNA表达相一致，肝脏和胰腺组织中IκBα蛋白表达（无论其磷酸化形式和非磷酸化形式）在AP大鼠均高于正常对照组（P<0.05）；AP+NS组IκBα蛋白磷酸化形式表达在观测时间内增高；QYT可抑制该形式的表达（P<0.05）。AP大鼠血清LTC4浓度明显高于正常对照组，呈时间依赖性;AP+QYT组血清LTC4浓度明显低于AP组（P<0.05）。 病理学检查见AP大鼠胰腺组织水肿、出血、肺间质水肿、出血，炎症细胞大量浸润，随AP的病程而加重；QYT治疗组的病理变化较轻。 结论: QYT可通过抑制 IκBα的磷酸化等机制减轻AP时局部和全身的炎症反应。     

伴侣因子60在实验性急性胰腺炎肝胰组织中的表达及意义

目的：探讨不同严重程度的实验性急性胰腺炎（AP）时动物肝脏和胰腺组织中伴侣因子60（Cpn60）的表达特点及可能的意义。方法：用雨蛙肽腹腔注射复制急性轻型胰腺炎（MAP）小鼠模型；用去氧胆酸钠逆胰胆管注射复制急性重型胰腺炎（SAP）大鼠模型；分别设各自正常对照组（control）和假手术对照组(sham组)。造模后1、5、10 h分批处死动物，取肝、胰组织。病理切片观测胰腺组织病变情况；免疫共沉淀（IP）及Western blotting技术确定肝、胰组织Cpn60蛋白条带位置及表达的改变。结果：MAP及SAP组的胰腺组织分别出现水肿性和出血坏死性改变。MAP组及其sham组1 h Cpn60表达量明显低于正常小鼠，而5 h的表达量显著升高。SAP组和相应的sham组1 h Cpn60表达量明显增高，随后降低，从1 h到10 h SAP组的下降幅度明显大于相应sham组。结果还发现，小鼠、大鼠胰腺和肝脏组织Cpn60蛋白有两条带，在各组及其不同时段，该蛋白条带的变化各有不同。结论：大鼠、小鼠胰腺和肝脏组织中Cpn60蛋白表达呈双带，且在AP时变化不一，提示AP时不仅有Cpn60蛋白量的表达异常，还可能存在质的异常，这些异常与AP发生、发展的关系有待研究。     

健胃灵作用机理的实验研究

本实验对健胃灵的作用机理进行了实验研究。结果表明。健胃灵对胃肠运动具有双向调节作用,即当胃肠处于麻痹状态时,该药可明显促其平滑肌峰电活动的恢复;而当胃肠国新斯的明诱发痉孪时,健胃灵则有解痉作用。此外,该药对胰液、胰酶的分泌及小肠吸收功能均有一定促进作用。本实验还将健胃灵的作用与目前疗效肯定的胃动力及止吐药吗丁啉的作用进行了一定的实验对比观察。     

大鼠实验性肠梗阻时消化器官相关研究

采用多器官功能指标同步观察的方法,观察大鼠实验性肠梗阻时其胃、肠、胆、胰等器官功能变化:消化液分泌减少、消化酶活性降低、小肠吸收功能障碍等。说明病理状况下,消化系统各器官在功能上互相关联、互相影响,提示肠梗阻时所造成的消化吸收功能紊乱可能是引起其临床典型症状的主要原因之一,这为临床上全面考虑有关疾患的处理提供了一定的实验证据。     

丹参对缺血—再灌流犬肝过氧化脂质的影响

本文报道丹参对犬肝热缺血45min,再灌流30min肝过氧化脂质(lipid peroxides,LPO)的影响。结果表明,丹参组过氧化脂质明显低于对照组。提示丹参具有较好的抗氧化作用,是一种有效的肝热缺血保护药物。     

刺梨汁对小鼠耐缺氧、耐疲劳的影响

本文初步探讨了刺梨汁对纯系BALB/C小鼠耐缺氧、耐疲劳作用的影响。结果表明,服用刺梨汁的小鼠,在缺氧环境中的生活时间较长,机体耗氧率较低,在水中泳动的时间也明显长于对照组。提示刺梨汁在一定程度上有提高机体耐缺氧、耐疲劳能力的作用。通过与所设的V-C对照组比较,认为刺梨汁的这些作用并非是所富含的V-C的功劳,而可能是刺梨汁中多种营养成分共同作用的结果。