香烟烟雾提取物对转化生长因子β1刺激的人肺成纤维细胞增殖及分泌过氧化氢的影响

目的 观察香烟烟雾提取物(CSE)对转化生长因子β1(TGF-β1)刺激的人肺成纤维细胞(HLF)增殖及分泌过氧化氢(H2O2)的影响,探讨CSE可能参与肺纤维化发病的机制.方法 将体外分离培养的HLF细胞分为对照组和TGF-β1(5 ng/mL)刺激组,用不同浓度的CSE(0%、2.5%、5%、10%)进行干预.应用Brdu ELISA法检测细胞增殖;荧光分光光度法测定细胞分泌的H2O2;免疫荧光标记分泌的H2O2和细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达.结果 TGF-β1刺激组细胞经免疫荧光标记显示α-SMA阳性表达,说明HLF在TGF-β1,刺激下转化为肌成纤维细胞(MF).TGF-β1,刺激组中,与0%浓度CSE比较,2.5%、5%浓度的CSE干预可以显著促进细胞增殖(P<0.01或0.05),10%浓度的CSE干预抑制细胞增殖(P<0.01).对照组中,与0%浓度CSE比较,2.5%、5%、10%浓度的CSE均使细胞增殖显著减弱(P<0.01或P<0.05),并呈剂量依赖性.TGF-β1刺激HLF细胞能产生一定量的H2O2,CSE干预后分泌产生的H2O2明显增加(P<0.01),经NADPH氧化酶抑制剂二苯基碘(DPI)预处理后检测不到H2O2.免疫荧光标记显示分泌的H2O2来源于α-SMA阳性表达的MF细胞.结论 低浓度的CSE能够促进TGF-β1刺激HLF细胞转化的MF细胞增殖,并显著增加MF细胞向细胞外分泌H2O2,提示CSE可能通过氧化应激参与肺纤维化的发生、发展.     

经鼻持续气道正压通气治疗睡眠呼吸暂停综合征最佳压力研究

目的通过多导睡眠图(PSG)及临床指标预测阻塞型睡眠呼吸暂停综合征患者(OSAS)的经鼻持续气道正压通气(nCPAP)最佳压力(Pmin)。方法采用RHK-5500型多导睡眠呼吸监测系统连接BiPAP系统测22例OSAS患者nCPAP的Pmin,推导其与呼吸紊乱指数(RDI)、体重指数(BMI)及颈围(NECK)等指标的回归方程,用回归方程预测的Pmin治疗20例OSAS患者,同时多导睡眠图监测治疗效果。结果RDI、LSaQ2指标与Pmin呈直线正相关。结论临床上可根据患者的RDI、LSaO2预测nCPAP治疗的最佳压力。     

特发性肺纤维化预后相关因素的回顾性研究

目的探讨基线临床指标和肺生理状况对评估特发性肺纤维化(IPF)预后的意义。方法以2002年1月1日至2010年7月31日在南京大学医学院附属鼓楼医院确诊的84例IPF患者为研究对象,评估年龄、性别、吸烟史、糖皮质激素治疗、确诊前病程、体重指数、杵状指、氧合指数(PaO2/FiO2)、C反应蛋白(CRP)、血沉(ESR)、血清乳酸脱氢酶(LDH)、血白蛋白(ALB)等基线临床和肺功能指标对IPF患者预后的影响。采用单因素Cox比例风险回归模型评估各指标对患者死亡风险度的影响,采用Kaplan-Meier检验比较各组间生存率。结果 IPF患者确诊后中位生存期为34.7个月。氧合指数以及用力肺活量(FVC)、肺活量(VC)、肺总量(TLC)、一氧化碳弥散量(DLCO)的实测值占预计值百分比(%pred)均能影响IPF患者的死亡风险(HR值0.940～0.994,P均<0.01)。上述各指标的组间生存率比较均有统计学差异(Log-rank值5.288-23.405,P均<0.05)。此外,血清LDH升高组与正常组的组间生存率亦有显著差异(Log-rank值6.092,P=0.014)。结论基线氧合指数和肺功能各指标(FVC%pred、VC%pred、TLC%pred、DLCO%pred)可能对IPF患者的预后有指示作用。血清LDH升高与否亦可能与IPF生存有关联。     

阻塞型睡眠呼吸暂停低通气综合征患者日间嗜睡、TNF－α水平及微觉醒的关系研究

目的探讨阻塞型睡眠呼吸暂停低通气综合征（OSAHS）患者日间嗜睡、TNF—α水平及微觉醒的关系。方法选取多导睡眠图证实为OSAHS的男性患者40例（OSAHS组）,另选择经多导睡眠图检查无OSAHS的健康者15例作为对照组。测定两组受检者血清中TNF-α水平,以Epworth嗜睡量表进行问卷调查并判断嗜睡评分。结果OSAHS组血清TNF-α水平[（18．42±6．23）ng／L]较对照组[（9．75±3．12）ng/L]明显升高（P〈0．01）,两组的嗜睡评分、微觉醒指数比较差异有统计学意义。OSAHS组血清TNF-α水平与微觉醒指数、嗜睡评分呈正相关（r值分别为0．373、0．461,P〈0．01）,嗜睡评分与呼吸暂停低通气指数、微觉醒指数呈正相关（r值分别为0．443、0．751,P〈0．01）。结论OSAHS患者嗜睡评分、TNF-α、微觉醒指数升高。OSAHS相关的微觉醒对日间嗜睡的发生起了重要作用,TNF-α水平异常可能是造成睡眠呼吸紊乱的丰耍原因方一．     

囊素五肽对人肺成纤维细胞细胞外基质及转化生长因子β1／Smad信号通路的影响

目的观察囊素五肽（BP5）对转化生长因子β1（TGF-1）刺激的人肺成纤维细胞分泌的细胞外基质以及对转化生长一β1／Smad信号通路的影响,探讨囊素五肽抗肺纤维化的机制。方法HLF细胞分为阴性对照组、TGF- β1 刺激组、TGF-β1＋BP5药物干预组（三组均用TGF-β1刺激后分别使用不同浓度BP52．5、5及10μg／mL进行干预）。免疫荧光法测定细胞α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达,Westernblot方法检测collagen—Ⅰ、p-Smad2／3、p-Smad3和Smad7蛋白的表达。结果TGF—β1刺激细胞经免疫荧光标记显示α-SMA阳性表达,说明人肺成纤维细胞在TGF-β1刺激下转化为肌成纤维细胞（MF）,TGF-β1刺激同时加BP5不同药物浓度组中,10μg／mL的BP5药物浓度能显著减少细胞增殖转化。经TGF-β1刺激后,人肺成纤维细胞collagen—Ⅰ[（1．402±0．158）比（0．605±0．367）]、p-Smad2／3[（1．457±0．111）比（0．815±0．039）]、p-Smad3[（1．320±O．147）比（0．623±O．128）]蛋白表达较刺激前表达明显增多（P〈0．01）,Smad7表达较对照组降低[（0．613±0．107）比（0．865±0．063）,P〈0．05）];与TGF-β1处理组相比,BP5可抑制由TGF-β1刺激人肺成纤维细胞引起的collagen—Ⅰ蛋白[（0．718±0．049）比（1．402±0．t58）]、p-Smad2／3[（0．696±0．031）比（1．457±0．111）]p-Smad3[（0．766±0．006）比（1．320±0．147）]表达上调（P均〈0．01）,而Smad7的蛋白表达明显增加[（1．237±0．173）比（0．614±0．107）,P〈0．05]。结论BP5可能通过抑制TGF—β1／Smads信号通路激活,下调TGF-β1刺激下人肺成纤维细胞的collagen-Ⅰ及d—SMA蛋白的表达,提示BP5可能对肺纤维化具有一定的干预作用。     

以双侧纵隔旁网格样影为表现的成人先天性肺囊性腺瘤样畸形一例

先天性囊性腺瘤样畸形(congenital cystic adenomatoid malformation,CCAM)是一种罕见的先天性肺发育不良疾病,世界首次报道是在1949年由Ch’in和Tang根据尸检结果提出。患者大多数为胎儿或儿童,成人较为罕见,多数成人病例均有误诊经历。本文报道我院近期收治的1例经病理证实的成人病例,因其影像学与既往描述的病例不同,故报道     

姜黄素对肺纤维化大鼠肺成纤维细胞凋亡的诱导作用

目的 探讨姜黄素诱导大鼠肺成纤维细胞的细胞凋亡作用及其相关的分子机制.方法 20只雄性6周龄SD大鼠采用随机数字表法分为生理盐水组和博来霉素组,在博来霉素组大鼠的气管内注入博来霉素制作肺纤维化模型,生理盐水组大鼠注入等渗生理盐水作为对照.于实验第28天处死大鼠,留取肺组织进行病理学检查和肺成纤维细胞分离、原代培养及传代.将体外培养的生理盐水组大鼠肺成纤维细胞(NLF)和博来霉素组大鼠肺成纤维细胞(MLF)分别用不同浓度(5、10、20和40 μmol/L)的姜黄素孵育,原位缺口末端标记(TUNEL)法鉴别凋亡细胞,流式细胞仪测定凋亡相关基因半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)3、Caspase-8蛋白的表达,Envision免疫组织化学二步法检测凋亡中相关基因Caspase-9蛋白表达的变化.结果 MLF在分别用5、10、20和40 μmol/L姜黄素作用12 h后,细胞凋亡指数分别为(30.17±0.53)%、(37.20±0.25)%、(45.12±0.31)%和(51.90±0.27)%,明显高于未用姜黄素孵育的阴性对照组的(4.59±0.19)%,差异有统计学意义(F=2943.2,P<0.01);Caspase-3蛋白表达阳性率分别为(53.1±0.7)%、(60.5±0.6)%、(69.1±0.9)%和(74.9±0.7)%,明显高于阴性对照组的(5.5±0.8)%,差异有统计学意义(F=3380.3,P<0.01);Caspase-8蛋白表达阳性率分别为(37.2±0.5)%、(46.8±0.4)%、(56.5±0.3)%和(67.3±0.3)%,明显高于阴性对照组的(4.6±0.6)%,差异有统计学意义(F=5193.4,P<0.01);Caspase-9蛋白表达阳性率分别为(39.38±0.88)%、(47.51±0.24)%、(57.75±0.63)%和(68.36±0.29)%,明显高于阴性对照组的(4.92±0.34)%,差异有统计学意义(F=2186.7,P<0.01).NLF在姜黄素作用12 h后细胞凋亡指数和Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9蛋白表达阳性率与阴性对照组比较差异均无统计学意义(F值分别为0.975、1.521、1.527和0.935,均P>0.05).结论 姜黄素可诱导肺纤维化大鼠肺成纤维细胞的细胞凋亡,其机制可能与激活Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9蛋白有关.     

马内菲青霉病的诊断和治疗

马内菲青霉病(penicilliosis marneffei,PSM)是由马内菲青霉菌(Penicillium marneffei,PM,曾译为马尔尼菲青霉菌)引起的一种少见的深部真菌感染性疾病.PM是目前所证实的300多种青霉菌中惟一能使人类致病的青霉菌.     

结缔组织病相关性间质性肺炎与特发性间质性肺炎的鉴别

结缔组织病(connective tissue diseases,CTD)或称胶原血管病是一组以机体各个部位结缔组织成分损害为共同特征的自身免疫性疾病[1].许多结缔组织病如系统性红斑狼疮(SLE)、类风湿性关节炎(RA)、系统性硬化病(SSc)、多发性肌炎和皮肌炎(PM/DM)、干燥综合征、混合性CTD以及强直性脊柱炎等均可伴发间质性肺疾病,特别是间质性肺炎.     

外科肺活检不是间质性肺疾病诊断的必要手段

间质性肺疾病(interstitial lung disease,ILD)也称为弥漫性实质性肺疾病(DPLD),是指一组不同类型的、非特异性的、侵犯肺泡壁及肺泡周围组织、胸部X线显示两肺弥漫性浸润的疾病的总称.本病有近200种,大多数病因不明,发病机制不清,多呈慢性发病过程,其临床、影像学和肺功能等具有某些共性,临床确诊较为困难.