鼻咽癌成纤维细胞分泌性蛋白质的变化分析

目的 建立细胞分泌性蛋白质组学研究方法,分析鼻咽癌形成过程中成纤维细胞分泌蛋白的变化特征.方法 分别收集5份鼻咽癌和正常鼻咽组织标本,无血清培养成纤维细胞,收集细胞上清液,超滤法脱盐并浓缩上清液中分泌性蛋白,运用双向凝胶电泳(2-DE)技术建立分泌性蛋白表达图谱;并用比较蛋白质组学方法分析2组成纤维细胞分泌蛋白的差异,基质辅助激光解析飞行时间质谱分析鉴定差异蛋白;ELISA分析2组细胞上清液中半乳糖凝集素1的表达.结果 用自建细胞分泌性蛋白2-DE图谱,从2组细胞上清液中筛查出表达差异大于2倍的蛋白质点18个,质谱分析鉴定出11个分泌性蛋白;其中半胱氨酸蛋白酶抑制剂C、补体组分Cls前体、不均一性核糖核蛋白Al在鼻咽癌间质成纤维细胞(CAFs)上清液中表达下调,而其余8个包括半乳糖凝集素1、14-3-3sigma蛋白、组织蛋白酶L等分泌性蛋白在CAFs上清液中表达上调;2组细胞上清液中半乳糖凝集索1分别为(4.95±0.76)ng/ml、(9.90±0.36)ng//ml(CAFs组),二者差异有统计学意义(P＜0.05).结论 鼻咽癌形成过程中成纤维细胞分泌性蛋白的变化涉及细胞信号转导、蛋白合成与降解等途径,CAFs可能通过上述途径调控肿瘤微环境,影响鼻咽癌的发生、发展、侵袭转移;这为今后分泌组学研究奠定了实验基础.     

吲哚美辛抗人结肠癌细胞系HCT116的功能蛋白质组研究

目的　探讨吲哚美辛 (IN)对人结肠癌细胞系HCT116蛋白质表达谱的影响及其抗结肠癌的作用机制。方法　应用固相 pH梯度双向凝胶电泳 (2 DE)技术分离IN治疗组和对照组HCT116细胞的总蛋白 ,银染显色 ,采用ImageScan扫描获取电子图像 ,ImageMaster 2D图像分析软件分析 2组的2 DE图谱并识别差异表达的蛋白质。应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 (MALDI TOF MS)得到相应的肽质量指纹图谱 ,分析并鉴定差异蛋白质。结果　获得了背景清晰、分辨率高、重复性好的HCT116细胞系 2 DE图谱 ,对照组蛋白质点数为 12 99± 5 5 ,其匹配率为 94 .2 % ;IN治疗组蛋白质点数为 12 0 8± 4 7,其匹配率为 91.0 %。两组共有 4 5个差异蛋白质点 ,其中 ,治疗组有 9个蛋白质点表达上调 ,34个蛋白质点表达下调 ,2个蛋白质点仅在对照组表达。对差异蛋白质点进行了肽质指纹图分析发现 ,IN可通过BfL 1蛋白诱导HCT116细胞凋亡 ,并鉴定出一些与细胞凋亡、细胞周期及信号转导相关的蛋白质。结论　IN可通过BfL 1等多种途径诱导HCT116细胞的凋亡并抑制其增殖。     

新型肿瘤电场治疗仪治疗复发脑胶质母细胞瘤的前瞻性、单中心、单臂探索性临床试验方案

多形性胶质母细胞瘤（GBM）是原发性脑肿瘤中恶性程度最高的一种肿瘤,不但进展迅速且预后极差。肿瘤电场治疗（TTF）已被批准用于治疗GBM且具有良好的疗效。但是,尚无有关中国GBM患者采用TTF治疗的临床资料。该文报告一项复发性GMB的前瞻性、单中心、单臂探索性临床试验方案。该试验采用笔者开发的新型肿瘤电场治疗系统ASCLU-300,对参加者进行治疗。主要是评价该治疗系统的安全性和可行性。通过评估与治疗相关不良反应的患者人数,及根据进展时间（TTP）和总生存期（OS）来评价治疗反应;根据神经肿瘤治疗反应评价(RANO)标准进行评估,通过对比MRI检查确定TTP,并通过随访收集OS数据;与治疗相关的不良反应评估将基于描述性方法;通过Kaplan-Meier方法评估TTP和OS。这项初步研究将为进一步的大规模试验打下坚实基础,同时笔者希望新型肿瘤电场治疗系统能够有效治疗GBM,为中国GBM患者提供新的治疗方案。（临床试验注册：NCT0441793;于2020年6月8日注册。）     

不同转移潜能鼻咽癌细胞株的差异膜蛋白质组研究

目的:采用定量蛋白质组学技术筛选鼻咽癌转移相关的膜蛋白质。方法:在富集高转移鼻咽癌细胞株5–8F和不转移鼻咽癌细胞株6–10B膜蛋白质的基础上,采用稳定同位素18O标记结合串联质谱技术比较两株细胞膜蛋白质组的差异,采用Western印迹对差异表达膜蛋白质EphA2的表达水平进行验证,采用生物信息学方法对差异蛋白质进行GO(gene oncology)功能聚类和全基因组及代谢途径数据库(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)信号通路分析。结果:鉴定了31个5–8F与6–10B细胞的差异膜蛋白,其中25个蛋白质在5–8F中表达上调、6个蛋白质表达下调,Western印迹技术验证了差异膜蛋白质EphA2的表达。生物信息分析显示,差异膜蛋白的功能主要涉及细胞黏附、受体再循环和细胞连接等生物学过程,并参与了14个KEGG通路,其中许多通路涉及细胞黏附、细胞连接以及细胞运动。结论:31个差异膜蛋白质可能在鼻咽癌转移过程中发挥重要作用,为进一步研究鼻咽癌转移的分子机制提供了新线索。     

细胞移植及其在耳蜗疾病中的应用

本文综述了近年来体细胞移植技术在心脏、中枢神经系统、内分泌系统、肝脏疾病中应用,阐述了内耳体细胞移植技术的可行性与存在的问题,提出了细胞移植技术对耳聋防治可能具有广阔的应用前景.     

人工股骨头置换术108例疗效观察

采用钛合金，钴铬钼材料制作的单、双极人工股骨头、对１０８例股骨颈骨折患者进行了人贡股骨头置换术，手术后进行随访，并根据“髓关节人工置换术效果等级评定标准”进行疗铲评估。结果１０８例中４￣６级９７例，治疗满意率为８９．６％，术后各类并发症３２例，占２９．６％，因此认为，人工股骨头置换术仍是目前治疗老年股骨颈肌折较理想的方法之一。     

Kank1基因在鼻咽癌中的表达及意义

目的检测Kank1基因在鼻咽癌（NPC）细胞与组织中的表达,探讨其在NPC发病中的作用。方法采用半定量RT．PCR技术,分别检测4株NPC细胞（CNE1、CNE2、5—8F和6—10B）及永生化鼻咽上皮细胞株NP6972．22例NPC患者Kank1基因的表达,并与11例非癌对照组人群进行比较。结果Kank1基因在NPC细胞中表达降低,NPC患者Kank1的表达率显著低于对照组（P〈0．05）。结论Kank1基因表达可能在NPC发病机制中具有重要意义。     

RKIP在鼻咽癌侵袭转移中的作用及机制研究

目的:研究Raf激酶抑制蛋白(Raf kinase inhibitory protein,RKIP)在鼻咽癌(nasopharyngeal c a r c i n o m a,N P C)侵袭转移中的作用及其机制。方法:采用免疫组织化学染色检测R K I P在转移潜能不同的NPC组织中的表达,分析其表达水平与NPC临床病理特征和患者预后的关系;采用脂质体转染技术建立RKIP表达改变的稳定转染NPC细胞系,采用刮痕愈合实验和Transwell小室侵袭实验检测细胞的体外运动和侵袭能力,采用Western blot检测NF-κB信号分子磷酸化水平。结果:RKIP在NPC组织中的表达显著低于正常鼻咽粘膜组织,在有转移NPC组织中的表达明显低于无转移NPC组织,在颈淋巴结转移癌组织中的表达明显低于原发癌;RKIP表达水平与NPC的淋巴结转移、远处转移、临床分期以及NPC患者的总生存期负相关;RKIP表达上调降低5-8F NPC细胞的体外运动和侵袭能力,而RKIP表达下调增强6-10B NPC细胞的体外运动和侵袭能力;RKIP表达水平与NPC细胞NF-κB信号通路的活性负相关,NF-κB抑制剂Bay11-7082能抑制RKIP下调的6-10B细胞的体外运动和侵袭。结论:RKIP可能是NPC的一个转移抑制蛋白,RKIP低表达的NPC患者预后差,RKIP表达下调通过活化NF-κB通路促进NPC的侵袭和转移。     

阻塞性肺气肿并自发性气胸67例临床分析

自发性气胸(简称气胸)是内科常见急症,阻塞性肺气肿为其常见病因。本文回顾性分析1992年2月至2001年3月我院收治的67例阻塞性肺气肿并自发性气胸的临床特点,旨在能早期正确诊治,减少误诊、漏诊,现报告如下:     

颅眶沟通性支气管源性囊肿一例

患者 男,66岁.左眼视力进行性下降2个月入院.查体:左眼睑下垂,眼裂小,眼球内上方眶内可扪及一质韧光滑的肿物,眼球受推挤而轻度向左外下方斜视,各方向活动稍受限,双瞳孔直径2.5 mm,光反射灵敏.视物重影,辐辏反射差,视力0.2.头颅CT示左前颅底及眶内椭圆形等密度肿物,眶壁破坏,挤压左眼球,周围无水肿.头颅MRI示:左前颅底及眶内椭圆形肿物,等T1长T2信号,冠状位见肿瘤自颅内突入眶内,增强扫描未见明显强化.术前拟诊:表皮样囊肿.