UPLC-Q-TOF-MS对桑白皮总黄酮提取物的快速分析

目的:对桑白皮总黄酮提取物中的各化合物进行快速的分离和鉴定,并对其主要的裂解碎片和二级裂解规律进行探讨。方法:采用超高效液相串联四级杆飞行时间质谱联用技术(UPLC-Q-TOF-MS),在电喷雾离子源(ESI)负离子模式下进行分离和检测;使用Waters公司BRH分析柱(2.1 mm×50 mm,1.7μm);以0.1%甲酸水为流动相A,乙腈为流动相B,梯度洗脱;流速0.3 m L·min~(-1);柱温为25℃。结果:基于UPLC-Q-TOF-MS技术分离所得精确相对分子质量,结合二级质谱裂解信息,使用Masslynx 4.1软件对数据进行统计和分析,并参考Sci Finder数据库(美国化学学会在线数据库学术版),桑白皮总黄酮提取物中共鉴定出13种黄酮成分,其中有7个Diels-Alder加合物,主要代表物为桑根酮C(sanggenon C),桑根酮D(sanggenon D),6种异戊烯基黄酮类化合物,代表物为桑辛素(morusin)。结论:通过超高效液相的分离,首次发现了桑白皮总黄酮提取物中的化合物在ESI源中脱去H_2和H_2O的现象,并对其二级裂解碎片的规律进行探讨,同时也为桑白皮总黄酮提取物的成分鉴定提供了一个快速、简便、可靠的方法。     

桑白皮黄酮提取物对2型糖尿病大鼠非酒精性脂肪肝血管生成相关基因的影响

目的:初步探索桑白皮黄酮提取物对2型糖尿病大鼠非酒精性脂肪肝的治疗作用及机制研究。方法:将24只雄性大鼠随机分为3组,分别为正常组、模型组、桑白皮黄酮组(1.0 g·kg~(-1))。采用腹腔注射小剂量链脲佐菌素(streptozocin,STZ)结合高脂饲料喂养的方法,建立2型糖尿病伴非酒精性脂肪肝的模型,灌胃治疗16周时,观察比较桑白皮黄酮提取物对各组大鼠血清中空腹血糖(FBG),总胆固醇(TC),甘油三酯(TG),低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),糖耐量(OGTT)变化,油红O染色和苏木素-伊红(HE)染色观察肝脏病理改变,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测肝脏血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF),血小板衍生因子(platelet derived growth factor,PDGF)mRNA的表达。结果:灌胃干预16周后,与正常组比较,模型组大鼠FBG,TC,TG,LDL-C,含量均显著高于正常组(P0.05),应用桑白皮黄酮治疗后,上述生化指标较模型组均有显著下降(P0.05)。糖耐量试验显示模型组胰岛素敏感性下降,应用桑白皮黄酮治疗后胰岛素敏感性较模型组有显著改善。油红O染色结果显示模型组肝细胞胞浆内可见大量红染的脂肪滴,而桑白皮黄酮组肝细胞胞浆内未见红染的脂肪滴。HE染色结果显示模型组肝小叶中肝细胞发生明显的小泡样脂肪变性,部分肝细胞中脂滴融合成大的脂肪空泡,小叶中可见点状坏死,周围有炎性细胞浸润,而桑白皮黄酮组肝细胞结构正常。模型组肝脏中VEGF,PDGF mRNA表达量较正常组有显著升高,应用桑白皮黄酮治疗后,肝脏中VEGF,PDGF mRNA表达量明显降低(P0.05)。结论:桑白皮黄酮提取物对实验性2型糖尿病大鼠非酒精性脂肪性肝有一定的防治作用,其作用机制可能与抑制肝脏中VEGF,PDGF mRNA的表达有关。     

实验动物麻醉的应用研究（附1000例报告）

目的：通过分析1 000例实验动物猪的麻醉情况,总结较实用的麻醉方法。方法：对4年共1 000例猪选用咪达唑仑0.1～0.2 mg/kg及速眠新0.25～0.3 ml/kg复合肌注诱导镇静,琥珀酰胆碱、地西泮注射液、利多卡因加入至平衡液内,配制成麻醉混合液,采用缓慢静滴维持的方法实现实验猪的各种手术麻醉。结果：6例猪在麻醉过程中由于操作不当,于气管插管前后死亡,1例死于氧气供给缺乏,9例死于术中大出血,余均顺利维持至手术结束。结论：速眠新与地西泮复合用药,用于猪的麻醉是经济、实用的,具有很高的应用价值。     

通过超声显像测量腰多裂肌厚度变化率评估腰多裂肌训练动作的效果

目的通过比较腰多裂肌在康复训练中的厚度变化率,评估多种腰多裂肌训练动作的效果。 方法利用超声显像观察11种不同训练动作下志愿者的腰多裂肌形态学改变,由2位超声医生分别测量志愿者在静息态及多种训练动作下的双侧腰多裂肌的厚度,然后计算出腰多裂肌的厚度变化率和腰多裂肌收缩率,进而对各种训练动作下腰多裂肌收缩率进行统计学分析。 结果两位超声医生检查结果所计算的腰多裂肌收缩率组间比较,差异无统计学意义(P&rt;0.05)。性别对腰多裂肌收缩率的影响差异无统计学意义(P&rt;0.05)。各种训练动作下腰多裂肌收缩率的统计分析比较发现,对侧腿上抬、同侧腿上抬、对侧手上抬、同侧手上抬、对侧下肢上抬五个动作两两比较,差异无统计学意义(P&rt;0.05);小燕飞式上抬、同侧下肢上抬、同侧上肢对侧下肢上抬三个动作两两比较,差异无统计学意义(P&rt;0.05);对侧上肢上抬、同侧上肢上抬两两比较差异无统计学意义(P&rt;0.05);同侧上肢对侧下肢上抬、对侧上肢同侧下肢上抬两两比较差异无统计学意义(P&rt;0.05);其余训练动作的腰多裂肌收缩率两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。 结论不同的腰多裂肌训练动作取得的效果各不相同,超声显像测量腰多裂肌厚度变化可以为康复训练计划的制订提供一定的依据。     

逆行胆囊切除术和大部胆囊切除术的临床应用对比分析

选取2012年6月~2014年6月87例在我院行胆囊切除术患者。随机分为对照组37例和观察组50例。对照组行大部胆囊切除术治疗,观察组行逆行胆囊切除术治疗,比较两组患者手术时间、腹腔引流量、术后通气时间、住院时间及术后并发症发生情况。结果观察组术后通气时间、手术时间、腹腔引流量、住院时间均低于对照组,两组比较差异显著(P<0.05)。观察组并发症发生率8.0%显著低于对照组21.62%,差异具有统计学意义(P<0.05)。逆行胆囊切除术较大部胆囊切除术安全性高,并发症低,对胆囊切除难度较大患者有显著优势,对医生技术要求高,具有临床推广价值。     

柱前衍生化HPLC测定石榴籽油中石榴酸的含量

目的:石榴酸(C18∶3)在结构上为顺9,反11,顺13-十八碳三烯酸,为长链烃类,在200~400 nm没有吸收,无法直接用紫外检测器进行检测,本实验采用柱前衍生化方法,使石榴酸带上一个强发色团,使其在200~400 nm有最大吸收,建立石榴籽油中指标性成分石榴酸的柱前衍生化HPLC分析方法。方法:以ω-溴代苯乙酮作为衍生化试剂,以三乙醇胺为相转移催化剂,对石榴籽油进行柱前衍生化,色谱条件采用Diamonsi C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),检测波长272 nm,以甲醇-乙腈-水(68.5∶20∶11.5)为流动相,柱温30℃,流速1.0 m L·min-1。结果:石榴酸在0.026 6~0.133 0 g·L-1(r=0.999)线性关系良好,平均加样回收率为98.7%,RSD 1.8%。结论:该法稳定性、重复性好,定量准确,可作为石榴籽油中石榴酸的定量方法,用于评价和控制石榴籽油的质量。     

四川盆地结核分枝杆菌群体遗传学特征研究

目的 探讨四川盆地(重庆、四川地区)流行的结核分枝杆菌(MTB)群体遗传学特征。方法 对413株源自四川盆地的MTB进行长序列多态性(LSP)谱系鉴定, 采用χ²检验分析不同谱系MTB在人群中的分布差异。对菌株进行15位点数目可变串联重复序列基因分型, 评价各位点的分辨力。构建N-J树分析其系统进化;构建最小跨度树以模拟群体菌株的遗传结构;采用分子方差分析不同谱系MTB的群体间遗传分化;采用贝叶斯模型计算菌株最近共祖年代。结果 通过LSP可将413株MTB分为两大谱系, 其中北京谱系占56.2%(232/413), 欧美谱系占43.8%(181/413)。两谱系MTB在人群中的分布(性别、年龄、民族以及菌株耐药性)差异无统计学意义(P>0.05)。北京谱系MTB的N-J树呈放射状分布, 最小跨度树中有72.4%(168/232)的菌株被划分到同一“克隆复合群”;欧美谱系MTB的N-J树呈枝状分布, 最小跨度树中呈现出多个“克隆复合群”。北京谱系MTB在该地区有显著的群体间遗传分化(F_ST=0.018 91, P<0.05), 而欧美谱系MTB群体间遗传分化不显著(F_ST=0.005 19, P>0.05)。欧美谱系MTB中最大菌株复合群的最近共祖年代为723(95%CI:517～946)年。结论 北京谱系和欧美谱系MTB在四川盆地以“互相对抗”形式流行;两谱系MTB的群体间遗传分化存在差异;欧美谱系MTB的侵入可能与一次历史事件(约720年前的战争)有关。     

Pokemon癌基因控制细胞突变整个过程的研究

此过程的实现需要多个癌基因的激活.虽然已发现多个癌基因如c-myc、H-ras、N-ras等与肿瘤的发生有关,但目前尚没有一种基因被确定为大多数肿瘤的主要癌基因,因此寻找肿瘤的主要癌基因成为研究的热点.原癌基因Pokemon作为POK转录抑制因子中的一员,具有N端的BTB/POZ结构域和C端的Krüpple型锌指结构,最初是作为特殊结合于人类免疫缺陷病毒I型(HIV-I)的启动子元件而被发现的.近来研究发现,Pokemon在肿瘤形成过程中发挥了重要的作用.2005年美国斯隆-凯特灵癌症中心研究人员发现该基因与肿瘤形成关系密切,并确定其为癌基因.Pokemon通过增强某些癌基因的表达或抑制一些抑癌基因和/或肿瘤抑制因子的表达,从而促进细胞的恶性转化,并且该基因控制着细胞突变的整个过程,此前发现的癌基因都不具备类似的功能[1].本文就Pokemon结构、功能及其与肿瘤的关系作一综述.     

三种方法联合治疗生殖器疱疹临床观察

目的：探讨降低生殖器疱疹复发率的联合治疗方法。方法对2010年9月~2012年9月本所收治的38例GH采用泛昔洛韦抗病毒、卡介菌多糖核酸提高免疫力、微波照射进行治疗。结果病变处皮损消退迅速，组织修复完好，临床治疗结果理想。结论联合治疗疗效确切，明显优于常规治疗，且操作简便，利于临床开展。     

卵巢癌胃转移1例及文献复习

目的 探讨卵巢癌胃转移病例的临床表现、病理特征及治疗。方法 2016年9月沧州市中西医结合医院发现1例卵巢癌胃转移,分析其病史、影像及病理学特征。结果 病史、影像及CA125能为诊断卵巢癌胃转移提供线索,确诊则需要病理及免疫组化,治疗可以参照卵巢癌相关指南。结论 对罕见肿瘤一定要结合临床特征、肿瘤标志物、明确相应病灶病理,才能不漏诊,提高诊疗精准性。