TaqMan PCR技术同步检测沙眼衣原体及肺炎衣原体的DNA

我们自行设计了针对沙眼衣原体、肺炎衣原体的特异性引物、Taq Man荧光探针,对这2种病原体核酸进行双重扩增荧光探针杂交检测,取得满意结果。     

定量测定硫酸软骨素的双抗体夹心ELISA的建立

目的建立定量测定硫酸软骨素(CS)的双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA),并对其应用价值进行初步评价。方法以CS为抗原分别免疫Balb/c小鼠和日本大耳白兔,制备2种动物的多克隆抗体。用鼠抗体包被微孔板,兔抗体为第2抗体,辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗兔抗体为标记抗体,建立双抗体夹心ELISA,并对线性范围、精密度、回收率和方法学比较进行了评价。结果本研究建立的ELISA线性范围为2～500 mg/L,批内和批间精密度分别为4.48%和5.97%,回收率在99.52%～101.77%之间,与间苯三酚分光光度法测定结果具有良好的相关性(r=0.999 0,P<0.05)。结论建立的定量测定CS的双抗体夹心ELISA具有敏感性高、重现性好等优点,适合检测应用。     

GC/MS法分析煤焦沥青加热烟气提取物成分

目的 分析煤焦沥青加热烟气提取物的成分.方法 用粉尘采样器采集煤焦沥青加热300和400℃的挥发烟气,包括大颗粒和大小颗粒混合物,溶解于二甲基亚砜(DMSO)溶液,并应用气相色谱/质谱(GC/MS)联用技术,利用NIST谱库对4组主要成分进行分析.结果 4组成分主要包括多环芳烃类(PAHS)、杂环类、单环芳烃类和脂环族...     

纳米氧化锌对大鼠血脂和血清炎症因子水平的影响

目的:探讨纳米氧化锌对动脉粥样硬化发生发展的影响机制。方法:40只雄性Wistar大鼠随机分为对照组和纳米氧化锌低、中、高剂量组,每组10只。纳米氧化锌低、中、高剂量组大鼠分别用1.25、2.50、5.00mg/kg的纳米氧化锌悬浮液气管灌注染毒,对照组大鼠同法灌注PBS溶液(1mL/kg),每周1次,共12周;染毒结束后测定各组大鼠体质量、血清总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和血红素加氧酶-1(HO-1)水平。结果:随染毒时间延长,染毒大鼠逐渐出现毛发蓬松,活动减少,精神状态差,生长缓慢等体征。各组大鼠血清HDL、LDL、TNF-α、HO-1、TC水平比较差异有统计学意义(F=32.410、34.600、23.957、38.519、32.652,P<0.001)。纳米氧化锌中、高剂量组大鼠血清TC、LDL、HO-1、TNF-α水平均高于对照组(P<0.05);纳米氧化锌低、中、高剂量组大鼠血清HDL水平均低于对照组(P<0.05)。结论:纳米氧化锌可引起大鼠血清脂代谢紊乱和炎症因子释放,可能导致动脉粥样硬化的发生发展。     

高效毛细管电泳-单链构象多态性分析K-ras基因突变

Lung cancer is one of the most prevalent cancers and the leading cause of cancer mortality in the world. It is of great importance to study mutation of gene related to lung cancer. Mutations in cellular ras gene have been strongly implicated in various stages of mammalian tumorigenesis. In human tumors, the point mutations which have been identified have largely been localized to codon 12,13 or 61 of three ras genes : H-ras, K-ras and N-ras.     

非小细胞肺癌中WWOX蛋白及ErbB2蛋白的联合检测

 目的 探讨WWOX(WW domain-containing oxidoreductase)基因在非小细胞肺癌组织中的表达及与ErbB2蛋白之间的关系。 方法 用免疫组化方法检测50例肺鳞癌，31例肺腺癌及20例癌旁正常组织中WWOX基因蛋白的表达，并分析其与各临床病理指标及ErbB2蛋白之间的相关性。 结果 WWOX基因在72.8%的非小细胞肺癌中失表达或表达减少，而在癌旁正常组织中有80.0%正常表达。WWOX基因的表达与组织类型、细胞分化程度密切相关（P<0.05），在鳞癌和低分化癌中WWOX基因失表达或表达减少的发生率更高。肺癌中ErbB2的过度表达与肺癌的临床分期、淋巴结转移相关，WWOX蛋白阳性表达与ErbB2负相关(r=–0.239，Ｐ<0.05)。 结论 WWOX蛋白的低表达与ErbB2的过表达可以协同判断预后较差的非小细胞肺癌。     

沥青对人体细胞遗传学效应的研究

采用人体外周血淋巴细胞染色体畸变和微核两项试验对沥青接触者进行细胞遗传学效应研究,结果表明,染色体畸变率和微核检出率接触者均比非接触者高,经泊松检验P<0.01,差异有非常显著意义,说明沥青可导致染色体损伤。但48例的染色体与微核检测的配对卡方检验,X~2=7.84,P<0.01,说明微核检测方法不及染色体检测灵敏。本文还对吸烟者和不吸烟者的染色体畸变分析进行了比较,结果表明,不论在接触组和非接触组中差异均无显著性意义,P>0.05。     

气管内灌注煤焦沥青诱发大鼠肺癌的实验观察

本实验以大鼠为对象,采用气管注入法,观察不同剂量煤焦沥青(CTP)诱发大鼠肺癌的强度及其对生物膜损伤,细胞免疫功能和细胞遗传学效应等方面的影响,结果表明:CTP 诱发大鼠肺癌与染毒剂量相关,同时还观察到CTP 可引起大鼠GSH-PX、CAT 活性下降,LPO 作用增强,淋巴细胞数、ANAE 及PN 明显下降,微核检出率明显增高,与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05或0.01).     

XRCC1基因G28152A多态与肺癌风险的研究

背景与目的 :研究碱基切除修复基因XRCC1基因G28152A单核苷酸多态与肺癌风险的关系。材料与方法 :以病例_对照研究方法 ,采用聚合酶链反应一限制性片段长度多态性法检测肺癌病例(n=149)和按性别、年龄频数匹配的正常对照(n=157)XRCC1基因G28152A多态 ,分析各基因型与肺癌易感性的关系。 结果 :肺癌患者中 ,XRCC1基因28152AA突变基因型频率为15.4 % ,高于对照组7.6 % ;此基因型个体发生肺癌风险是其他基因型个体的2.2倍(95 %CI1.06～4.61)。 结论 :XRCC1基因G28152A多态可能在肺癌发生中起一定作用。     

煤焦沥青烟提取物致BEAS-2B恶性转化细胞中姊妹染色单体分离相关蛋白的改变

目的 通过检测姊妹染色体凝集和分离相关蛋白染色体结构维持蛋白(SMC)1、SMC3、分离酶(Separase)和保全素(Securin)在煤焦沥青致BEAS-2B癌变细胞中的变化,探讨其在煤焦沥青接触者肺癌发生中的作用.方法 用中温煤焦沥青烟提取物作为诱导剂,建立永生化人支气管上皮细胞BEAS-2B的恶性转化模型,用实时定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测相关基因的mRNA表达水平;细胞爬片免疫组化半定量法检测其蛋白表达改变.以二甲亚砜(DMSO)溶剂组和未染毒的正常传代的BEAS-2B细胞为对照组.结果 与正常对照组和DMSO溶剂对照组比较,煤焦沥青烟提取物诱导转化细胞中,SMC1基因和蛋白表达水平的差异无统计学意义(P＞0.05);煤焦沥青烟诱导组SMC3和Separase的基因和蛋白表达水平明显升高(基因:SMC3:2.54±0.20、Separase:2.42±0.22,蛋白:SMC3:0.27±0.02、Separase:0.25±0.02),Securin的基因和蛋白表达水平明显降低(基因:0.30±0.04,蛋白:0.17±0.01),与其他两组(DMSO溶剂对照组:基因:SMC3:1.13±0.12、Separase:1.00±0.04、Securin:0.90±0.11,蛋白:SMC3:0.10±0.03、Separase:0.18±0.02、Securin:0.22±0.02;正常对照组:基因:SMC3:1.00±0.11、Separase:1.00±0.08、Securin:1.00±0.11,蛋白:SMC3:0.09±0.01、Separase:0.18±0.01、Securin:0.23±0.02)相比,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 在煤焦沥青致支气管上皮细胞恶性转化过程中,姊妹染色单体凝集和分离相关蛋白SMC3和Separase升高,Securin表达水平降低,参与了细胞恶性转化过程.