唾液中氰离子的五氟苄基溴衍生气相色谱法测定

目的 建立用五氟苄基溴(PFB-Br)衍生气相色谱法,电子捕获检测器(ECD)定量测定唾液中氰离子(CN^-)的方法。方法 取微量唾液,加入缓冲溶液后用乙腈稀释定容,加入定量的PFB-Br摇匀,沸水浴30.0 min进行衍生反应,冷却后直接进样入气相色谱仪分离,以ECD检测器检测。结果 唾液中CN^-的质量浓度在0.25~200.0 mg/L呈线性关系,线性相关系数为0.999 4;以100.0 μl唾液量计算,方法最低检出浓度为0.07 mg/L,最低定量浓度为0.25 mg/L;方法的批间精密度为2.4%~5.3%(n=6),批内精密度为1.1%~3.8%(n=6),加标回收率为100.7%~102.1%。唾液常见的无机离子Cl^-、F^-和SCN^-对测定结果均无干扰。样品可在4 ℃保存至少15 d。结论 该方法适用于唾液中氰离子测定,对氰化物中毒的应急检测有应用价值。     

柱前衍生HPLC法测定干髓糊剂中多聚甲醛的含量

目的:建立测定干髓糊剂中多聚甲醛含量的方法。方法:采用2,4-二硝基苯肼柱前衍生高效液相色谱法。色谱柱为Diamonsil C18(2),流动相为甲醇-水(60∶40,V/V),流速为1.0 ml/min,检测波长为355 nm,柱温为25℃。结果:多聚甲醛(以甲醛计)检测质量浓度线性范围为5.05²52.50μg/ml(r=0.999 7);精密度、重复性、稳定性试验的RSD均小于2%;平均加样回收率为99.12%,RSD=1.86%(n=9)。结论:建立的方法专属性强,结果准确可靠,可用于干髓糊剂中多聚甲醛的含量测定。     

柱前手性衍生化-反相高效液相色谱法拆分布洛芬对映异构体

目的：建立一种柱前手性衍生化-反相高效液相色谱紫外法检测布洛芬的异构体。方法：以N′N-羰基二咪唑（CDI）作为活化剂活化布洛芬的羧基基团,再以（R）-（+）-1-（1-萘基）乙胺（R-NEA）作为手性衍生化试剂进行反应。选用Kromasil C18色谱柱,流速1.0 mL·min-1,柱温30 ℃,以乙腈-0.05%磷酸（68∶32）为流动相,检测波长225 nm。结果：布洛芬的非对映异构体色谱峰的保留时间分别为25.6 min和27.9 min。结论：本方法操作简单,条件温和,衍生化产物稳定,且衍生化试剂价格便宜,更准确地实现了对布洛芬对映异构体的分离检测。     

柱后衍生化 -HPLC 法测定硫酸卡那霉素注射液 及滴眼液的含量

目的 新建硫酸卡那霉素注射液及滴眼液含量的高效液相色谱 - 柱后衍生化 - 荧光检测方法。方法 色谱柱为 Zorbax Eclipse Plus C18 (4.6mm×100mm, 3.5μm);流动相为 pH3.4 的缓冲液 ( 取庚烷磺酸钠一水合物 4.35g 和无水硫酸钠 16g,加水 溶解并稀释至成 1000mL,用冰醋酸调节 pH 值至 3.4±0.1)- 甲醇 (74:26);柱温为 35℃;流速为 1mL/min。柱后衍生化试液为邻苯 二甲醛溶液;流速为 0.3mL/min;衍生化反应温度为 45℃;荧光激发波长为 340nm,发射波长为 455nm。结果 卡那霉素 A 在 0.0973~583.8μg/mL 浓度范围内线性关系良好 (r=0.9999),硫酸卡那霉素注射液和滴眼液的平均回收率分别为 99.6% 和 99.3%, RSD 为 0.63% 和 0.66%(n=9)。结论 本方法检测灵敏度高,重复性好,简便快速,结果准确可靠,可作为硫酸卡那霉素注射液 及滴眼液的含量测定方法。     

A high‐throughput LC‐MS/MS screen for GHRP in equine and human urine,featuring peptide derivatization for improved chromatography

The growth hormone releasing peptides (GHRPs) hexarelin, ipamorelin, alexamorelin, GHRP‐1, GHRP‐2, GHRP‐4, GHRP‐5, and GHRP‐6 are all synthetic met‐enkephalin analogues that include unnatural D‐amino acids. They were designed specifically for their ability to stimulate growth hormone release and may serve as performance enhancing drugs. To regulate the use of these peptides within the horse racing industry and by human athletes, a method is presented for the extraction, derivatization, and detection of GHRPs from equine and human urine. This method takes advantage of a highly specific solid‐phase extraction combined with a novel derivatization method to improve the chromatography of basic peptides. The method was validated with respect to linearity, repeatability, intermediate precision, specificity, limits of detection, limits of confirmation, ion suppression, and stability. As proof of principle, all eight GHRPs or their metabolites could be detected in urine collected from rats after intravenous administration. Copyright © 2014 John Wiley & Sons, Ltd.     

柱前衍生-反相高效液相色谱法测定转移因子胶囊中游离氨基酸

目的用柱前衍生-反相高效液相色谱法测定转移因子胶囊中游离氨基酸的含量。方法采用二硝基氯苯(DNCB)为衍生试剂进行衍生,Waters Novapak C8(3.9 mm×150 mm,4μm)色谱柱分离,以乙腈-乙酸钠水溶液为流动相,梯度洗脱,检测波长360 nm,在65 min内,测定各氨基酸含量。结果回收率为97.5%~103.5%,RSD为0.7%~3.0%。结论DNCB柱前衍生-反相高效液相色谱法可测定转移因子胶囊中游离氨基酸的含量。     

人血清中环境雌激素的柱前荧光衍生-高效液相色谱测定法

目的建立对硝基苯甲酰氯柱前荧光衍生-高效液相色谱法同时测定人血清中环境雌激素双酚A、壬基酚、17α-乙炔基雌二醇以及内源性雌激素雌三醇、17α-雌二醇和17β-雌二醇的方法。方法血清样品经乙腈沉淀蛋白后,用乙醚萃取游离态雌激素,N2气流挥干、在无水条件下,雌激素与对硝基苯甲酰氯反应生成荧光产物,用高效液相色谱法定量。结果该法线性范围上限可达1.0×104μg/L,检测限为2.7~8.3μg/L,加标回收率范围为72.6%~98.6%。方法精密度为1.29%~4.52%。结论应用该法对10份血清样进行了测定,结果满意,该方法有应用推广价值。     

反相高效液相色谱－紫外吸收法测定灵芝中氨基酸的含量

采用本实验室自行制备的反相高效液相色谱柱，以醋酸钠缓冲液和乙腈－水线性梯度洗脱，在室温下对常见的１６种１－氟－２，　４－二硝基苯（ＦＤＮＢ）衍生化氨基酸进行了有效的分离，用紫外吸收检测器（３６０ｎｍ）和外标定量法对灵芝蛋白中各种氨基酸的含量进行了测定。结果表明：ＦＤＮＢ衍生化氨基酸在一周内是稳定的，回收率在９６％～１０２％之间，相对标准偏差小于４％，灵芝中含有人体必需的赖氨酸、苯丙氨酸和组氨酸等组分。     

高效液相色谱法测定牛磺酸中主药及有关物质的含量

目的:建立测定牛磺酸中主药及有关物质含量的方法,并与《中国药典》(药典)方法和《美国药典》(USP)方法比较。方法:色谱柱为C18,柱前衍生化试剂为2,4-二硝基氟苯,流动相为乙腈-水-磷酸盐缓冲液(pH=7.0,20∶10∶70),检测波长为360nm,以峰面积外标法计算。结果:牛磺酸进样量在1.0μg~3.0μg范围内线性关系良好(r=0.9 999),平均回收率为99.80%(RSD=0.21%),衍生物在24h内稳定性良好(RSD=0.61%),最低检出量为0.02ng,比较得出本法与药典法和USP法测定的含量结果基本一致。结论:本方法简便、快速,灵敏度高,重现性好,结果准确、可靠。     

糖类物质的色谱分析

综述了糖类化合物的色谱分离和检测的方法，包括气相色谱、高效液相色谱和毛细管电泳，主要对糖类化合物衍生方法进行了较为详细的介绍。