MnSOD在EGCG诱导鼻咽癌细胞株CNE-1凋亡中的表达变化

目的:探讨锰超氧化物歧化酶(MnSOD)在表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)诱导鼻咽癌细胞株CNE-1凋亡中的表达变化特点.方法:应用噻唑蓝(MTT)法计算不同浓度EGCG作用于CNE-1鼻咽癌细胞后不同时间点的生长抑制率,并通过细胞荧光显微镜观察其凋亡情况,应用RT-PCR法检测这个过程中MnSOD mRNA的表达.结果:EGCG对CNE-1细胞生长具有明显的抑制作用,并且存在时间和剂量依赖关系,同时伴有MnSOD mRNA的表达上调.结论:鼻咽癌细胞株CNE-1对EGCG有较高的敏感性,EGCG能使CNE-1细胞生长受到明显抑制,并诱导其凋亡,这种诱导凋亡的能力与MnSOD mRNA的表达上调相关.     

表没食子儿茶素没食子酸酯通过下调诱导型一氧化氮合酶促进鼻咽癌细胞的凋亡

目的 探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)抗鼻咽癌的分子机制.方法 体外培养鼻咽癌CNE-2细胞并以不同质量浓度EGCG处理,采用MTT法检测细胞增殖抑制率,Hochest染色观察凋亡细胞并计算细胞凋亡率,RT-PCR检测细胞中一氧化氮合酶(iNOS)表达变化.结果 EGCG处理后,CNE-2细胞增殖明显受到抑制,且呈时间和剂量依赖性; CNE-2细胞凋亡率显著升高;iNOS表达明显下调,且随EGCG质量浓度的增加有降低趋势.结论 EGCG能抑制CNE-2细胞增殖、促进其凋亡,可能机制为下调iNOS表达.     

表没食子儿茶素没食子酸酯抑制人鼻咽癌细胞的生长机制

目的:探讨表没食子儿茶素没食子酸酯[(-)-epi-gallocatechin-3 gallate,EGCG]抑制人鼻咽癌CNE-2Z细胞系生长增殖的机制,寻找鼻咽癌治疗的新靶点.方法:用EGCG处理人鼻咽癌CNE-2Z细胞,应用MTT试验观察不同浓度的EGCG对癌细胞生长增殖的影响;流式细胞仪检测用药前后细胞周期的变化;用逆转录聚合酶链反应分析ras相关区域家族1A(RASSF1A)mRNA表达情况.结果:从CNE-2Z细胞生长曲线判定EGCG对细胞生长均有抑制作用;流式细胞分析结果显示,G0/G1期细胞增加,S期细胞减少;经EGCG处理后,细胞中均有RASSF1AmRNA表达,且表达随药物浓度增高而增强.结论:EGCG对体外培养的鼻咽癌细胞生长增殖的抑制作用,可能是由于其能使因甲基化而失活的RASSF1A基因再转录,诱导该基因重新表达的结果.     

EGCG抑制肺癌细胞增殖及其机制的研究

目的:研究表没食子儿茶素-3-没食子酸酯(EGCG) 对人肺癌细胞增殖的影响及机制. 方法:培养肺癌细胞A549,加入EGCG制作细胞抑制曲线; EGCG作用于人肺癌A549细胞株前后通过Hoechst染色检测细胞凋亡. RT-PCR 及Western Blot印迹法研究survivin的mRNA 及蛋白表达的变化. 结果:EGCG可明显抑制A549细胞的增殖, 60 mg/L EGCG作用后,细胞出现明显的凋亡. 同时肺癌细胞中survivin mRNA 和蛋白表达减少. 结论:EGCG可抑制肺癌细胞的增殖,这可能与survivin表达降低有关.     

氯喹对鼻咽癌细胞凋亡的影响

目的:探讨氯喹(CQ)对鼻咽癌细胞增殖和凋亡的影响。方法:采用MTT法检测不同浓度(0、2、4、8、16、32μmol/L)CQ对鼻咽癌细胞CNE-2Z的增殖抑制效应;集落克隆实验法检测不同浓度CQ对集落克隆形成的影响;溴化丙啶单染检测CQ诱导鼻咽癌细胞CNE-2Z凋亡;Western blot检测CQ(10μmol/L)处理鼻咽癌细胞CNE-2Z不同时间(0、6、16、24 h)内质网应激反应标志物葡萄糖调节蛋白(GRP-78)的表达。结果:不同浓度CQ均对鼻咽癌细胞CNE-2Z具有明显的增殖抑制作用,16μmol/L CQ作用于鼻咽癌细胞CNE-2Z 24、48、72 h细胞存活率分别为85.94%、75.34%和56.45%。同时,CQ具有抑制鼻咽癌细胞CNE-2Z的集落克隆形成的作用。并且,CQ呈剂量依赖性诱导鼻咽癌细胞CNE-2Z的凋亡。另外,CQ诱导鼻咽癌细胞上调GRP-78的表达。结论:CQ能抑制鼻咽癌细胞增殖,并通过引起过度的内质网应激反应机制诱导其凋亡。     

氯喹对鼻咽癌细胞凋亡的影响

目的:探讨氯喹(CQ)对鼻咽癌细胞增殖和凋亡的影响。方法:采用MTT法检测不同浓度(0、2、4、8、16、32mol/L)CQ对鼻咽癌细胞CNE-2Z的增殖抑制效应;集落克隆实验法检测不同浓度CQ对集落克隆形成的影响;溴化丙啶单染检测CQ诱导鼻咽癌细胞CNE-2Z凋亡;Western blot检测CQ(10mol/L)处理鼻咽癌细胞CNE-2Z不同时间(0、6、16、24 h)内质网应激反应标志物葡萄糖调节蛋白(GRP-78)的表达。结果:不同浓度CQ均对鼻咽癌细胞CNE-2Z具有明显的增殖抑制作用,16mol/L CQ作用于鼻咽癌细胞CNE-2Z 24、48、72 h细胞存活率分别为85.94%、75.34%和56.45%。同时,CQ具有抑制鼻咽癌细胞CNE-2Z的集落克隆形成的作用。并且,CQ呈剂量依赖性诱导鼻咽癌细胞CNE-2Z的凋亡。另外,CQ诱导鼻咽癌细胞上调GRP-78的表达。结论:CQ能抑制鼻咽癌细胞增殖,并通过引起过度的内质网应激反应机制诱导其凋亡。     

熊果酸诱导鼻咽癌细胞株CNE-2Z凋亡的实验研究

目的:探讨熊果酸诱导人鼻咽癌细胞CNE-2Z凋亡的作用机制.方法:用不同浓度的熊果酸处理CNE-2Z细胞,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色检测熊果酸对CNE-2Z细胞的增殖抑制效应;流式细胞术分析细胞周期和凋亡率;应用免疫组织化学SP法检测凋亡相关基因bcl-2,bax和cox-2表达的变化;Western blot检测CNE-2Z细胞内caspase 3的表达.结果:熊果酸对CNE-2Z细胞具有抑制增殖和诱导凋亡作用,并呈浓度依赖性;流式细胞术分析表明S期细胞数减少,细胞主要阻滞在G0/G1期;免疫组织化学检测显示在凋亡过程中bax表达上调,bcl-2、cox-2表达下调;Western blot检测CNE-2Z细胞中caspase 3表达增强.结论:熊果酸在体外对CNE-2Z细胞有诱导凋亡的作用,其作用机制可能是通过促进caspase 3的活化和bax的表达上调、bcl-2、cox-2的表达下调来实现.     

小檗碱体内外对人鼻咽癌细胞CNE-2生长的抑制作用

目的观察小檗碱体内外对人鼻咽癌CNE-2细胞生长的影响,探讨小檗碱的抗肿瘤作用机制。方法MTT法测定小檗碱对CNE-2细胞生长的抑制作用;流式细胞仪检测小檗碱对CNE-2细胞凋亡和周期的影响;透射电镜观察CNE-2细胞经小檗碱处理后凋亡形态变化;Westernblotting法检测小檗碱对CNE-2细胞的细胞周期相关蛋白(cyclin)B1、CDK1、cdc25c表达的影响;3H-胸腺嘧啶(3H-TdR)和3H-亮氨酸(3H-Leu)标记前体掺入法检测小檗碱对CNE-2细胞DNA和蛋白质合成的影响;利用荷人鼻咽癌的裸鼠模型验证小檗碱的体内抗肿瘤作用。结果小檗碱能抑制CNE-2细胞生长,48h的半数抑制浓度(IC50)为(49.5±5.8)μmol/L,72h的IC50为(13.3±2.0)μmol/L;小檗碱能抑制CNE-2细胞DNA和蛋白质合成;小檗碱能诱导CNE-2细胞凋亡,细胞经过25.0μmol/L小檗碱处理48h后的凋亡指数为(48.9±10.4)%;50.0μmol/L小檗碱能诱导CNE-2细胞G2/M期阻滞,并且下调细胞周期相关蛋白B1、CDK1、cdc25c表达;小檗碱能抑制人鼻咽癌CNE-2细胞在裸鼠体内的生长,30mg/kg剂量组的肿瘤体积中位数为317.9mm3,明显低于对照组(P<0.05)。结论小檗碱体内外均能抑制人鼻咽癌CNE-2细胞的生长,其抗肿瘤作用可能与其诱导细胞周期阻滞和凋亡,下调相关细胞周期蛋白有关。     

EGCG诱导人胶质瘤细胞U251凋亡及对survivin表达的影响

目的:观察表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)诱导人胶质瘤细胞(U251)凋亡的生物学效应及对survivin蛋白表达的影响。方法:采用MTT法检测不同浓度EGCG对U251细胞增殖抑制作用;吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)荧光双染法观察各组细胞凋亡形态,计算凋亡率;Wester Blot法检测不同剂量EGCG处理48h对survivin蛋白表达的影响。结果:EGCG显著抑制U251细胞生长,呈浓度依赖性;EGCG可以诱导U251细胞凋亡,细胞凋亡率随着药物浓度的增加而逐渐增加。Wester Blot结果显示EGCG抑制Survivin蛋白的表达。结论:EGCG具有诱导U251细胞凋亡的作用,其机制可能与抑制Sur-vivin蛋白的表达相关。     

survivin反义寡核苷酸转染对人乳腺癌细胞系MCF 7生长及对长春瑞滨的增敏作用

目的探讨survivin反义寡核苷酸（ASODN）对乳腺癌细胞系MCF 7的诱导凋亡、抑制增殖和对长春瑞滨的增敏作用。方法采用脂质体介导survivin ASODN转染乳腺癌细胞系MCF 7,半定量RT PCR方法检测survivin基因mRNA表达,Western blot方法检测survivin基因蛋白表达,AnnexinⅤ/PI双染法通过流式细胞仪检测细胞凋亡率变化,PI染色通过流式细胞仪检测细胞周期时相变化,MTT比色法检测转染细胞的生长抑制情况及对长春瑞滨的敏感性,电镜观察反义转染对乳腺癌细胞系MCF 7的凋亡诱导作用。结果survivin反义复合物下调MCF 7细胞的survivin mRNA和蛋白表达,并呈剂量依赖性。细胞周期被阻滞于G2/M期,细胞凋亡率明显升高（P＜0.05）,反义组细胞生长抑制率明显上升（P＜0.05）。透射电镜下转染组细胞呈凋亡晚期变化。600?nmol/L反义转染组长春瑞滨的IC50值为(3.7±0.42)μg/mL,正常组为(7.1±0.68)μg/mL,差异有统计学意义(P＜0.05)。结论survivin反义寡核酸可有效下调MCF 7的survivin mRNA及蛋白表达水平,抑制增殖,诱导凋亡,并增强其对化疗药物长春瑞滨的敏感性。