脐带血单个核细胞体外诱导成CIK细胞及其抗肿瘤效应的实验研究

目的:探索建立CIK细胞的原代培养方 法并阐明其生物学特性,为该细胞在肿瘤生物过 继免疫治疗中的运用奠定基础。方法:通过加入 4种细胞因子(IFN γ、IL 2、IL 1及OKT3)将脐带 血单个核细胞(CBMNCs)诱导成CIK细胞;利用 流式细胞仪测定细胞表型、细胞增殖情况及细胞 周期的分布;利用改良的MTT法测定效应细胞 的体外细胞毒活性。结果:四种细胞因子的联合 运用,可诱导出大量的CIK细胞,其相对百分率 增长了163倍(从0.14%到22%),增殖高峰位 于第10～12天,针对K562、Hela和YTMLC肿瘤 细胞株,CIK细胞在效靶比为64∶1时的杀伤活 性分别为78.57±3.48、77.7±1.90和81.2± 1.51,在32∶1时分别为62.00±2.31、60.83± 2.80和64.07±2.87,在16∶1时分别为51.43± 2.51、52.87±2.91和54.10±3.11,均显著高于 LAK细胞及CBMNCs,P=0.001;而在效靶比为 8∶1(25.10±2.66、21.4±1.55和28.77±3.56) 及4∶1(17.10±2.10、11.93±1.86和9.49±2.92) 时与后两者差异无统计学意义,P=0.083。结 论:1)脐带血可作为诱导CIK细胞的重要来源 2)联合运用细胞因子能诱导出大量的CIK细胞 其增殖高峰位于培养的第12天,适宜在此期进 行临床运用;3)CIK细胞较LAK细     

肺癌患者血清VEGF 水平的临床研究

 血管生成是肿瘤生长转移的必由之路，与实体瘤的发生、转移具有密切关系。在肿瘤新生血管形成的影响因素中，最有效和特异的因子就是血管内皮生长因子（VEGF）。为此，我们检测了肺癌患者血清中的VEGF水平，分析其与临床病理因素的关系。     

口服型VEGFR-2 DNA疫苗的研制及其对小鼠的免疫效应

目的:血管内皮生长因子受体-2(vascular endothelial factor recepto-2,VEGFR-2)在肿瘤生长和转移过程中起着重要作用,制备口服型VEGFR-2 DNA疫苗并研究其生物免疫效应.方法:采用基因重组技术构建VEGFR-2胞外区基因表达载体pcDNA3.1-VR-2, DNA序列分析证实后,脂质体法转染COS-7细胞, Western blotting检测其VEGFR蛋白表达;以氯化钙法将pcDNA3.1-VR-2转化减毒沙门菌SL3261,制备口服型VEGFR-2 DNA疫苗.口服型疫苗免疫C57BL/6小鼠,ELISA法检测免疫后小鼠外周血VEGFR-2抗体水平,MTT法检测小鼠脾淋巴细胞对小鼠血管内皮细胞的体外杀伤活性.结果:成功制备口服型VEGFR-2 DNA疫苗.ELISA法检测显示,疫苗组小鼠抗体滴度随着免疫时间和免疫次数的增加而增高,在免疫6周后产生了高水平抗VEGFR-2 IgG类抗体(1.07±0.018),明显高于生理盐水组(0.14±0.033)和质粒对照组(0.14±0.038),差异均有统计学意义(F=853.17,P=0.000).MTT法检测显示,疫苗组小鼠脾淋巴细胞对靶细胞MS1的杀伤率随着效靶比的增加而增加,在效靶比8∶1时CTL活性(89.38±1.51)明显高于生理盐水组(15.17±2.54)和空质粒对照组(12.99±4.31),差异有统计学意义(F=315.42,P=0.000).结论:成功制备了口服型VEGFR-2 DNA疫苗,该疫苗可激活小鼠特异性的细胞免疫和体液免疫,为进一步抗肿瘤研究奠定了基础.     

蒿甲醚对小鼠结直肠癌的抑瘤及抗血管生成的实验研究

目的:探讨蒿甲醚(Artemether)对BALB/c小鼠CT-26 结直肠癌的抑瘤及抗血管生成作用.方法:BALB/c小鼠皮下接种CT-26 结直肠癌细胞(2×10 6 mL -1)48只,雌、雄各半;随机分为6组,每组8只,分别为低剂量33.3 mg/(kg·d)、中剂量50 mg/(kg·d)、高剂量66.6 mg/(kg·d)和中剂量50 mg/(kg·d)加铁剂1.5 mg/(kg·d)组、阳性对照组为顺铂5 mg/(kg·d)、空白对照组为等体积生理盐水;均在接种5 d后,顺铂采用腹腔注射15 d停药,其余采用灌胃法持续给药15 d,每天1次,末次给药24 h后,处死动物.用Steel公式计算肿瘤体积V(mm 3)=0.5 ab 2.采用免疫组化方法检测移植瘤组织微血管密度.结果:各治疗组抑瘤率分别为42.3%、51.4%、52.0%和53.5%;血管计数分别为13±6、31±4、38±5和11±9,生理盐水对照组为49±9;各治疗组微血管密度均明显低于生理盐水对照组(分别P＜0.05,P＜0.01);移植瘤体积较对照组显著减小.结论:在一定剂量范围内,口服蒿甲醚对小鼠CT-26结直肠癌移植瘤有明显的抑制作用;与铁剂合用能使抑瘤率增加;在具有抑瘤作用的同时,蒿甲醚还具有明显抑制小鼠结直肠癌移植瘤血管生成作用.     

蒿甲醚对不同病期小鼠结直肠癌抑瘤效果的实验研究

目的:探讨蒿甲醚(Artemether)对不同病期BALB/c小鼠CT-26结直肠癌的抑瘤作用。方法:BALB/c小鼠皮下接种CT-26结直肠癌细胞(4×105个)。96只小鼠,雌、雄各半,随机分为两个大组,分为中期组(接种5天后)和晚期组(接种10天后);每个大组再随机分为6小组,每组8只,分别为低剂量(33.3mg/kg)、中剂量(50mg/kg)、高剂量(66.6mg/kg)和中剂量(50mg/kg)加铁剂(1.5mg/kg)组、阳性对照组(顺铂5mg/kg)、空白对照组(等体积生理盐水)。结果:中期组口服蒿甲醚高、中、低剂量和中剂量加铁剂对BALB/c小鼠CT-26结直肠癌均有明显的抑制作用,抑瘤率分别为52.0%、51.4%、42.3%和53.5%;晚期组口服蒿甲醚高、中、低剂量和中剂量加铁剂对BALB/c小鼠CT-26结直肠癌亦有明显的抑制作用,抑瘤率分别为35.8%、33.5%、38.2%和44.7%,中剂量单药抑瘤率最低;中、晚期各对应组之间比较有显著差异(P<0.05)。结论:在一定剂量范围内,口服蒿甲醚对小鼠不同病期的CT-26结直肠癌均有明显的抑制作用,中期组强于晚期;蒿甲醚与顺铂相比,具有较小的毒副作用;与铁剂合用具有一定的协同作用,使抑瘤率增加。     

恶性肿瘤化疗多药耐药动物模型的实验研究

目的建立肿瘤多药耐药动物模型,为筛选有效逆转肿瘤多药耐药的药物及研究克服肿瘤耐药、提高化疗效果奠定基础。方法模拟恶性肿瘤细胞在人体内经化疗逐渐演化为多药耐药细胞的生理过程,利用BABL/c小鼠,腹腔接种S-180瘤细胞建成小鼠肿瘤动物模型,在低剂量阿霉素腹腔注射治疗下,经过15个周期的培育传代,获得了耐药的肿瘤细胞株S-180R。结果耐药细胞株对阿霉素的耐药性比亲本细胞株高66倍,对VP-16的耐药性高9倍;免疫细胞化学证实耐药细胞显示肿瘤多药耐药基因产物P-170糖蛋白过量表达;流式细胞仪荧光检测表明耐药细胞比亲本细胞排除药物的能力提高89倍。结论本研究成功地建立了S-180R耐药细胞株的肿瘤多药耐药动物模型,为进一步筛选有效逆转肿瘤多药耐药的药物及研究克服肿瘤耐药、提高化疗效果奠定了基础。     

胃肠道肿瘤患者血液中血管生长因子的临床意义

肿瘤的增殖、浸润和转移依赖于血管形成。肿瘤的血管形成是一个复杂的多步骤过程，主要包括毛细血管基底膜局部降解；血管内皮细胞内肿瘤组织迁移并伴随细胞增殖；内皮细胞血管化、分支形成新的毛细血管。这一过程是肿瘤细胞、血管内皮细胞与微环境相互作用是结果，表现为肿瘤细胞与内皮细胞相互作用，内皮细胞与基底膜、细胞外基质的相互作用，多种血管生长因子参与了这一过程。促进血管形成的血管生长因子主要包括血管内皮生长因子……     

外泌体源lncRNA在肿瘤及其微环境中的作用

[摘要] 外泌体是一种纳米级别的生物膜结构,由机体的多种细胞分泌,广泛分布于唾液、血浆、乳汁等体液中。外泌体中含有蛋白质、mRNA、miRNA、lncRNA、细胞因子、转录因子受体等多种生物活性物质。肿瘤细胞或肿瘤旁细胞分泌的外泌体可将一些肿瘤特有的生物信息转移到邻近细胞,甚至远处细胞,并且通过这种细胞间通信传递肿瘤的特性,从而促进肿瘤的发生发展。本综述旨在着重讨论肿瘤细胞及癌旁细胞分泌的含lncRNA的外泌体对肿瘤微环境,肿瘤的生物学特性的影响,为肿瘤的基础研究及临床诊断治疗提出新的思路。     

放疗联合化疗对乳腺癌MCF-7细胞凋亡及周期分布的影响

[目的]研究放射治疗联合乳腺癌化疗方案NP(NVB+DDP)对人乳腺癌MCF-7细胞凋亡及细胞周期分布的影响.[方法]通过形态学和流式细胞术对MCF-7细胞的凋亡诱导效应进行定性及定量观察,并对细胞周期分布进行分析.[结果]单纯放疗组可诱导MCF-7细胞阻滞在G2/M期.单纯放疗组和单纯化疗组的凋亡指数随时间延长而增加.放化组照射后24h,在4Gy、6Gy和8Gy不同照射剂量下,4Gy出现凋亡峰值,凋亡指数4Gy＞6Gy＞8Gy,表现为低剂量辐射联合化疗有较好的凋亡诱导效应.[结论]放疗联合化疗对乳腺癌的凋亡诱导效应明显,并呈一定的时间一剂量选择性.     

艾迪注射液协同DP方案对女性晚期肺癌患者血清VEGF、CEA、CA125的影响及经济学评价

目的:观察艾迪注射液协同DP方案对女性晚期非小细胞肺癌(Non-Small Cell Lung Cancer,NSCLC)患者血清血管内皮生长因子(Vascular Endothelial Growth Factor,VEGF)及肿瘤标志物CEA、CA125的影响,探讨其对肺癌的作用及药物经济学效益。方法:将79例女性晚期非小细胞肺癌患者随机分为对照组(单纯化疗)38例、治疗组(化疗加艾迪注射液)41例,应用双抗体夹心ELISA法检测两组患者治疗前后血清VEGF、CEA、CA125水平变化及药物经济学分析。结果:治疗组治疗前后血清VEGF水平分别为(265.23±45.83)、(202.26±25.83)pg/ml,CEA水平分别为(40.04±5.83)、(16.55±5.83)ng/ml,CA125水平分别为(102.23±6.53)、(60.15±7.82)ng/ml,差异有统计学意义(P0.05);治疗组治疗后VEGF、CEA、CA125水平低于对照组(P0.05)。费用效果比(C/E)治疗组为219.69,低于对照组,具有显著差异(P0.05)。结论:艾迪注射液可以降低女性晚期非小细胞肺癌患者血清VEGF及肿瘤标志物CEA、CA125水平,通过抑制肿瘤新生血管生成、抑制肿瘤细胞合成、释放进而抑制肿瘤细胞的增殖、浸润及转移,从而发挥抗肿瘤作用,在肺癌辅助抗肿瘤治疗中起着重要作用,并具有积极的经济优势。