肺岩宁方对人脐静脉内皮细胞增殖、迁移及管腔形成的影响

目的：观察中药肺岩宁方含药血清对人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cell,HUVEC）增殖、迁移及管腔形成的影响。方法：采用新鲜产后脐带,分离HUVEC。SD大鼠灌胃肺岩宁方制备肺岩宁方含药血清,采用人肺腺癌细胞A549制备条件培养液。用磺酰罗丹明B（sulforhodamineB,SRB）法观察肺岩宁方含药血清对HUVEC、人肺腺癌细胞A549和A549细胞条件培养液诱导HUVEC增殖的抑制作用;采用Boyden Chamber Transwell法检测其对HUVEC细胞迁移的影响;管腔形成实验评价其对HUVEC形成管腔能力的影响。结果：与同浓度对照血清相比,肺岩宁方含药血清能够抑制HUVEC及肺癌细胞条件培养液诱导的内皮细胞的增殖（P〈0．01,P〈0．05）,高浓度肺岩宁方含药血清能够抑制肿瘤细胞A549的体外增殖,肺岩宁方含药血清（12．5％～37．5％）在体外能抑制20％胎牛血清诱导的内皮细胞的迁移（P〈0．05,P〈0．01）以及初级管腔的形成。结论：肺岩宁方具有明显的抑制新生血管生成的作用,这可能是肺岩宁方抗肺癌侵袭转移的机制之一。     

肺癌中医证候与代谢酶基因CYP1A1、CYP2E1多态性的关联研究

目的:探讨代谢酶基因多态性与肺癌中医证型的关联,寻找肺癌中医证型的易感基因,分析基因辅助辨证的可行性。方法:分析207例肺癌患者的中医证型,运用聚合酶链反应-连接酶检测(polymerase chain reaction-ligase detection reaction,PCR-LDR)技术检测207例肺癌患者CYP1A1基因MspⅠ、Ⅱe/val位点和CYP2E1基因RsaI位点的基因型,分析其基因型和等位基因频率分布与肺癌中医证候之间的关系。结果:CYP1A1基因MspⅠ位点3种基因型在不同中医证型中的分布具有统计学差异(P0.01);精气两亏证CC基因型和C等位基因出现的频率明显高于脾虚痰湿证和痰热内蕴证(P0.0083);痰热内蕴证以CT基因型为主(50.0%),阴虚内热证以CC基因型为主(76.2%),两组具有显著差异(P0.0083)。CYP1A1基因Ⅱe/val位点和CYP2E1基因RsaI位点基因型及等位基因频率在4组证型中的分布,差异均无统计学意义(P0.05)。结论:CYP1A1基因MspⅠ位点可能与肺癌中医证型具有关联,CC基因型和C等位基因可能与精气两亏证的形成相关联。     

肺岩宁方对ILK基因沉默后转染人肺癌A549细胞相关基因表达的影响

目的:探讨整合素连接激酶(ILK)基因沉默后及中药肺岩宁方对相关下游靶基因表达的影响。方法:构建载体转染人肺腺癌细胞A549后,随机分为阴性对照病毒感染细胞(NC)组、RNAi靶点病毒感染细胞(KD)组、10%肺岩宁含药血清干预的NC组与KD组、20%肺岩宁含药血清干预的NC组与KD组,以及阳性对照10%DDP干预的KD组,应用Real time-PCR及Western Blot方法检测下游靶基因蛋白激酶B(Akt/PKB)、糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)、转录因子-1(AP-1)、细胞周期蛋白D1(cyclinD1)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、血管内皮生长因子(VEGF)、β-链蛋白(β-catenin)的mRNA及蛋白表达水平。结果:与NC组比较,KD组GSK-3β、VEGF mRNA和蛋白表达显著下调(P0.05,P0.01),cyclinD1、MMP-9 mRNA和蛋白表达显著上调(P0.05,P0.01),Akt表达无变化,AP-1与β-catenin在mRNA水平表达升高(P0.01)、蛋白水平表达则下降;与KD组比较,KD+10%肺岩宁含药血清和KD+10%DDP组具有下调VEGF、cyclinD1、MMP-9和β-catenin蛋白表达、上调GSK-3β蛋白表达,以及下调AP-1、cyclinD1 mRNA表达的作用(P0.01);与KD组相比,KD+20%肺岩宁含药血清具有下调AP-1、cyclinD1和MMP-9蛋白表达的作用。结论:沉默ILK基因后可以明显降低GSK-3β、VEGF的表达,10%的中药肺岩宁方含药血清可能通过下调靶基因AP-1、cyclinD1、MMP-9、VEGF和β-catenin蛋白表达的作用而发挥其抗肿瘤的作用。     

抗瘤增效方对非小细胞肺癌化疗患者的近期疗效及其对免疫功能的影响

目的观察抗瘤增效方对非小细胞肺癌(NSCLC)化疗患者的近期疗效及其对免疫功能的影响。方法采用随机对照前瞻性研究,将76例精气两亏型NSCLC住院患者分为治疗组、对照组各38例。两组患者化疗均采用诺维本+顺铂方案,治疗组加服抗瘤增效方(150ml/次,每日2次)。4周为1个疗程,连用2个疗程后观察两组瘤体稳定率、中医证候及卡氏评分的改善及免疫功能的变化。结果治疗后治疗组瘤体稳定率89.47%,显著高于对照组的71.05%(P<0.05)。治疗组中医证候改善的总有效率(71.05%)与对照组(36.84%)比较,差异有统计学意义(P<0.01)。治疗组和对照组卡氏评分总有效率分别为92.11%、57.89%,差异有统计学意义(P<0.01)。治疗组治疗后免疫指标CD3+、CD4+、CD4+/CD8+比值、自然杀伤细胞(NK细胞)活性、白介素-2(IL-2)均有不同程度提高,可溶性白介素-2受体(sIL-2R)明显下降,治疗前后自身对照差异有统计学意义(P<0.05)。两组治疗后比较NK、CD4+/CD8+比值升高及sIL-2R降低差异有统计学意义(P<0.05)。结论抗瘤增效方能提高NSCLC化疗患者的近期疗效,明显改善精气两亏型NSCLC患者临床证候,并能提高患者机体免疫能力。     

针灸联合耳穴疗法治疗癌性疼痛的临床研究

目的：观察针灸联合耳穴疗法治疗癌性疼痛的临床疗效。方法：47例临床或病理诊断为恶性肿瘤伴有癌性疼痛的患者随机分为治疗组（针灸联合耳穴治疗）24例、对照组（假针灸联合假耳穴治疗）23例,治疗组接受针灸（体针＋电针）7 d＋耳穴14 d治疗,对照组接受假针灸（假体针＋电针）7 d＋假耳穴14 d治疗,21 d为1疗程。结果：治疗组采用针灸联合耳穴疗法可显著减轻癌性疼痛,减少止痛药的用量,减轻止痛药的不良反应,同时能改善患者免疫功能,提高生存质量,与对照组相比有显著性差异。结论：针灸联合耳穴疗法是中医治疗癌性疼痛有效的外治方法之一。     

“正虚伏毒”与肿瘤发生和转移

恶性肿瘤是全身属虚、局部属实之疾病,患者既有六淫邪气、七情内伤、饮食劳倦等毒邪潜伏体内,又表现为精气亏虚、脏腑失调、气血瘀滞等正气不足之象,邪毒先潜伏体内,待正气亏虚时伺机发动,导致肿瘤的发生,甚至出现转移。该文提出"正虚伏毒"是肿瘤发生及转移的病机关键,邪毒内伏是根本原因,正气亏虚是必要条件。     

抗瘤增效方对NSCLC化疗患者免疫功能及血清VEGF、CYFRA21-1的影响

观察抗瘤增效方对非小细胞肺癌患者的近期疗效和免疫功能以及血清VEGF、CYFRA21 -1的影响。将50例非小细胞肺癌患者随机分为化疗组 24例,化疗+中药组 26例,均采用MVP方案或NP方案化疗 2个疗程,化疗+中药组在化疗同时口服中药抗瘤增效方。结果:化疗 +中药组肿瘤近期疗效为 73. 08%,优于化疗组的45 83% (P<0. 05);该组KPS评分提高稳定率为 88 46%,高于化疗组的 58. 33% (P<0. 01);T细胞总数、辅助性T细胞及NK细胞水平均高于化疗组,而抑制性T细胞水平及VEGF、CYFRA21 -1水平均低于化疗组。结论:中药抗瘤增效方能提高非小细胞肺癌化疗疗效,改善生活质量,增强免疫功能,抑制肿瘤细胞的活动。     

徐振晔辨治肺癌经验

徐振晔主任医师潜心研究肺癌的中西医治疗二十余年，应用中医辨证治疗肺癌经验丰富，认为正虚邪侵是肺癌的基本病因病机，临证重视舌诊，详辨病证，衷中参西，善顾护肺脾肾，强化后天之本，用药颇具特色，疗效卓著。     

蛋白质组学技术在恶性肿瘤中医辨证及诊治中的研究进展

中医药治疗恶性肿瘤在整体观指导下辨证论治,具有切实有效、无明显副作用、经济实惠等特点,越来越受到重视.蛋白质组学是基于蛋白质分离技术、质谱鉴定技术和生物信息技术对基因所表达的全部蛋白质功能、结构、相互作用进行研究的学说,其整体性和动态性等技术特点与中医学的整体思维和辨证施治相符合.本文就近年来蛋白质组学在探究恶性肿瘤证...     

ILK基因RNAi慢病毒表达载体的构建与鉴定

目的:进一步研究整合素连接激酶(ILK)的功能,构建ILK基因RNAi慢病毒载体,并对其在肺腺癌A549细胞株中干扰效率进行鉴定.方法:针对ILK基因RNAi有效靶序列,合成4对oligo DNA,退火形成双链DNA,与经AgeI和EcoRI酶切的质粒pGCSIL-GFP载体连接产生shILK-LV慢病毒载体,PCR筛选阳性克隆,测序鉴定,用shILKi-LV载体、pHelper 1.0载体和pHelper 2.0载体共转染包装细胞293 T细胞,包装产生慢病毒,以293 T细胞绿色荧光蛋白(GFP)的表达水平测定病毒滴度.获得重组慢病毒后感染人肺癌A549细胞,荧光显微镜观察GFP及Real-time PCR检测ILK在A549细胞中的表达.结果:PCR扩增出插入片段,测序证实成功构建了ILK-shRNA慢病毒载体shILKi-LV.包装并浓缩慢病毒,滴度分别为6×108、6×108、5×108和4×108 pfu/mL;将病毒感染A549细胞,荧光显微镜下观察80％细胞表达绿色荧光,Real-time PCR检测ILK mRNA表达明显下降,其中染shILKFKD-1的A549细胞中ILK2-△△Ct值为0.058,shILKi-KD-2、3和4的ILK2-△△Ct值分别为0.162、0.072和0.119,尤以ILKsiRNA-1抑制最明显.结论:成功构建shILKi-LV病毒载体并建立了A549-shILKi细胞模型,为ILK在肺癌信号转导通路中的研究提供了工作基础.