淀粉样前体蛋白在快速老化痴呆小鼠P8海马中表达的免疫组化学研究

目的:观察淀粉样前体蛋白(APP)在快速老化痴呆小鼠P8(SAMP8)海马中的表达,探讨其与SAMP8小鼠增龄性变化的关系。方法:选用1、4、8、12月龄的SAMP8,用同龄正常老化小鼠R1(SAMR1)作为对照组,每组各8只,用免疫组化方法检测海马区APP的表达。结果:APP主要在SAM鼠海马神经元胞浆内表达,海马不同区域均有表达。定量结果显示对照组SAMR1小鼠海马各区域APP的表达随月龄增加无显著性改变(P>0.05);而SAMP8小鼠APP的表达则随月龄增加而增加,8月龄和12月龄SAMP8小鼠CA1区的表达量显著高于1月龄组(P<0.05),也分别显著高于同月龄对照组(P<0.05),CA3区APP的改变稍晚于CA1区,与同品系1月龄小鼠及同龄对照组比较,12月龄时显示有显著性增加(P<0.05)。结论:SAMP8小鼠海马APP的表达随月龄增加而增加,提示APP表达量的增加与SAMP8小鼠的快速老化相关。     

用医院局域网系统与移动短信平台发布检验危急值

临床实验室检测的自动化水平和特殊检验结果回报的速度,往往制约着临床医生为患者提供医疗服务的效率。检验危急值的传统报告方式是出现危急值结果时,立即用电话或者传真通知主管医生或护士,但若遇到电话线路繁忙、故障的情况下,或主管医生救治其他患者,无暇及时获知检验危急值     

流感病毒H1N1感染后宿主细胞MTH1基因表达的研究

目的 观察H1N1型流感病毒诱导的MDCK细胞抗氧化相关修复基因MTH1表达量的变化.方法 MDCK细胞培养后,H1N1型流感病毒感染0、1、3、6、12、24、48 h,在各时间点经RT-PCR反应检测细胞内MTH1基因的相对表达量.结果 甲型H1N1流感病毒感染后0、6、12 h,MTH1基因的表达量与正常对照组差异无统计学意义;感染后1、3 h MTH1基因的表达量显著高于正常对照组;感染后24、48 h表达量显著低于正常对照组.结论 H1N1流感病毒感染细胞的MTH1基因表达的增加,可能增加细胞对DNA氧化损伤的修复能力,在流感发生和防御机制中起到作用.     

血清Cys C与常规肾功能评价指标在肾脏功能评估中的对比研究

目的通过对比血清胱抑素C（cystatinC,CysC）与尿素氮（BUN）、血肌酐（Cre）在肾功能检测方面的差异,探讨在广州地区患者用CysC评估肾小球滤过率（GRF）的可行性。方法检测患者Cre、BUN、CysC,根据MDRD方程计算GFR;分析CysC、BUN、Cre的检测灵敏度;观察CysC和BUN分别与GFR的相关性;各指标在肾功能损害不同程度时含量的差异。结果CysC、BUN和Cre的灵敏度分别为85.7%、54.8%、38.1%。CysC和BUN与GFR的相关系数分别为-0.692、-0.580。CysC在肾功能损害不同程度时含量差异显著。结论CysC是反映肾功能损害的早期指标,并且可用以对肾功能进行初步分期。     

8-氧鸟嘌呤脱氧核苷在快速老化小鼠SAMP8海马中表达的增龄性变化研究

目的观察8-氧鸟嘌呤脱氧核苷（8-oxo-7,8-dihydroguanine,8-oxo-dG）在快速老化小鼠SAMP8海马不同区域的表达,探讨其变化与SAMP8增龄的关系。方法选用1、4、8、12月龄快速老化小鼠SAMP8（每组各6只）,对照组为同龄抗快速老化小鼠SAMR1（每组各6只）,用免疫组化法检测海马不同区域内8-oxo—dG的表达水平。结果8-oxo-dG在海马不同区域均有表达,且主要在海马神经细胞胞核内表达。对照组SAMR1小鼠海马各区域8-oxo-dG的吸光度定量结果显示各月龄组间无统计学差异（P〉0．05）;1、4月龄组SAMP8小鼠海马各区域8-oxo-dG的吸光度定量结果与同龄匹配的SAMR1小鼠间无统计学差异（P〉0．05）;8、12月龄组SAMP8小鼠海马各区域8-oxo-dG的吸光度定量结果分别显著高于1月龄和4月龄组（P〈0．05）,也分别显著高于同龄SAMP1对照组（P〈0．05）。结论8-oxo-dG在SAMP8快速老化小鼠海马中的水平随增龄而显著增高。     

Logistic回归和ROC曲线综合评价CEA、NSE和CYFRA21-1对肺癌的诊断价值

目的应用Logistic回归和ROC曲线探讨血清癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)、神经元特异性烯醇化酶(neuron-specificenolase,NSE)和细胞角蛋白19片段(cytokeratin 19 fragment,CYFRA21-1)在肺癌诊断中的应用。结论采用电化学发光免疫分析仪(E170)检测不同病理类型肺癌组、肺良性疾病组以及健康人血清CEA、NSE和CYFRA21-1的水平,通过Logistic回归建立回归模型,用ROC曲线分析三指标对肺癌诊断的意义。结果肺癌组CEA、NSE和CYFRA21-1的水平显著高于肺良性疾病和健康人组(P<0.01)。腺癌组血清CEA水平最高,NSE在小细胞肺癌中灵敏度最高(81.6%),取特异性90%时,CYFRA21-1对肺癌的诊断灵敏度最高(59.5%)。建立回归模型Y=1/[1+EXP(5.830-0.249X1-0.198X2-0.643X3)],新变量Y的灵敏度、特异性和准确性率分别为80.9%,91.3%和84.6%。结论血清CEA、NSE和CYFRA21-1对肺癌的诊断具有较高的价值,综合运用Logistic回归和ROC曲线可以提高其肺癌诊断价值。     

MEF2A第11号外显子四个特殊变异位点的生物学活性研究

目的建立MEF2A蛋白细胞学定位和转录激活活性的体外检测体系,探讨MEF2A第11号外显子四个特殊变异位点的生物学意义。方法构建含绿色荧光蛋白（green fluorescent protein, GFP）报告基因真核表达载体的MEF2A野生型融合表达质粒pEGFP-MEF2A和变异型融合表达质粒pEGFP-MEF2A-Mut;通过脂质体介导的方法将以上质粒转染到Hela和293T细胞,用荧光显微镜检测绿色荧光蛋白的定位表达情况。构建含HRC基因启动子/增强子序列的萤火虫荧光素酶报告基因表达质粒pGL3-HRC enhancer,将该质粒与野生型MEF2A cDNA表达质粒pCDNA-MEFcDNA,或变异型MEF2A cDNA表达质粒pCDNA-MEFcDNA-Mut,以及海肾荧光素酶质粒pRL-TK,用脂质体转染法共转染于293T细胞,Western blot检测MEF2A蛋白的表达,双荧光素酶报告基因检测系统测定荧光素酶报告基因的表达。结果本研究建立的细胞学定位和转录激活活性检测体系均可有效检测MEF2A蛋白的生物学活性;与野生型MEF2A蛋白相比,四种MEF2A特殊变异蛋白的细胞学定位和转录激活活性均无显著性差异。结论本研究发现的MEF2A基因第11号外显子四个含特殊变异位点的MEF2A变异蛋白不会影响其细胞学定位和转录激活的生物学活性。     

阿魏酸对NMDA诱导的体外培养神经细胞损伤的保护作用

目的应用培养的胎鼠皮层神经细胞观察阿魏酸对N-甲基-D-天门冬氨酸(30μmol／L)诱导的皮层神经元损伤的保护作用；方法取17-18d胎龄大鼠皮层神经元进行分离培养。通过光镜观察细胞形态变化并测定乳酸脱氢酶(LDH)的漏出量来观察阿魏酸的保护作用；结果阿魏酸可以使细胞损伤减轻，使LDH在培养液中漏出量显著降低，并呈剂量依赖性；结论阿魏酸对NMDA损伤的神经元有保护作用。     

甲型H1N1流感病毒致宿主细胞氧化与凋亡之间的关系研究

目的:观察甲型H1N1流感病毒诱导的犬肺(MDCK)细胞氧化与凋亡之间的关系.方法:MDCK细胞培养后,甲型H1N1流感病毒感染Oh、1h、3h、6h、12h、24h、48h,在各时间点进行检测:采用流式细胞仪Annexin V-FITC/PI双染料法检测细胞的凋亡率;丙二醛(MDA)法观察膜的氧化损伤程度.结果:(1)甲型H1N1流感病毒感染后0、1、3、6h组细胞凋亡率与正常对照组无显著性差异(P>0.05),感染后12、24、48h组的凋亡率显著高于正常对照组(P<0.01);(2)实验各组MDA含量随着感染时间的延长呈下降趋势,0、1、3、6、 12h时MDA含量显著高于正常对照组(P<0.01),而24、48h时与正常对照组无显著性差异(P>0.05):(3)MDA含量与凋亡率呈高度的负相关,回归分析进一步证明二者间的相关关系.结论:甲型H1N1流感病毒感染对细胞造成的氧化损伤是极早期事件,可能是细胞凋亡的重要凶素.     

快速老化小鼠SAMP8海马组织中基因表达谱的研究

目的观察快速老化小鼠P8（SAMP8）与同龄正常老化小鼠R1（SAMR1）海马组织中基因表达谱的差异。方法选用1、4、6、8、12月龄的SAMP8小鼠,用SAMR1作为对照组,每组各9只,快速处死后取海马组织提取总RNA, 用纯化后的总RNA合成cDNA并标记荧光染料,与32k小鼠寡核苷酸微阵列芯片杂交,用共聚焦扫描仪LuxScanTM 10KA及LuxScan 3.0软件进行图像采集与数据处理,用SAM软件分析差异表达的基因,用MAS系统对差异基因进行通路（pathway）分析。结果正常老化小鼠SAMR1各月龄间表达谱差异无显著性,快速老化小鼠SAMP8各月龄间差异显著,两种品系小鼠的比较结果显示1月龄、12月龄基因表达差异最为显著,6月龄无显著差异。Pathway分析结果显示MAPK信号通路的基因表达差异最为显著。结论SAMP8小鼠与SAMR1小鼠海马的基因表达存在明显的差异,以MAPK信号通路的基因表达差异最为显著。