奥氮平诱导性肥胖大鼠血清和纹状体TNF—α表达变化

目的观察奥氮平诱导性肥胖大鼠血清和大脑纹状体肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量的影响。方法40只SD雄性大鼠随机分为对照组和奥氮平组,各20只,前者采用普通饲料喂养,后者在普通饲粮喂养基础上灌胃奥氮平（1．2mg·kg^-1）4周建立奥氮平诱导肥胖大鼠。采用酶联免疫测定法测定血清中TNF-α的含量,生化比色法测定血清葡萄糖（FBS）含量,对脑组织采用HE染色观察形态学变化,采用免疫组织化学方法观察两组大鼠脑组织中TNF-α的表达。结果与对照组比较,奥氮平组大鼠的体重、血糖、血脂和血清TNF-α水平和纹状体TNF-α蛋白表达均有不同程度的升高,差异有统计学意义（P〈0．01）。结论奥氮平可以导致大鼠体重增加,糖脂代谢紊乱,血清及纹状体TNF-α升高,通过调节TNF-α异常变化可能改善奥氮平诱导肥胖大鼠中枢摄食活动。     

运动干预通过减缓纹状体多巴胺丢失改善帕金森病模型大鼠行为功能的研究

目的:探讨跑台运动干预对帕金森病(Parkinson’s disease,PD)模型大鼠行为功能、纹状体多巴胺(dopamine,DA)含量的影响。方法:健康雄性SD大鼠,随机分为假手术安静组(Control组)、假手术运动组(Control+Ex组)、6-OHDA安静组(PD组)、6-OHDA运动组(PD+Ex组)。依据实验设计要求,PD和PD+Ex组右脑内侧前脑束(MFB)注射6-羟基多巴胺(6-OHDA)建立偏侧PD大鼠模型,假手术组于相同位点注射等量生理盐水。在造模后的第7天颈部皮下注射阿朴吗啡(APO)进行旋转行为测试,评价PD模型的可靠性,不符合PD模型标准的大鼠剔除。运动组术后1周开始进行跑台训练,运动方案为11 m/min,30 min/day,5 days/week,共4周。采用旷场试验评价PD模型大鼠的自主活动能力;微透析-高效液相色谱电化学联用技术检测纹状体DA浓度;免疫组织化学检测纹状体酪氨酸羟化酶(TH)阳性纤维的表达。结果:PD和PD+Ex组移动距离较Control组显著降低(P<0.01);PD+Ex组第3、4周移动距离较PD组显著增加(P<0.01)。PD和PD+Ex组纹状体DA含量较Control组显著降低(P<0.01);但PD+Ex组第3、4周纹状体DA浓度较PD组显著升高(P<0.01)。结论:PD模型大鼠总移动距离与纹状体DA浓度之间存在高度正相关,且二者均随6-OHDA药物及运动干预持续时间延长出现"时序性"变化特征。运动干预通过减缓纹状体DA丢失改善PD模型大鼠自主行为功能,推测其机制可能与运动的神经保护作用减轻了6-OHDA神经毒素对DA能神经元的毒性损伤、促进其存活有关。     

百可利对6-羟多巴胺不同注射位点帕金森病模型大鼠的治疗作用

目的观察百可利对6-羟多巴胺(6-OHDA)内侧前脑束(MFB)和纹状体尾壳核(CPu)两个不同注射位点帕金森病(PD)模型大鼠的治疗作用,两个注射位点模型分别记为:MFB-M,CPu-M。方法运用6-OHDA两点注射法,损毁大鼠左侧中脑多巴胺能神经元,制备PD模型。记录大鼠后肢肌电(EMG)信号频率观察肌肉震颤;测定大鼠自主活动;电化学法检测纹状体内多巴胺(DA)及其代谢产物含量;免疫组化法检测大鼠脑内酪氨酸羟化酶(TH)、OX-42表达;观察神经元超微结构变化。结果给药3周后,两个注射位点的模型组行为改变趋势一致,百可利在两个注射位点的模型动物上药效表现不同,在CPu-M组可明显提高PD大鼠自主活动数(P<0.05)。EMG信号分析显示,在MFB-M组,给予百可利,肌电频率降低55%;在CPu-M组,给予百可利,肌电频率降低60%。EMG时效研究表明,在CPu-M组,百可利药效持续420 min以上。纹状体递质水平显示,两个注射位点的模型组DA递质水平差异很大,在CPu-M组,百可利能够明显升高DA水平(P<0.05)。两个注射位点的模型组免疫组织化学结果趋势一致,在CPu-M组,百可利有更明显神经元保护作用(P<0.05),在MFB-M组,百可利抑制小胶质细胞过度激活作用更强(P<0.01)。结论不同注射位点制备的PD模型能够反映不同时期PD的病理变化,百可利可通过抑制炎性介质生成和释放、保护残存神经元、恢复神经元功能等机制改善PD不同发病时期模型动物的行为学症状。     

糖尿病性非酮症性偏侧舞蹈症一例报道

舞蹈病由锥体外系病变引起，表现为肢体或头面部不自主、不规则的舞蹈样动作。病灶位于对侧锥体外系，包括尾状核、壳核、苍白球、黑质、丘脑底核等。病因较为复杂，临床常见于脑血管病、感染、遗传性疾病、代谢性疾病、药物损害以及神经系统退行性疾病等。糖尿病并发偏侧舞蹈症临床少见，容易误诊，现对作者医院神经内科住院的1例糖尿病性非酮症性偏侧舞蹈症患者进行报道。     

大鼠纹状体主神经元和中间神经元电学特性的研究

目的:观察大鼠纹状体主神经元、快速放电中间神经元及低阈值放电中间神经元的电学特性。方法:应用脑片膜片钳全细胞记录技术,在大鼠纹状体脑片标本上,监测及观察纹状体内神经元的被动和主动电学特性以及动作电位的发放特征。结果:纹状体主神经元静息膜电位处于轻度超极化状态,具有内向整流特性,并且在触发第一个动作电位之前有一个相对缓慢的去极化过程;纹状体快速放电中间神经元的放电频率很高,其动作电位具有较大幅度的后超极化,去极化电流可以诱导该神经元产生快速放电并伴随阈下膜电位震荡;纹状体低阈值放电中间神经元具有较大的输入阻抗和绝对值较小的静息膜电位,这类神经元具有低阈值放电的典型电学特性。结论:大鼠纹状体主神经元和中间神经元的被动和主动电学特性存在明显差异,这可以作为区分不同类型神经元的依据。     

纹状体神经细胞分型及其功能构建

根据基底神经节和丘脑的解剖结构及功能，他们被分为感觉运动区、辅助运动区、运动前区、联合边缘区。既构成皮质—基底神经节—丘脑—皮质环路，又存在发自皮质不同区域，影响此环路的神经亚环路。纹状体是基底神经节中接收传入信息的主要核团，新近研究表明，他不仅参与随意运动的执行，调节运动各参数，而且在运动可塑性方面也发挥特殊作用。山西大学体育学院运动人体科学实验室前期工作表明，新纹状体腹外侧区神经元在运动疲劳产生的中枢机制中也发挥一定的作用。     

小鼠纹状体多巴胺水平的节律性变化

目的：研究小鼠纹状体多巴胺等神经递质是否具有节律性变化，为进一步研究黑质多巴胺能神经元的功能提供实验依据。方法：实验于2004—04／08在北京老年病医疗研究中心神经生物学实验室进行。取60只C57BL／6J小鼠，在12h光照：12h黑暗条件下饲养两周，两周后随机分为6组，于24h内分6个时间点(9：00，13：00，15：00，21：00，1：00，5：00)分离小鼠的纹状体，用高氯酸提取纹状体中的多巴胺、3，4-双羟苯乙酸、5-羟色胺，其含量用反相高压液相色谱分离-电化学检测技术检测；纹状体中的蛋白含量用Lowry法检测，用作内部对照。多巴胺、3，4-双羟苯乙酸、5-羟色胺的含量用实测含量／蛋白含量(μg／g)表示。实验数据用均值&;#177;标准误来表示。结果：60只小鼠全部进入结果分析。①纹状体多巴胺水平：在24h内有波动，其中低谷处于1：00[（125．59&;#177;5．29)μg／g]，与9：00，21：00相比有显著差异[(151．34&;#177;3．35)，(147．68&;#177;2．5)μg／g，P&;lt;0．05]，波峰处于9：00。②3，4-双羟苯乙酸水平：在24h内也有波动，其低谷同样位于1：00[(6.59&;#177;0.32)μg／g]，与9：00相比有显著差异[(9.71&;#177;0．62)μg／g，P&;lt;0．05]。⑧5-羟色胺水平在各时间点之间无显著性差异(P&;gt;0．05)。结论：小鼠纹状体的多巴胺和3，4-双羟苯乙酸水平有节律性变化．5-羟色胺无节律性变化。表明黑质多巴胺能神经元具有节律性兴奋的特点．提示多巴胺的代谢可能受生物节律调节中枢控制。     

抗震颤麻痹药物引起精神障碍治疗体会

震颤麻痹是好发于中年以后的原因不明的黑质以及黑质纹状体通路变性的疾病.症状可以有静止性震颤、肌肉僵硬、动作减少且缓慢等.必须长期服用抗帕金森病(PD)药物,但抗PD药物副作用较多,比如’开关’现象、’剂末’运动不能与’耗尽’效应,多动现象以及精神障碍均为抗PD药物的副作用.其中精神障碍症状比较少见.笔者在临床工作中遇到此病人,总结治疗中的体会如下.……     

胎鼠纹状体神经干细胞分离培养方法的改进

目的：利用有血清和多聚赖氨酸培养液中加入SD14d胚胎大鼠纹状体区神经干细胞，探讨其分离、纯化神经干细胞操作技术的改进。方法：实验于2003—03／2004-11在广州第一军医大学珠江医院神经外科实验室完成。①选用SD大鼠20只，取孕13～14d的SD大鼠胚胎纹状体，吸管吹打（不超过10次）后，用组织剪剪成1mm，块状，以1．25mL／L的胰酶，在37℃下消化20min，以S—Dulbeeeo改良的Eagle培养基-F12中止消化，采用1000r／min离心10min，显微镜下细胞记数，以1&;#215;10^4／cm^2接种到改良的有血清和多聚赖氨酸铺被的12孔培养板上，培养液为Dulbeeeo改良的Eagle培养基-F12加上B27，加入血清和20μg／L表皮生长因子。7d后用吸管吸取漂浮的细胞球，机械吹打成单细胞悬液，按每培养孔1&;#215;10^4/cm^2细胞行传代再培养，此后5～7d再传代，方法同前。②利用神经干细胞与星形胶质细胞、神经细胞以及成纤维细胞贴壁之间的差异，使细胞分为贴壁和漂浮的两层细胞．分离去掉贴壁的神经细胞、成纤维细胞、星形胶质细胞以及部分的神经干细胞，得到漂浮的细胞球。③机械吹打后制成单细胞悬液，再传代培养，细胞重新增殖成细胞球，应用免疫细胞化学技术特异性抗原巢蛋白检测最初的细胞球、吹打后的单细胞和重新增殖的细胞球巢蛋白抗原的表达和分化后特异性成熟神经细胞抗原的表达。巢蛋白为神经干细胞特异性标记物，其阳性表达表明神经干细胞的存在。结果：①原代培养的纹状体细胞第2天叮见贴壁生长的神经细胞、星形胶质细胞和增殖的细胞球（约10-16个细胞大小），漂浮的细胞开始出芽并增殖；第3天贴壁的细胞球继续增殖（约50个细胞大小），漂浮的细胞则增殖成4-8个大小的细胞球；第4-7天贴壁的细胞球开始分化，漂浮的细胞则继续增殖成约30个细胞大小的细胞球，巢蛋白染色阳性。②漂浮的细胞，吹打后行传代培养，加入表皮生长因子、血清和多聚赖氨酸，细胞仍漂浮生长，1周后增殖成约70-80个细胞大小的细胞球，吸管吹打继续再培养，细胞仍漂浮增殖成细胞球，巢蛋白抗原表现阳性。③免疫细胞化学染色显示原代培养中贴壁的细胞球、吹打后的单细胞、漂浮的细胞球巢蛋白染色阳性，吹打后的细胞若不加入表皮生长因子，则细胞染色显示胶质纤维酸性蛋白和神经丝蛋白阳性。分离纯化后的细胞具有自我更新能力和多分化潜能，有很强的增殖能力。结论：利用有血清和多聚赖氨酸加入的方法分离培养的原代细胞球巢蛋白表达阳性，具有纯化度高，存活时间长的特点。