在体微透析结合HPLC测定小鼠纹状体细胞外尿嘧啶含量

目的利用在体微透析结合高效液相色谱法建立检测小鼠纹状体细胞外尿嘧啶含量的方法。方法色谱柱为反向VertiSep GES-C18(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.02 mol/L磷酸二氢钠(2:98),调pH值为3～4,流速为0.8 mL/min,检测波长为260 nm。柱温:0～5℃。结果尿嘧啶的保留时间约为4.5 min,且在0.05～1.0μg/mL范围内线性关系良好(R2=0.998 4)。结论该方法准确、灵敏、方便,重复性好,可用于脑微透析样品中尿嘧啶的含量测定。     

浅谈帕金森病的外科治疗

正众所周知,帕金森病(Parkinson's disease,PD)是一种慢性进展性的神经系统变性疾病,临床主要表现为震颤、运动迟缓、肌强直、姿势和运动障碍。PD是继阿尔茨海默病之后的第二大神经系统退行性疾病,主要病理学特征是黑质多巴胺能神经元的渐进性死亡及伴发的纹状体轴突末梢多巴胺的耗竭。据资料统计,PD在我国50岁以上的人群中发病率约1%,65岁以上人群PD发病率已高达1.7%。以此计算我国目前约有170万~200万PD患者,而全球则有500多万PD患者。随着我国社会老龄化趋势的不断发展,PD患病率和发病率都呈     

实验性肝硬化大鼠纹状体中神经元的形态定量学研究

目的 观察肝硬化大鼠纹状体中神经元的形态及数目的变化，探讨肝性脑病的发病机制。方法 用四氯化碳（CCL4）建立肝硬化模型，尼氏染色法观察纹状体神经元的变化。图像分析仪对神经元的形态及数量变化做定量分析。结果 肝硬化模型制备成功。肝硬化大鼠纹状体中神经元数量减少，染色变浅，尼氏小体减少或消失。结论 提示纹状体神经元的变化有可能与肝性脑病时出现的运动异常有关。     

CEPO经Mashl信号促进大鼠局部脑缺血后纹状体内神经发生

为检测氨甲酰化促红细胞叶三成素(CEPO)在大鼠脑缺血后发生过程中的作用及其相关信号通路,本实验将成年大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)后立即尾静脉给予CEPO(50μg/kg).结果显示:CEPO可显著降低大鼠MCAO后3 d梗塞面积,增加缺血侧神经于细胞增殖、促进神经干细胞分化成为神经元.CEPO的促神经发生效应与缺血侧纹状体内前神经元bHLH转录因子Mash1的表达上调密切相关.本结果提示CEPO对脑缺血具有神经保护作用,Mash1信号在缺血侧纹状体内可能介导CEPO增强的神经发生和神经元分化效应.     

胚胎小鼠脊髓源性与纹状体源性神经干细胞的培养及分化特点

目的 探讨小鼠脊髓源性神经干细胞与纹状体源性神经干细胞的分离培养方法 及增殖特点,比较两种来源的神经干细胞发育时期上的异同,寻找更有利于脊髓损伤修复的种子细胞.方法 利用显微解剖、无血清培养和单细胞克隆技术在孕14 d小鼠的胎鼠的脊髓及纹状体中分离培养具有单细胞克隆能力的细胞,免疫荧光染色检测克隆细胞的神经巢蛋白(nestin)抗原和诱导分化后特异性成熟神经细胞抗原的表达,并比较两种来源的干细胞在培养及分化方向上的异同点.结果从胎鼠的脊髓和纹状体中成功分离出神经干细胞.两种来源的干细胞均具有连续克隆能力可传代培养,表达nestin.脊髓血清诱导分化后脊髓源性神经干细胞β-tubulinⅢ阳性细胞(13.5±0.8)较纹状体源性神经干细胞(17.4±1.1)减少,而nestin、GFAP阳性细胞明显增多(45.7±0.3vs 39.2±1.2;25.2±1.3 vs 18.8±0.9),差异均有统计学意义(P<0.05). 结论 依据细胞增殖特点和分化结果的区别,证实纹状体源性神经干细胞更适合用于移植修复脊髓损伤.     

永久性大脑中动脉闭塞大鼠纹状体P—SAPK/JNK表达与神经元凋亡的相关性

目的探讨永久性大脑中动脉闭塞（permanent middle cerebral artery occlusion,pMCAO）大鼠纹状体P-SAPK／JNK表达与神经元凋亡的相关性。方法54只Sprague—Dawley雄性大鼠随机分为假手术组以及pMCAO1h、3h、6h、12h和24h组,每组9只。应用TUNEL法检测纹状体凋亡神经元,免疫组织化学染色法检测纹状体P—SAPK／JNK核转位,Western印迹法检测P-SAPK／JNK蛋白表达。结果pMCAO 1h纹状体TUNEL和P—SAPK／JNK阳性细胞数量显著增多（P=0．0001）,6h达高峰,12h时TUNEL阳性细胞减少,但仍高于假手术组（P=0．0002）。Western印迹分析显示,pMCAO后纹状体P—SAPK／JNK蛋白表达水平显著增高,且时程变化与免疫组化染色结果一致。纹状体神经元凋亡与P—SAPK／JNK蛋白表达呈显著正相关（r=0．984,P=0．0004）。结论脑缺血可能通过激活P-SAPK／JNK诱导纹状体神经元凋亡。     

慢病毒介导的shRNA对大鼠脑纹状体GCDH蛋白的沉默效应研究

目的:利用已成功构建的慢病毒载体,检测慢病毒介导的GCDH基因沉默对大鼠脑纹状体GCDH蛋白表达下调的能力。方法:30只健康雄性刚断乳3~4周SD大鼠随机分为绿色荧光蛋白(GFP)对照病毒注射组(对照组)和GCDH慢病毒注射组(GCDH组)各15只。各组分别在脑立体定位仪下定位纹状体组织后单侧给予GFP对照病毒2μL和GCDH慢病毒原液2μL。注射后14 d及1、3月,分别处死大鼠,并取注射区域的脑纹状体组织蛋白质通过Western blot及石蜡切片免疫组化法检测大鼠纹状体GCDH蛋白表达水平,同时测定肝肾功能、血清有机酸及Rotarod行为学。结果:GCDH慢病毒注射14 d及1、3月后,GCDH组可检测到注射区域GCDH蛋白在脑纹状体区域表达有明显降低,同对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),2组肝肾功能、血清有机酸及行为学未发现明显差异。结论:成功注射GCDH慢病毒到刚断乳3~4周SD大鼠脑纹状体,并在注射后不同时间均检测到GCDH蛋白的表达稳定下调。     

帕金森病静息状态下纹状体功能连接的fMRI研究

目的应用血氧水平依赖的功能性磁共振成像研究帕金森病(Parkinson's disease,PD)静息状态下功能连接的改变。材料与方法对35例符合PD诊断标准的患者及20名健康者行静息态脑功能性磁共振成像,选双侧纹状体(striaum,STR)为感兴趣区,采用双样本t检验分别比较左侧STR(L-STR)、右侧STR(R-STR)在两组间的脑功能连接的差异。结果 (1)以L-STR为种子点时,PD组右侧前额叶背外侧部、双侧后扣带回皮质、左侧中央前后回、顶下小叶、左侧楔前叶、左侧缘上回等脑区的正连接较正常组减弱(P0.05,Alpha Sim校正),额下回、海马旁回、左侧海马、左侧岛叶正连接增强(P0.05,Alpha Sim校正)。(2)以R-STR为种子点时,PD组右侧前额叶背外侧部、双侧后扣带回皮质等脑区正连接较正常组减弱(P0.05,Alpha Sim校正),右侧舌回、岛叶、海马旁回、双侧海马、左侧丘脑等脑区正连接增强(P0.05,Alpha Sim校正)。结论静息状态下PD患者的脑功能连接网络存在异常。     

他人决策行为对个体风险决策的影响:基于静息态fMRI研究

目的采用改编的连续风险决策任务并结合静息态功能磁共振成像技术,探讨他人决策行为对个体情绪和风险决策的影响及其与个体静息态脑活动之间的关系。材料与方法采集被试的静息态脑功能成像数据并进行实验任务,任务中被试观看他人在连续风险决策中的行为与决策结果(分为好、一般、差3个条件),并基于个体感受对他人结果进行情绪评分,继而完成类似的风险决策,任务结束后收录被试填写的社会比较倾向量表。本研究利用被试对他人的不同决策结果的情绪评分差值来度量个体对他人决策结果的情绪敏感性;利用个体在参照他人不同决策结果后的风险决策行为改变差值来度量个体行为改变的敏感性;利用社会比较倾向量表测量个体的社会比较倾向。使用DPARSF处理静息态数据,计算左侧眶额叶皮层、右侧顶下小叶和双侧纹状体的功能连接值,同时计算大脑的局部一致性(regional homogeneity,ReHo),最后将对他人结果的情绪敏感性、行为改变敏感性和社会比较倾向分数分别与之做相关分析。结果左侧眶额叶皮层与右侧纹状体的功能连接与个体社会比较倾向呈正相关;左侧纹状体与右侧顶下小叶的功能连接与对他人的不同决策结果的情绪敏感性呈负相关;右侧眶额叶皮层的ReHo值与在他人不同决策结果后的风险决策中的行为改变敏感性呈负相关。结论静息条件下纹状体、顶下小叶及眶额叶皮层的功能连接以及眶额叶皮层的ReHo值与他人决策结果对个体情绪、后续决策的影响有关。