原发性肝癌Twist基因表达的研究

目的：研究Twist基因在人原发性肝癌（primary liver cancer,PLC）组织中的表达及其临床意义。方法：应用免疫组织化学SABC染色方法检测45例PLC组织及癌旁组织中Twist蛋白并采用RT-PCR对TwistmR-NA的表达进行分析研究。结果：PLC组织、癌旁组织及正常肝组织中Twist的阳性表达率分别为80.0%、57.8%和22.2%。PLC和癌旁组织与正常对照肝组织中Twist的表达相比较差异均有统计学意义,P〈0.05。肿瘤包膜也可见Twist表达。RT-PCR检测Twist结果显示,PLC组织中Twist mRNA表达显著上调。结论：PLC组织中高表达转录因子Twist对肿瘤的发生、发展起着重要作用。     

缺陷型TGF_1βⅡ型受体真核表达质粒载体的构建

目的:本实验旨在通过构建大鼠缺陷型TGF1βⅡ型受体的真核表达质粒载体,为研究大鼠肝组织因TGF1βⅡ型受体缺陷而阻断TGF1β的作用后,对人工免疫性大鼠的肝组织及其他组织的影响提供实验材料。方法:根据大鼠肝组织TGF1βⅡ型受体的基因序列,设计在特异的位置添加终止密码,在此序列两端加入特异的限制性内切酶的酶切位点,从而构建大鼠的缺陷型TGFβ1Ⅱ型受体基因序列,再利用基因重组技术,将其连接在真核表达质粒载体中,对此质粒载体进行酶切电泳鉴定和DNA测序加以验证。结果:运用分子生物学技术,成功获取突变体TGF1βⅡ型受体真核表达质粒载体,经过DNA测序鉴定,确认为实验预期所需。结论:TGF1βⅡ型受体真核表达质粒载体构建成功,其关键涉及基因片段及载体的选择。     

表没食子儿茶素没食子酸酯通过下调存活素表达诱导鼻咽癌细胞株CNE-2凋亡的实验研究

目的 探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin-3-gallate,EGCG)对鼻咽癌细胞株CNE-2的凋亡诱导作用以及这个过程中存活素(survivin)的表达变化特点.方法 应用噻唑蓝(MTT)法计算不同浓度EGCG作用于CNE-2鼻咽癌细胞后不同时间点的生长抑制率,并通过细胞荧光显微镜观察其凋亡情况,同时应用RT-PCR法检测这个过程中survivin mRNA的表达变化.结果 EGCG诱导CNE-2细胞凋亡,对其生长具有明显的抑制作用,并且存在时间和剂量依赖关系,同时伴有survivin mRNA的表达下调. 结论EGCG能诱导CNE-2细胞凋亡,明显抑制其生长,这种诱导凋亡的能力通过下调survivin mRNA的表达实现.     

SiRNA-Survivin增强鼻咽癌细胞对放射敏感性的实验研究

目的 研究Survivin表达抑制对鼻咽癌放射敏感性的影响,探讨Survivin基因为靶的分子干预在鼻咽癌放疗中作用.方法 采用脂质体将Survivin特异性siRNA转染鼻咽癌5-8F细胞系,半定量RT-PCK、流式细胞仪检测Survivin基因表达;Survivin特异性siKNA转染5-8F细胞,培养24 h后,用6 GY的放射线处理细胞,继续培养24h后,收集细胞.流式细胞仪、镜下计数检测细胞增殖、凋亡与细胞周期.结果 Survivin特异性的siRNA能有效地阻断5-8F细胞系中Survivin基因表达.特异性SiRNA加放射组,细胞抑制率 (33.7±1.5%) 显著高于特异性SiRNA组[ (23.8±4.3) %,(P<0.05) ]和随机序列的siRNA加放射组[ (15.5±1.7) %,(P<0.01) ].特异性SiPNA加放射组,细胞凋亡率 (24.67±0.50) 显著高于特异性SiRNA组[ (20.30±0.44) ,(P<0.05) 1和随机序列的siRNA加放射组[ (6.58±0.38) ,(P<0.01) ].特异性siRNA加放射组,S/G_1比率 (2.76±0.186) 显著高于特异性siRNA组[ (1.91±0.067) ,(P<0.01) ]与随机序列的siRNA加放射组[ (0.585±0.066) ,(P<0.01) ].结论 有效干预Survivin基因表达能提高鼻咽癌细胞的放射敏感性,增强鼻咽癌的放疗效果.     

EGCG对鼻咽癌细胞株CNE-1生长及其survivin表达的影响

目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）对鼻咽癌细胞株CNE-1的生长抑制作用及其机制。方法不同浓度EGCG作用于鼻咽癌CNE-1细胞,用MTT法检测不同时间点的细胞生长抑制率,同时用RT-PCR法检测其survivin mRNA。结果EGCG作用后CNE-1细胞的生长抑制率升高,同时伴survivin mRNA表达下调,呈浓度和时间依赖性。结论EGCG可明显抑制鼻咽癌细胞株CNE-1的生长,其机制是下调该细胞survivin mRNA的表达。     

鞣花酸对鼻咽癌CNE-2细胞增殖及凋亡的影响

目的 探讨鞣花酸抗鼻咽癌的生物学活性.方法 鼻咽癌CNE-2细胞传代培养,第2天,实验组分别给予2,4和6mg/L鞣花酸干预48 h,对照组不予干预.MTT法检测细胞增殖;Hoechst染色和流式细胞仪分析细胞凋亡.结果 干预48 h后,随鞣花酸浓度增加,活细胞减少,漂浮的死细胞增多;Hoechst染色细胞核出现核固缩、核碎裂的现象,细胞出现明显的抑制和凋亡现象.不同浓度用药组细胞抑制率及凋亡率明显升高,且明显高于对照组(P＜0.05).结论 鞣花酸能抑制鼻咽癌CNE-2细胞增殖,诱导其凋亡,具有潜在的抗鼻咽癌生物学活性.     

EGCG对鼻咽癌细胞株CNE-2及相关基因表达的影响

目的:研究EGCG对鼻咽癌细胞系CNE-2的增殖与凋亡作用,探讨其对细胞增殖与凋亡相关基因Bcl-2、Bax、Caspase-3表达的影响。方法:应用MTT实验、流式细胞仪检测细胞的增殖与周期;Hoechst33258荧光染色法检测细胞凋亡;RT-PCR检测Bcl-2、Bax、Caspase-3表达。结果:EGCG明显抑制CNE-2细胞的增殖,诱导其凋亡,该作用具有剂量-效应关系。EGCG抑制CNE-2细胞Bcl-2表达,诱导CNE-2细胞Bax、Caspase-3表达。结论:EGCG在体外具有抗鼻咽癌细胞的作用,此作用可能是通过调节细胞增殖与凋亡基因的表达实现的。     

PDGF-α受体反义寡核苷酸对体外视网膜色素上皮细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨血小板源性生长因子-α受体反义寡核苷酸(PDGFR-αASODN)对体外人视网膜色素上皮(humanretinal pigment epithelium,HRPE)细胞增殖和凋亡的作用。方法:使用阳离子脂质体lipofectamineTM2000将靶向PDGFR-α基因的ASODN转染至细胞株HRPE细胞,MTT法检测对HRPE细胞增殖的影响;Hoechst33258荧光染色观察凋亡细胞;流式细胞仪检测HRPE细胞的周期和凋亡率。结果:PDGFR-αASODN转染组细胞增殖抑制率和凋亡率均明显高于对照组(P<0.05)。结论:沉默PDGFR-α基因表达可显著抑制HRPE细胞的增殖,并能诱导其凋亡。     

广西汉族与壮族女大学生乳房形态测量值比较

目的分析广西汉族和壮族女大学生的乳房黄金三角,了解两民族女大学生的乳房发育状况,为乳腺疾病的诊治、指导女性乳房健康发育以及提高乳房整形美容手术的准确性、科学性提供参考依据.方法采用3D扫描仪测量97例汉族和66例壮族女大学生志愿者乳房黄金三角形态线性指标,包括双侧乳房高度、基底宽度、胸乳线和乳头间距.结果汉族女大学生乳头间距(180.94±13.96)mm,大于壮族女大学生(176.52±12.06)mm,差异有统计学意义(P<0.05).汉族女大学生右侧、左侧乳房高度、基底宽度、胸乳线与壮族比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论广西汉族和壮族女大学生乳房发育状况相似,汉族女大学生两乳间距稍大,汉族女大学生乳房形态更接近完美标准.