MTH1基因表达的半定量RT-PCR检测方法的建立

目的建立一个检测培养MDCK细胞内MutT同源蛋白1（MTH1）基因表达的半定量RT-PCR体系。方法细胞培养后提取总RNA,经优化RT-PCR反应检测细胞内MTH1基因的表达量。条带经ScionImmage软件分析并与内参基因GAPDH相比,对体系的准确性、重复性和灵敏度进行分析,然后运用本体系检测流感病毒感染后MDCK细胞内MTH1的表达。结果扩增产物经测序分析证实与GenBank中该细胞的MTH1基因序列一致;灵敏度检测发现最低可从50ng总RNA中检出目的基因的表达;重复性测定发现,MDCK细胞MTH1与GAPDH灰度值比值的均值为（2.02±0.09,n=10）,CV值为4.31%。结论本方法的准确性、重复性和灵敏度均较好,可用于半定量检测培养细胞尤其是MDCK细胞内MTH1 mRNA表达量。     

凝血功能试验的全程质量控制

目的探讨室内、室间质控对日常标本的质量控制作用及存在的问题,提出解决问题的办法。方法 1.凝血试验室内质控采用双测试、室间质控与全球质控每一样本测定三次,结果取平均值;2.分析日常标本结果,根据临床预诊、凝血试验结果组合模式对可疑结果复查。结果 1.室内质控两次结果接近并在2SD内表示在控,室间质控（全国质控、全球质控）成绩优良。2.日常标本结果：大部分结果可以重复,极少部分结果差异较大。结论凝血功能试验结果大部分是可信的,极少数异常结果可以通过临床预诊的提示、结果组合模式、发现剔除不可信结果,及时复检得出正确的报告。     

重氮法与钒酸盐氧化法测定总胆红素的方法学比较

目的分析重氮法与钒酸盐氧化法测定血清总胆红素结果的相关性,并对两法进行偏倚评估,建立仪器间的校正方法。方法依据美国国家临床实验室标准委员会（NCCLS）EP9．A文件方案,每天随机抽取8份血清标本,分别用重氮法与钒酸盐氧化法进行总胆红素测定,共测定5d。对检验结果进行离散点检查,计算线性方程和相关系数并进行偏倚估计。结果以重氮法（X）为参比方法,对钒酸盐氧化法（Y）进行评估,两者测定总胆红素的回归方程为Y=1．1588X-2．4616,相关系数R2=0．998。总胆红素浓度为34．2、171μmol／L、342μmol／L时,钒酸盐氧化法的相对偏倚分别为8．72％、14．42％、15．12％。结论两种方法测定血清总胆红素具有良好的相关性,其比例误差是0．1588,恒定误差是．2．4616μmol／L。其相对预期偏倚随总胆红素浓度增高而增高。     

推行信息化危急值快速回报，保障患者安全

目的利用网络信道和短信信道在检验科建立危急值快速报告系统,保障患者安全。方法利用医院信息系统和检验科的实验室信息系统以及中国移动和中国联通的无线短信平台,构建相应的程序系统。结果实验室信息系统自动判断符合规则定义的危急值,然后通过网络信道和短信信道,会将相应的信息直接发送到医生工作站或者医生的手机。结论这两种信息数据报告系统的互补,克服了电话报告的多种缺点,更加方便、快捷,更好地保障了患者安全。     

建立动态信息监管系统以缩短检测结果回报时间

目的建立检验路径信息监管机制,加强标本管理,缩短检测结果的回报时间（TAT）。方法建立TAT信息采集及流程监管系统,与医院信息系统（HIS）、实验室信息系统（LIS）连接,设立流程监控点,并按规则进行信息校验。对超时未进入下一环节的标本,系统自动提示相应工作站进行及时处理。结果TAT信息监管系统对检验标本进行全程动态监管,可有效解决检验结果回报延迟、标本遗失等问题。结论检验全程的信息化动态监管是缩短TAT的有力措施,能够提高实验室服务效率。     

MTH2蛋白与8-氧鸟嘌呤脱氧核苷在阿尔茨海默病患者海马组织中的表达变化

目的:观察8-氧鸟嘌呤脱氧核苷三磷酸酶同源蛋白2(MTH2)及8-氧鸟嘌呤脱氧核苷(8-oxodG)在阿尔茨海默病(AD)患者海马组织标本中的表达变化,探讨在AD患者海马中二者表达的相关性.方法:选用临床及病理均诊断为AD的尸检海马组织石蜡切片作为实验组,年龄匹配且临床及病理诊断均排除AD的尸检海马组织石蜡切片作为对照组,每组各3例,用免疫组化的方法分别检测人脑海马中8-oxo-dG的含量及MTH2蛋白的表达.结果:免疫组化定量结果显示,在人脑海马组织CAl及CA3区.AD患者8-oxo-dC的表达显著高于年龄匹配对照组,而AD患者MTH2的表达显著低于年龄匹配的对照组.结论:在人脑海马组织中,DNA氧化产物8-oxo-dc含量在AD患者比年龄匹配对照组有显著提高,抗氧化修复蛋白MTH2的表达量却显著降低,提示人脑海马组织中MTH2蛋白表达量的减少及8-oxo-dG含量的增加与AD的发病过程相关.     

广州地区大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌CTX-M型产超广谱β-内酰胺酶基因分型的研究

目的 对肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌(ECO)CTX-M型产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌株进行耐药基因分型,从而调查广州地区目前临床分离菌对抗菌药物的耐药性.方法 收集广州地区9所医院临床分离所获产ESBLs肺炎克雷伯菌(KPN)和ECO CTX-M型菌株,应用纸片扩散筛选法和纸片扩散确证法对菌株进行确认,然后用PCR方法对ESBLs进行基因分型.结果 92株产ESBLs ECO,对氨苄西林、哌拉西林和头孢呋辛均高度耐药,耐药率分别为97.5%、89.5%和89.5%;42株产ESBLs KPN对氨苄西林(100.0%)和哌拉西林(100.0%)也呈高度耐药;PCR及测序结果显示,CTX-M-1群阳性株包括ECO 7株、KPN 9株,阳性率分别为7.6%和21.4%,基因型分布在ECO为CTX-M-3、CTX-M-15和CTX-M-55型,而在KPN为CTX-M-3和CTX-M-15型.结论 广州地区9所医院临床分离的134株产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌,对青霉素类和头孢菌素类抗菌药物的耐药率均达到很高水平,并且在广州地区首次分离获得CTX-M-55型耐药菌株.     

Logistic回归和ROC曲线综合评价CEA、NSE和CYFRA21-1对肺癌的诊断价值

目的应用Logistic回归和ROC曲线探讨血清癌胚抗原（carcinoembryonic antigen,CEA）、神经元特异性烯醇化酶（neuron-specificenolase,NSE）和细胞角蛋白19片段（cytokeratin 19 fragment,CYFRA21-1）在肺癌诊断中的应用。结论采用电化学发光免疫分析仪（E170）检测不同病理类型肺癌组、肺良性疾病组以及健康人血清CEA、NSE和CYFRA21-1的水平,通过Logistic回归建立回归模型,用ROC曲线分析三指标对肺癌诊断的意义。结果肺癌组CEA、NSE和CYFRA21-1的水平显著高于肺良性疾病和健康人组（P〈0.01）。腺癌组血清CEA水平最高,NSE在小细胞肺癌中灵敏度最高（81.6%）,取特异性90%时,CYFRA21-1对肺癌的诊断灵敏度最高（59.5%）。建立回归模型Y=1/[1＋EXP（5.830-0.249X1-0.198X2-0.643X3）],新变量Y的灵敏度、特异性和准确性率分别为80.9%,91.3%和84.6%。结论血清CEA、NSE和CYFRA21-1对肺癌的诊断具有较高的价值,综合运用Logistic回归和ROC曲线可以提高其肺癌诊断价值。     

血清胱抑素C测定在监测万古霉素致早期肾损害中的意义

目的探讨血清胱抑素C（CysC）测定在监测万古霉素致早期肾损害中的意义。方法既往无肾脏疾病、在广州医学院第一附属医院接受万古霉素治疗的患者60例,检测患者万古霉素血药浓度的同时检测CysC、血尿素氮（BUN）、血肌酐（Cre）,分析其与血药浓度的相关性。结果 60例患者中CysC、BUN、Cre升高率分别为63.3%、47.5%和0;CysC与BUN或Cre对万古霉素所致肾损伤检测的阳性率差异有统计学意义（P〈0.05）;万古霉素浓度与CysC、BUN、Cre分别呈中度、低度相关以及不相关;万古霉素血药浓度〈15mg/L与〉15mg/L的患者,其CysC水平差异有统计学意义。结论 CysC是一项优于BUN和Cre的用于监测万古霉素所致早期肾损害的良好指标。