快速大量分离血浆低密度脂蛋白亚组分的方法

目的 :研究快速大量分离低密度脂蛋白亚组分的方法。方法 :通过2步超速离心法分离LDL亚组分 ,并用电泳法及电镜观察鉴定2种亚组分。结果 :仅用10h就将LDL亚组分分开 ,并证实经分离的2种亚组分为纯品。结论 :本方法是1种分离LDL亚组分较好方法     

梯度胶电泳法测定冠心病患者血浆小密低密度脂蛋白

目的 建立实用的小密低密度脂蛋白(sdLDL)测定方法, 观察冠心病患者血浆中sdLDL和脂类成分的变化及相互关系。方法 采用2%～16%非变性聚丙烯酰胺梯度胶电泳和凝胶成象分析系统, 测定了105名冠心病患者和90名健康对照者血浆sdLDL、 血脂。结果 sdLDL＞50%的检出率, 冠心病组为38.1%, 对照组为11.1%(P＜0.01);sdLDL增多患者的甘油三酯水平(2.43±1.22) mmol/L明显高于sdLDL正常者(1.46±0.64) mmol/L, P＜0.01。结论 sdLDL与冠心病发生发展有关, 且与甘油三酯关系密切;sdLDL测定可作为预测冠心病危险性的指标之一。     

胰岛素样生长因子Ⅰ的抗心肌细胞凋亡作用

研究了缺氧条件下引起培养的乳鼠心肌细胞凋亡及IGF－Ⅰ的抗凋亡作用。将原代培养的心肌细胞置于95%N     

蝎毒抗癌多肽及其分离组分分析及鉴定方法

目的 :探讨蝎毒抗癌多肽 (antineoplasticpolypeptidefromButhusmartensiivenom ,APBMV)及其分离组分的分析及鉴定方法。方法 :采用SepharoseFF阳离子交换凝胶柱 (2 5cm× 5cm交换柱 ,流速 0 .8ml/min ,梯度洗脱 12 0 0min)层析法分离APBMV ,用高效毛细管电泳 (highperformancecapillaryelectrophoresis,HPCE)及高效液相色谱法 (highperformanceliquidchromatography ,HPLC)分析检测。结果 :用SepharoseFF阳离子交换凝胶层析可将APBMV分离为 2个峰。经HPCE、HPLC分析显示 ,APBMV主要成分为峰Ⅰ～Ⅳ ,其分离组分分别以峰Ⅰ或峰Ⅲ为主 ,其纯度分别为86 .35 %、6 9.5 7%。结论 :SepharoseFF用于进一步分离APBMV可望获得较高纯度的单一有效成分 ,HPCE及HPLC均可较好地显示蝎毒中小分子多肽的组成及相对含量 ,其结果基本一致     

前列腺雄激素受体亚型的表达及在前列腺内外带的分布

研究雄激素受体(AR)亚型在前列腺组织中的表达及内外带分布。方法采用聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳(IEF)技术,检测了前列腺组织标本20例。结果前列腺组织有3种AR亚型,等电点(PI)分别在6.5、6.0和5.3,3种亚型均表达13例,占65％,所有标本均表达PI6.5亚型;前列腺内带和外带均有3种亚型表达,个体间存在差异;定量分析表明,前列腺内外带AR含量,外带高于内带,但无统计学意义(P>0.05),PI6.0亚型浓度在外带明显高于内带(P<0.05)。结论前列腺AR存在亚型并且具有带性分布特征。     

PCR-SSCP中聚丙烯酰胺凝胶电泳及银染法的探讨

聚丙烯酰胺凝胶电泳 (PAGE)是聚合酶链反应 -单链构象多态 (PCR- SSCP)分析中不可缺少的技术 ,多用于单链DNA碱基移位、插入或缺失等基因变异情况的筛查。电泳后的凝胶通常是用同位素标记 -放射自显影、溴化乙锭或银染色法染色处理 ,其中以敏感性高、操作简便、安全无毒的银染法广泛应用于各室验室 ,但在实践中发现各种不同的凝胶电泳法和银染法各有其优缺点 [1 ,2 ] ,在此基础上笔者摸索和总结一种结果明显、条带清楚的聚丙烯酰胺凝胶电泳及银染法用于 PCR- SSCP分析 ,使 PCR- SSCP分析结果敏感、可靠 ,可供同道参考。1　材料…     

毛细管区带电泳测定尿17-羟皮质类固醇

目的 :应用高效毛细管区带电泳 (CZE)技术分离和检测人尿内 1 7-羟类皮质类固醇 (1 7-OHCS) ,以解决微色谱柱 -分光光度测定尿 1 7-OHCS时 ,多酚类化合物对测定的干扰。方法 :标本用活性高岭土吸附尿内色素 ,以茶碱作内标 ,中性苯乙烯 -二乙烯苯树脂微色谱柱吸附尿中 1 7-OHCS。乙醇解吸附 ,采用毛细管区带电泳进一步分离并测定。结果 :运用CZE法分离了人尿 1 7-OHCS ,皮质醇浓度在 2～ 5 0mg .L- 1 范围内具有良好的线性关系 (r=0 .994) ,方法平均回收率 96 .1 7% ,日内及日间CV均小于 5 % ,最低检测限度为 0 .3mg .L- 1 。结论 :与微色谱柱 -分光光度法相比 ,CZE法检测尿内 1 7-OHCS无干扰 ,方法简便、快速、可靠。     

脉冲场电泳进行E.coli O157的分型

E.coli O157是一种新型的致病性大肠杆菌,其感染已成为世界性卫生问题。药敏、质粒图谱分析、多位点酶电泳和噬菌体分型[1]等被用于E.coliO157的分型,以确定不同菌株之间的关联性,用于传染源的追踪和传播途径的探讨。但这些方法在一定情况下使用,尚不能有效地用于所有暴发流行事件的调查。脉冲场冲泳(pulse field gel electrophoresis,PFGE)是80年代初建立的一种基因分析技术,已成功地用于一些病原体的分子流行病学调查[2]。我们对药敏、质粒图谱、PFGE用于E.coli O157分型的分子流行病学研究进行初步探讨。材料和方法菌株E.coli O157产毒株(933 w/o,VT+)、非产毒株(882364,VT-)由中预防医学科学院提供,4株E.coli O157 VT+菌从上海地区牛肉中分离(SH3、SH4、SH7、SH9)。     

2018年烟台市同期五起伤寒病原学研究及溯源分析

目的分析烟台市5起伤寒病原学特征及分子流行病学关联。方法2018年自烟台市5例伤寒确诊病例样本和流行病调查样本分离获得6株伤寒沙门菌菌株,病例发病时间自2018年5月26日至7月24日,分别分布于烟台牟平区水道镇、烟台蓬莱区登州街道、烟台龙口东莱街道、烟台牟平区文化街道、烟台芝罘区福莱山街道。采用常规细菌分离方法和XbaⅠ/BlnⅠ双酶切脉冲场凝胶电泳(PFGE)技术对伤寒杆菌进行溯源分析,同时开展viaB毒力基因检测和27种临床常用抗生素敏感试验对伤寒杆菌进行病原学研究。结果6株伤寒杆菌经PFGE-XbaⅠ和PFGE-BlnⅠ电泳分为4个PFGE模式,其中3株菌同源性100%;1株多耐药菌(外籍患者),1株单耐药菌(外省滞留史患者),1株完全敏感菌,同一PFGE模式的3株菌药敏表型一致,除对氨基糖甙类和喹诺酮类部分抗生素中介外,对其他抗生素均敏感;除外籍患者标本分离株viaB基因阴性外,其他菌viaB基因均阳性。结论烟台寒杆菌对临床常用抗生素敏感性良好,仍需重视伤寒散发病例发生和伤寒输入感染。