应用PCR－SSCP技术检测B淋巴细胞恶性肿瘤患者骨髓中微量肿瘤细胞

应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ技术检测Ｂ淋巴细胞恶性肿瘤患者骨髓中微量肿瘤细胞于力，刘敬忠，孙燕，刘春蕙，汪月增我们把多聚酶链反应（ＰＣＲ）与ＤＮＡ单链构象多态性分析（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）相结合，建立了一种检测方法，对骨髓中微量肿瘤细胞进行了检测。材料和方法１标...     

应用基因扩增转录测序技术诊断乙型血友病

作者运用基因扩增转录测序技术（ＧｅｎｏｍｉｃＡｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎＷｉｔｈＴｒａｎｓｃｒｉｐｔｓＳｅｑｕｅｎｃｉｎｇ，ＧＡＷＴＳ）完成３６例中国人乙型血友病患者第九因子（ＦＩＸ）基因突变类型的研究，发现中国人与美国白种人等该基因胚系突变图谱具有不同特点；并检出１７位女性缺陷基因携带者。证明ＧＡＷＴＳ是适用于乙型血友病基因诊断与携带者检出的好方法。     

急性白血病患者WT1基因表达的研究

检测了48例急性白血病(AL)患者骨髓或外周血单个核细胞(MNC)的WT1基因表达,现报告如下.     

四川地区α地中海贫血产前基因诊断

α地中海贫血（α地贫）可分为α地贫1（αα/--）、α地贫2（αα/α-）,缺失型或非缺失型HbH病和Hb Bart′s胎儿水肿综合征（--/--）四种类型。其中以Hb Bart′s胎儿水肿综合征最为严重,可致胎儿缺氧,引起死胎、死产或新生儿死亡,孕妇常有严重的妊娠中毒症及产后出血。因此,及早进行产前诊断,减少此类患儿出生是避免孕妇及其家庭痛苦的有效措施。 除非缺失型HbH病外,α地贫都是由于α基因缺失而致。这种缺失往往引起α基因内限制性内切酶位点的变化,故缺失型α地贫可采用直接检测胎儿DNA上限制性内切酶图谱的方法进行产前诊断。     

华北地区汉族群体15个短串联重复序列基因座遗传多态性分析

目的调查华北地区汉族人群15个短串联重复序列(shorttandemrepeat,STR)基因座遗传多态性分布和群体遗传学数据。方法应用毛细管电泳技术和五色荧光复合扩增的方法,检测597名汉族无关个体的15个STR基因座基因型。结果15个STR基因座的基因频率分布均符合Hardy-Weinberg平衡,所检测的15个STR遗传标记均具有高度多态性,杂合度均超过0.62,15个基因座的个体识别力在0.802~0.967之间,非父排除率在0.320~0·697之间,匹配概率在0.033~0.198之间。15个基因座的累积个体识别能力为0.999999以上,累积非父排除率为0.99999571,累积匹配概率为8.93×10-18。结论联合检测15个基因座可为亲缘鉴定和个体识别提供可靠的法医学证据,这15个STR基因座适用于中国人群的法医物证学检验。     

Detection of factor Ⅷ intron 1 inversion in severe haemophilia A

Objective Screening the intron 1 inversion of factor Ⅷ (FⅧ) in the population of severe haemophilia A(HA) in China and performing carrier detection and prenatal diagnosis. Methods Using LD-PCR to detect intron 22 inversions and multiple-PCR within two tubes to intron 1 inversions in sereve HA patients. Carrier detection and prenatal diagnosis were performed in affected families. Linkage analysis and DNA sequencing were used to verify these tests. Results One hundred and eighteen patients were seven diagnosed as intron 22 inversions and 7 were intron 1 inversions out of 247 severe HA patients. The prevalence of the intron 1 inversion in Chinese severe haemophilia A patients was 2. 8% (7/247). Six women from family A and 2 from family B were diagnosed as carriers. One fetus from family A was affected fetus. Conclusion Intron 1 inversion could be detected directly by multiple-PCR within two tubes. This method made the strategy more perfective in carrier and prenatal diagnosis of haemophilia A.     

用SYBR-Green Ⅰ实时荧光PCR结合融解曲线分析法诊断α-地中海贫血

目的建立自动化、高通量、准确快速检测缺失型α-地中海贫血基因型的技术。方法应用SYBR-Green1进行两个实时荧光聚合酶链反应(real-time fluorescence polymerase chain reaction with SYBR-Green1,SYBR-PCR),检测左缺(-α4.2)、右缺(-α3.7)等位基因,同时进行融解曲线(dissociation curve,DC)和Tm(melting temperature)值分析。PCR产物重组到pCR2.1,重组子梯度稀释作为模板检测灵敏度,确定两种等位基因型(-α4.2,-α3.7)的检测下限,并对110份DNA样品进行检测。结果检测-α4.2和-α3.7的PCR产物长度分别为1.65kb、1.9kb,Tm分别为(81.5±0.5)℃、(82.5±0.5)℃,检测下限分别为9×102个拷贝、4.3×102个拷贝。该检测技术的灵敏度较常规PCR结合琼脂糖凝胶电泳法高10倍。结论SYBR-Green1实时荧光PCR结合融解曲线分析及Tm分析可以灵敏、准确地检测-α4.2、-α3.7、αα(包括αTα)及--SEA4种等位基因,从而为各种缺失型α-地中海贫血做出基因诊断。该技术具有自动化程度高,不需荧光标记探针,成本低,易质控,防污染,高通量等优点,适于临床推广应用。     

柔红霉素和亲黑色瘤素-柔红霉素与DNA之间的反应

已经证明,萤光素-亲黑色瘤素(fluorescein-melanotropin)和亲黑色瘤素-铁蛋白-萤光素这两种共轭物可被黑色瘤细胞表面的亲黑色瘤素受体特异性地识别。这一事实提出了化学药物特异地定位治疗黑色瘤的可能性。亲黑色瘤素-柔红霉素(melanotropin-daunomycin)共轭物对小鼠黑色瘤细胞较之单纯柔红霉素具有更大的杀灭作用,但     

含多个基因探针片段的质粒的构建

各含多个人类珠蛋白基因探针片段的三个质粒组建成功。pUC-2γ-β含γ-IVS-Ⅱ、inter-γ及β-IVS-Ⅱ三个不同的基因探针片段;pUC-2β-δ含3′-β、5′-β和δ-IVS-Ⅱ三个基因探针片段;pL—α-ξ含α及ξ两个珠蛋白基因探针片段。这样,从一种质粒DNA中就可以同时得到两种或三种不同的珠蛋白基因探针片段,具有较大经济效益和实用价值。