川芎内生真菌次级代谢产物中1个新的内酯化合物

目的研究川芎内生真菌Alternaria sp. IS275代谢产物的化学成分。方法采用硅胶和葡聚糖凝胶Sephadex LH-20柱色谱、反相中压液相色谱、制备薄层色谱以及半制备高效液相色谱等分离技术,对川芎内生真菌发酵液的醋酸乙酯提取部位进行分离纯化,利用现代波谱学手段对分离的化学成分进行结构鉴定。结果从川芎内生真菌Alternaria sp. IS275代谢产物的醋酸乙酯提取部位分离得到1个新的内酯类化合物,鉴定为(+)-4,11-二羟基-2-十二烯-5-内酯。结论化合物1为首次从川芎内真菌中分离得到的新内酯化合物,命名为芎孢内酯A。     

Microbial competition, lack in macronutrients, and acidity as main obstacles to the transfer of basidiomycetous ground fungi into (organically or heavy-metal contaminated) soils

Non-symbiotic soil microorganisms which have been expensively engineered or selected to support plant nutrition, control root diseases, degrade xenobiotic hydrocarbons, and repress or stimulate heavy metal uptake of plants fail to survive in target soils. This prompted studies into the role of chemistry and microbial pre-colonization of 23 top soils in long-term growth of basidiomycetes. Fungi are seen as auxiliary agents in soil remediation. Untreated soils (1.5 L) were colonized by lignocellulose preferring ground fungi such as Agaricus aestivalis, A. bisporus, A. campestris, A. edulis, A. macrocarpus, A. porphyrizon, Agrocybe dura, A. praecox, Clitocybe sp., Coprinus comatus, Lepista nuda, L. sordida, Macrolepiota excoriata, M. procera, Stropharia coronilla, and S. rugoso-annulata. Spawn mycelia of fairy-ring-type fungi such as Agaricus arvensis, A. fissuratus, A. langei, A. lanipes, A. pilatianus, Lyophyllum sp., and Marasmius oreades died back in contact with non-sterile soils. Fungal growth correlated positively with the soils' Ct Ca K Mg content and negatively with microbial CO2 evolution. Pasteurization and autoclaving increased mycelial growth and life span in soils pH 6.6-8.2. Growth of pH-sensitive but not of pH-tolerant fungi was inhibited on the Ca-deficient soils pH 4-4.4 (-5.6) and was not improved by autoclaving. The pretended fungistasis of acid soils to pH-sensitive fungi was controlled by N P K mineral (pH not altering) or organic (pH increasing) fertilizing as well as by neutralization with NaOH or CaCO3. Although microbial competition was mortal to 33% of the fungal mycelia inserted into natural unplanted soils, further seriously antifungal effects beyond those pretended by low pH conditions and shortage in mineral macronutrients were not identified.     

曲霉菌对唑类抗真菌药物的耐药机制研究进展

侵袭性曲霉病是由致病曲霉菌引起的危及生命的真菌感染,主要致病菌为烟曲霉,而唑类抗真菌药物是临床治疗的首选。目前已上市的唑类抗真菌药物包括伊曲康唑,伏立康唑,泊沙康唑和伊沙康唑。然而,流行病学研究发现曲霉菌对唑类抗真菌药物的耐药率呈逐年上升趋势,给临床治疗造成了威胁。其中,Cyp51A蛋白突变、外排系统高表达以及环境耐药机制等多种因素都参与唑类抗真菌药物的耐药。因此,本文综述近年来有关曲霉菌对唑类抗真菌药物的耐药机制,以期为耐药监测、耐药菌控制和新药研发提供理论依据。     

基因组导向的丝状真菌沉默生物合成基因簇激活策略D

真菌是药物先导结构的重要来源,得益于基因组测序技术的飞速发展,生物信息学分析发现真菌中存在大量次级代谢产物基因簇。而这些基因簇在常规实验室培养条件下往往不表达代谢产物,被称之为“沉默”基因。同时,随着天然产物分离技术在日益进步,结构新颖的天然产物发现的几率却在减少。因此如何借助基因组数据分析并激活沉默的基因簇,“解密”天然产物的宝藏,挖掘真菌潜在的代谢潜能成为研究热点。本文主要介绍了基因组导向的丝状真菌沉默生物合成基因簇的激活策略。     

一株西沙来源软珊瑚共附生真菌Penicillium citrinum（15XS112ZM-18）次级代谢产物及其活性研究

目的 研究1株中国西沙群岛永兴岛海域短指软珊瑚Sinularia cf. molesta共附生真菌Penicillium citrinum (15XS112ZM-18)的次级代谢产物及其生物活性。方法 利用TLC、硅胶柱层析、Sephadex LH-20凝胶柱层析、MPLC、半制备HPLC等方法,对菌株代谢物进行分离纯化;通过1H NMR及13C NMR等波谱学方法,结合相关文献数据,鉴定化合物结构;通过细胞毒活性模型评价化合物抗肿瘤活性。结果 从真菌P. citrinum (15XS112ZM-18)代谢产物中分离得到8个化合物,分别为：penicillenol A1 (1),penicillenol A2 (2),penicillenol B1 (3),penicillenol B2 (4),sorbicillin (5),2",3"-dihydrosorbicillin (6),ergosterol (7)和25–Hydroxyergosta-4,6,8(14),22-tetraen-3-one (8),其中化合物4在30 μmol L-1浓度下对HL-60细胞的抑制率达到100%,其IC50值为22.97 μmol L-1。     

Isolation,characterization and antioxidant activities of the endophytic fungi from Hosta. Ventricosa

A total of 13 types of endophytic fungi, classified into six genera, were isolated from Hosta. ventricosa based on 18S rDNA sequencing of ITS region and microscopic examination. The antioxidant activities of the crude extracts were investigated by T-AOC, DPPH and ABTS⁺ methods. The results showed that the crude extracts from Fusarium oxysporum (HoV1) and Epicoccum (HoV4), which presented higher phenol levels (1.90±0.03 mg/g, and 2.41±0.01 mg/g, respectively), exhibited stronger comprehensive antioxidant activities, with higher T-AOC values (63.46±0.26 U/g, and 66.05±0.71 U/g, respectively), lower EC₅₀ values against ABTS⁺ (30.25±0.05 μg/mL, and 24.66±0.65 μg/mL, respectively)and DPPH radicals (83.42±0.24 μg/mL, and 59.136 μg/mL, respectively). Moreover, Fusarium oxysporum (HoV8) showed excellent scavenging activity against DPPH radicals (EC₅₀ = 16.02 μg/mL), which was better than BHT. All of them could be useful in the developing of new natural antioxidant agents.     

共生真菌对植物抗旱性的影响及机制研究进展

共生真菌分布广泛,与植物形成共生体。研究表明,某些共生真菌可以增强植物对生物胁迫和非生物胁迫,包括干旱、高温、矿物质失调和高盐的耐受性,从而使被内生真菌感染的植株比未感染植株对有限的资源更具竞争力而且生长得更好。植物共生真菌可以通过多样化途径来增强植物体的抗性机能,其提高抗旱性的机制主要表现在营养物质的吸收、植物的保护系统、激素调节、水解酶、水分代谢、相关基因表达、植物防御信号途径等方面。总结共生真菌提高植物耐旱性的机制研究进展,以使读者能全面、及时地了解这一领域的研究动态。     

基于高通量测序和化学轮廓分析研究黄连在连栀矾溶液发酵炮制中的作用

目的探究黄连Coptidis Rhizoma在连栀矾溶液传统发酵炮制中的作用。方法按照连栀矾溶液传统配方比例,将其拆分为3组配方溶液:连栀矾组(黄连+栀子+白矾)、黄连组(黄连+白矾)和栀子组(栀子+白矾),采用HPLC分析比较3组溶液发酵前后的化学成分变化轮廓,采用Illumina Hiseq高通量测序技术测定并比较发酵溶液中微生物的群落特征。结果传统配方连栀矾经发酵后环烯醚萜类成分发生了较显著的变化(P<0.05),生物碱类成分未发生明显变化,拆分后的黄连组中生物碱类成分和栀子组中环烯醚萜类成分均没有发生明显变化。分别对各组发酵溶液进行测序,根据α多样性分析结果,3组发酵液中真菌多样性为连栀矾组<栀子组<黄连组,真菌的丰富度为栀子组<连栀矾组<黄连组;细菌多样性为连栀矾组<黄连组<栀子组,细菌的丰富度为连栀矾组<栀子组<黄连组。根据β多样性分析结果,3组溶液中的真菌和细菌的群落结构均有明显差异。根据微生物相对丰度分析可知,3组的优势真菌均为子囊菌门、担子菌门和罗兹菌门,不同组间丰度无明显差异;真菌优势属中的孢霉属的丰度在连栀矾组最高,显著高于另外2组(P<0.05),栀子组又显著高于黄连组(P<0.05);韦斯特壳属的丰度在连栀矾组中最低,显著低于黄连组和栀子组(P<0.05),后两者间丰度无明显差异。3组的优势细菌均为变形菌门、厚壁菌门、放线菌门和拟杆菌门,其中连栀矾组中变形菌门的丰度极显著低于黄连组和栀子组(P<0.01),厚壁菌门的丰度在连栀矾组中极显著高于黄连组和栀子组(P<0.01),放线菌门和拟杆菌门的丰度在3组发酵溶液的差异较小;细菌优势菌属中的乳杆菌属在连栀矾组中显著高于黄连组和栀子组(P<0.05),在黄连组中也显著高于栀子组(P<0.05),伯克氏菌属丰度在黄连组和栀子组中无显著差异,都显著高于连栀矾组中的丰度(P<0.05)。结论连栀矾溶液配方中的黄连能提高其中栀子的有效成分的发酵转化,并且是通过对发酵体系中的优势菌属的丰度进行调节而发挥作用的。进一步佐证了传统配方制剂的合理性和科学性。     

双甲酸涂靶法对丝状真菌鉴定的临床应用评价

目的探讨双甲酸涂靶法对临床丝状真菌鉴定的应用价值,优化质谱仪对丝状真菌鉴定的前处理流程。方法收集2019年2月至2020年5月广东省人民医院临床分离丝状真菌212株,经形态学初筛并以基因测序为标准,评价双甲酸涂靶法及乙腈-甲酸提取法对菌株鉴定的一致性。结果 212株丝状真菌经基因测序至种、复合群、属的鉴定率分别为84.91%、100%、100%,经双甲酸涂靶法和乙腈-甲酸提取法鉴定至种、复合群、属的鉴定率分别为43.87%、91.04%、91.04%和45.75%、93.40%、93.40%。与测序法比较,双甲酸涂靶法和乙腈-甲酸提取法在种、复合群、属的鉴定Kappa值分别为0.022、0.421、0.421和0.056、0.536、0.536;双甲酸涂靶法与乙腈-甲酸提取法鉴定一致性比较,种、复合群、属水平Kappa值分别为0.880、0.726和0.726。结论双甲酸涂靶法前处理流程在丝状真菌的鉴定能力上与乙腈-甲酸提取法接近,可应用于临床丝状真菌的前处理质谱鉴定。