益气扶正复方提取物对小鼠免疫功能及荷瘤生存时间的影响

目的研究益气扶正复方提取物对小鼠免疫功能及荷瘤生存时间的影响。方法采用小鼠碳廓清法和鸡红细胞所致的血清溶血素抗体生成实验来观察益气扶正复方提取物对免疫的调节作用,通过检测S180腹水瘤小鼠生命延长率实验来测定药物对荷瘤小鼠的影响。结果益气扶正复方提取物低、中、高剂量组的脾脏系数,廓清指数K的值均大于醋酸泼尼松模型组(P0.05);益气扶正复方提取物低、中、高剂量组及青春宝组的血清溶血素水平的值均大于空白组(P0.01);益气扶正复方提取物低、中、高剂量组及氟尿嘧啶组的生命延长率均大于空白组(P0.01)。结论益气扶正复方提取物具有提高机体免疫力和抗肿瘤作用。     

柱前衍生化HPLC测定石榴籽油中石榴酸的含量

目的:石榴酸(C18∶3)在结构上为顺9,反11,顺13-十八碳三烯酸,为长链烃类,在200~400 nm没有吸收,无法直接用紫外检测器进行检测,本实验采用柱前衍生化方法,使石榴酸带上一个强发色团,使其在200~400 nm有最大吸收,建立石榴籽油中指标性成分石榴酸的柱前衍生化HPLC分析方法。方法:以ω-溴代苯乙酮作为衍生化试剂,以三乙醇胺为相转移催化剂,对石榴籽油进行柱前衍生化,色谱条件采用Diamonsi C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),检测波长272 nm,以甲醇-乙腈-水(68.5∶20∶11.5)为流动相,柱温30℃,流速1.0 m L·min-1。结果:石榴酸在0.026 6~0.133 0 g·L-1(r=0.999)线性关系良好,平均加样回收率为98.7%,RSD 1.8%。结论:该法稳定性、重复性好,定量准确,可作为石榴籽油中石榴酸的定量方法,用于评价和控制石榴籽油的质量。     

温经止痛凝胶膏剂的促渗剂优选

目的:优选温经止痛凝胶膏剂中促渗剂的种类及用量。方法:采用改良Franz扩散池,以离体小鼠腹部皮肤为屏障,采用HPLC检测不同促渗剂种类、比例及用量对温经止痛凝胶膏剂中藁本内酯累积透皮量、透皮吸收速率、增渗倍数等参数的影响,流动相甲醇-水(80∶20),检测波长328 nm。结果:氮酮和丙二醇联用的促渗效果明显优于其他几种促渗剂,确定氮酮与丙二醇的用量比(2∶1),总用量4%。藁本内酯24 h的累计透皮量84.16μg·cm-2,透皮速率常数3.28μg·cm-2·h-1,增渗倍数3.33。结论:氮酮和丙二醇组合的透皮促渗效果显著,可作为温经止痛凝胶膏剂的促渗剂。     

丹红化瘀口服液抗血栓形成作用

目的:从抗血栓形成作用初步探讨丹红化瘀口服液(Danhong Huayu Koufuye,DHK)抗糖尿病视网膜病变和糖尿病肾病的作用机制。方法:采用毛细管法检测新西兰兔凝血时间,断尾法检测昆明种小鼠出血时间,同时考察DHK对大鼠下腔静脉结扎诱导的静脉血栓、动-静脉旁路血栓和Fe Cl3诱导颈动脉血栓3种血栓形成的作用。凝血时间、出血时间、下腔静脉血栓和动静脉旁路血栓实验动物分为4组:溶剂组,DHK低剂量组(各实验剂量分别为0.60,2.25,1.60,1.60 g·kg-1·d-1),DHK高剂量组(各实验剂量分别为1.20,4.50,3.20,3.20 g·kg-1·d-1),阿司匹林组(各实验剂量分别为2.88,11.26,7.81,7.81 mg·kg-1·d-1);Fe Cl3诱导颈动脉血栓实验分为5组:假手术组,模型组,DHK低、高剂量组(1.60,3.20 g·kg-1·d-1),氯吡格雷组(30 mg·kg-1·d-1)。凝血时间实验采用单次及连续ig给药5 d后进行指标检测,其余实验均连续ig给药5 d后进行指标检测。结果:与溶剂组比较,DHK高剂量组显著延长新西兰兔凝血时间(P0.05)和小鼠出血时间(P0.05)。与模型组比较,DHK高、低剂量组抑制大鼠下腔静脉血栓、动-静脉旁路血栓和Fe Cl3诱导的大鼠动脉血栓的形成(P0.05)。结论:DHK有明显的活血化瘀和抗血栓形成作用。     

基于ND2基因序列的燕窝DNA条形码鉴别

目的:利用DNA条形码鉴定技术,快速、准确地鉴别不同种类及产地的燕窝,为该药材的质量评价提供参考。方法:提取不同产地及品种燕窝的DNA,对烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)脱氧酶亚单位2(ND2)部分序列进行扩增和测序,利用软件MEGA6.0进行序列比对,分析变异位点,计算Kimura-2参数遗传距离,构建邻接(neighbor-joining,NJ)系统发育树。结果:NJ系统发育树显示31个官燕窝样品均与爪哇金丝燕Aerodramus fuciphagus聚为1支;1个毛燕窝样品与大金丝燕A.maximus聚为1支。但官燕窝中经细胞色素b(Cytb)鉴定生物基原为爪哇金丝燕亚种(淡腰金丝燕A.fuciphagus germani)的8个样品单独聚为1支,支持率82%,并在该段ND2序列表现为2个位点的差异,表明该段ND2序列可鉴别爪哇金丝燕的亚种。结论:ND2条形码可用于快速、准确地鉴别燕窝的生物基原。     

众生丸对H1N1流感小鼠的保护及免疫调节作用研究

目的研究众生丸对H1N1流感病毒感染小鼠的保护及免疫调节作用。方法以奥司他韦为阳性药,H1N1流感病毒滴鼻感染小鼠复制小鼠病毒性肺炎模型。比较小鼠病毒性肺炎模型的肺指数、肺组织形态学、死亡保护率、小鼠T淋巴细胞亚群和细胞因子干扰素-γ(Interferon-γ,IFN-γ)、白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)的数量变化。结果与病毒对照组比较,众生丸可显著降低H1N1感染小鼠的肺指数,提高存活率,调节T细胞亚群含量,促进血清中IFN-γ和IL-10产生。结论众生丸可通过减轻炎症,调节免疫而减轻H1N1亚型流感病毒所致小鼠肺部病变,提高染毒小鼠存活率。     

32种不同产地与品种商品燕窝的DNA基源鉴定

目的：利用DNA条形码鉴定技术,快速、准确地鉴别不同种类及产地的商品燕窝,揭示其不同基源的物种差异。方法：采用试剂盒提取基因组DNA,利用PCR技术扩增Cytb序列,应用DNAStar软件进行校对拼接,采用MEGA 6.0软件对32份样品的条形码序列进行比对,构建邻接树（Neighbor-Joining tree,NJ）,并进行遗传距离分析。结果：实验所用的Cytb条形码可鉴别出燕窝的物种及亚种;收集的32个商品燕窝中,23个官燕窝的基源为爪哇金丝燕Aerodramus fuciphagus,8个官燕窝的基源为其亚种淡腰金丝燕Aerodramus fuciphagus germani,而1个毛燕窝的基源为大金丝燕Aerodramus maximus或其亚种Aerodramus maximus lowi。结论：不同来源的商品燕窝基源差异较大,利用Cytb条形码可快速、准确鉴别出燕窝基源。     

不同生长期穿心莲叶中6种同工酶分析

目的:研究不同生长期穿心莲叶中6种同工酶的酶谱变化规律,为探讨同工酶与穿心莲次生代谢产物形成之间的关系奠定基础。方法:以不同生长时期的穿心莲顶端全展叶为供试材料,采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)法得到穿心莲叶过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)、多酚氧化酶(PPO)、过氧化氢酶(CAT)、细胞色素氧化酶(CYT)及酯酶(EST)同工酶的电泳酶谱,对不同生长期穿心莲叶中上述6种同工酶图谱进行比较分析。结果:不同生长期穿心莲叶中6种同工酶的酶带亮度(酶活性)均随着生长时期的不同显示出明显差别,且均具有各自的主要特征酶带。POD、CYT和PPO同工酶酶谱在质(酶带数)和量(酶活性)上均表现出不同程度的差异,其酶活性在花果期显著增强,其中POD受物候期的影响最为显著;EST同工酶的酶活性也在花果期明显提高;CAT和SOD同工酶在穿心莲生长过程中相对稳定。结论:POD、EST、PPO以及CYT同工酶酶谱的变化可以明显反映不同生长期穿心莲的生长发育特异性,尤其是POD可以作为观察穿心莲生长变化以及深入研究次生代谢产物生成的一种生理指标。     

栽培鸡血藤藤茎次生代谢产物的动态积累变化研究

【目的】研究栽培鸡血藤藤茎中次生代谢产物在不同生长期的动态积累变化趋势,为其采收期的合理制定提供科学依据。【方法】参照《中国药典》（2010年版一部）附录XA测定醇溶性浸出物的含量;采用紫外分光光度法测定总黄酮的含量,采用高效液相色谱法同时测定原儿茶酸、儿茶素及表儿茶素的含量。【结果】鸡血藤藤茎中醇溶性浸出物、总黄酮及指标性成分原儿茶酸、儿茶素和表儿茶素的含量均随着生长年限的增加呈递增的趋势;而1年中不同月份样品的醇溶性浸出物、总黄酮、表儿茶素的含量变化均呈抛物线状,7～9月含量达到峰值;儿茶素的含量则一直呈上升状态;7～9月采收的4～6年生鸡血藤样品中醇溶性浸出物已达到现行版《中国药典》的要求。【结论】初步建议栽培鸡血藤藤茎以7年生以上采收为宜,其最佳采收年限与采收月份有待进一步研究确定。     

丹参饮水提液酚酸类成分溶出特性及降解动力学研究

【目的】观察加热温度及时间对丹参饮水提液中酚酸类成分的影响。【方法】采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法测定丹参饮水提液中丹参素、原儿茶醛和丹酚酸B含量,经典恒温加速试验法考察各成分含量变化。【结果】3个成分中丹酚酸B的含量随温度升高和加热时间的延长而逐渐下降,其降解符合一级动力学特征。【结论】丹参饮水提液中水溶性成分不稳定,檀香和砂仁会加快丹参的降解,提示在提取、浓缩等工艺中应注意加热温度及时间对其含量的影响。