骨髓间充质干细胞通过其分泌的外泌体促进髓核细胞增殖的实验研究

目的:探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)旁分泌外泌体(exosomes)对髓核细胞的影响。方法:提取并培养骨髓间充质干细胞,通过Exo Quick提取细胞培养液中exosomes,用电镜、nanosight、免疫印迹(western blot)进行鉴定。采用细胞增殖计数(CCK-8)检测髓核细胞的增殖。通过RT-PCR法检测髓核细胞中基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、基质金属蛋白酶-3(MMP-3)及抑制物蛋白(TIMP-1)的mRNA水平。结果:成功提取大小在200nm以下BMSCs分泌的exosomes颗粒,其表达CD63及TSG101蛋白。BMSCs分泌的exosomes能够明显促髓核细胞的增殖,且受刺激后髓核细胞内MMP-1、MMP-3表达水平下降,而TIMP-1表达水平升高。结论:骨髓间充质干细胞来源exosomes能够促进髓核细胞增殖,降低髓核细胞的老化,缓解椎间盘组织的退化。     

翁连解毒汤治疗浊毒内蕴型溃疡性结肠炎的疗效观察

目的：探究翁连解毒汤治疗浊毒内蕴型溃疡性结肠炎（Ulcerative Colitis，UC）临床疗效及可能的作用机制。方法：选取2016年2月至2018年12月在攀枝花学院附属医院收治的浊毒内蕴型UC患者130例作为研究对象，按照入院先后顺序分为对照组和观察组，每组65例。对照组常规西医治疗，观察组加用翁连解毒汤，观察2组治疗前、完成治疗后T细胞、NK细胞、炎性反应因子、凝血功能、生命质量变化，完成治疗后总结疗效。结果：观察组患者在NK细胞、T淋巴细胞组成、CR、TNF-α、IL-1 β、ESR、内毒素、IL-10、FIB、PLT、APTT改善方面的效果较对照组更优，组间差异有统计学意义（P<0.05）。观察组患者完成治疗后的生命质量量表各维度评分及总评分改善效果优于对照组患者（P<0.05），且临床总有效率和组织病理学疗效率均高于对照组患者（P<0.05）。结论：翁连解毒汤能抑制浊毒内蕴型UC炎性反应，改善高凝状态，提高机体免疫功能，从而提高疗效和生命质量。     

长期负性情绪应激对D-gal大鼠认知功能及海马NR2B基因甲基化表达的影响

目的探讨长期负性情绪应激对大鼠脑老化进程的影响机制。方法将雌雄各半的70只Wistar大鼠分别采用随机方法,分为空白对照组、D-gal脑老化模型组、应激脑老化组,每组14只且雌雄各半,其余大鼠做为攻击鼠参与负性情绪应激的诱导;采用颈后部皮下多点注射D-gal 0.1g/(kg·d)制备脑老化大鼠模型;采用不可预知性刺激,诱导应激脑老化组大鼠长期负性情绪应激;采用Morri′s水迷宫实验记录大鼠水下寻台时间(SPL),评价大鼠学习记忆功能;采用ELISA测定大鼠血浆促肾上腺皮质激素(ACTH)和皮质酮(CORT)含量;采集大鼠海马样本制备匀浆,采用甲基化特异性PCR法(MSP)检测海马N-甲基-D-天门冬氨酸受体-2B亚型(NR2B)基因调控区胞嘧啶-磷酸-鸟嘌呤位点(CpG)甲基化程度,采用ELISA法测定甲基化转移酶1(DNMT1)活性。结果与D-gal脑老化模型组比较,应激脑老化组大鼠的SPL明显延长,NR2B基因启动子区CpG甲基化程度及DNA DNMT1活性显著增高(P0.05),血浆CORT、ACTH水平显著升高(P0.05)。结论长期情绪调节不良能够加速机体大脑老化进程,其机制可能与慢性情绪应激引发机体特定基因甲基化程度增高有关。     

慢性鼻-鼻窦炎伴与不伴鼻息肉患者临床特征的比较

目的　比较慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉（chronic rhinosinusitis with nasal polyps，CRSwNP）与不伴鼻息肉（chronic rhinosinusitis without nasal polyps，CRSsNP）的临床特征，为制定合理治疗策略提供依据。方法　回顾性分析2018年11月～2019年12月住院手术的苏皖地区225例慢性鼻-鼻窦炎（CRS）患者术前血常规、血生化、血清总IgE（total IgE，tIgE）、特异性IgE（specific IgE，sIgE）、鼻窦CT及术后病理检查等临床资料，进行统计学分析。结果　225例中，CRSwNP组148例（65.8%），CRSsNP组77例（34.2%）。患者的性别、年龄、住院时间、外周血白细胞及分类、血生化指标在两组间差异无统计学意义（P >0.05）。CRSwNP和CRSsNP患者中至少1种变应原阳性分别占34.5%和40.3%，其中尘螨过敏最多见，阳性率分别为23.0%和26.0%，两组间差异均无统计学意义（P >0.05）。血清tIgE阳性率、20种变应原sIgE浓度等级和阳性率、吸入性及食物性变应原阳性率在两组间差异也均无统计学意义（P >0.05）。鼻窦CT扫描Lund-Mackay评分中，两组各鼻窦、窦口鼻道复合体及CT总分CRSwNP组都高于CRSsNP组，差异均有统计学意义（P <0.05）。在病理组织中，两组患者淋巴细胞及浆细胞浸润均为60%以上，但嗜酸性粒细胞（Eos）在CRSwNP组的阳性率为43.2%，显著高于CRSsNP组的阳性率22.1%，差异有统计学意义（P <0.05）。结论　本地区CRS患者目前仍以淋巴细胞/浆细胞性炎症为主，但CRSwNP息肉组织中Eos阳性率达43.2%，需引起重视并进一步关注。CRSwNP和CRSsNP患者变应原阳性率分别为34.5%和40.3%，两者无明显差异，尘螨为主要致敏原。     

炎症性肠病患儿血清Th17相关细胞因子表达及其意义

目的　探讨儿童IBD患者血清中Th17相关细胞因子的表达水平及其临床意义。方法　收集2017年4月至2019年5月在西安交通大学附属儿童医院消化科住院治疗的儿童IBD患者40例，以同期21例非炎症性疾病儿童作为对照组。采集受检者血清标本，通过酶联免疫吸附试验检测白细胞介素-17A（IL-17A）、 IL-17F、 IL-21、 IL-22、 IL-25的表达水平。结果　IL-17A、 IL-17F、 IL-21和IL-22在溃疡性结肠炎（UC）及克罗恩病（CD）患儿血清中表达明显升高，IL-25明显降低（P＜0.05）；IL-17A、 IL-17F及IL-21血清水平与UC患儿疾病活动度呈正相关（P＜0.05）；IL-21在UC患儿血清中的表达与IL-17A和IL-17F的表达呈正相关（P＜0.05）。结论　Th17相关细胞因子在IBD患儿血清中表达失调，为进一步研究Th17细胞在儿童IBD中的作用提供了依据；IL-17A、 IL-17F、 IL-21血清水平与UC患儿疾病活动度呈正相关，表明其可能是Th17细胞触发儿童UC的重要促炎细胞因子。     

Lycium barbarum extract promotes M2 polarization and reduces oligomeric amyloid-β-induced inflammatory reactions in microglial cells

Lycium barbarum(LB)is a traditional Chinese medicine that has been demonstrated to exhibit a wide variety of biological functions,such as antioxidation,neuroprotection,and immune modulation.One of the main mechanisms of Alzheimer’s disease is that microglia activated by amyloid beta(Aβ)transform from the resting state to an M1 state and release pro-inflammatory cytokines to the surrounding environment.In the present study,immortalized microglial cells were pretreated with L.barbarum extract for 1 hour and then treated with oligomeric Aβfor 23 hours.The results showed that LB extract significantly increased the survival of oligomeric Aβ-induced microglial cells,downregulated the expression of M1 pro-inflammatory markers(inducible nitric oxide synthase,tumor necrosis factorα,interleukin-6,and interleukin-1β),and upregulated the expression of M2 anti-inflammatory markers(arginase-1,chitinase-like protein 3,and interleukin-4).LB extract also inhibited the oligomeric Aβ-induced secretion of tumor necrosis factorα,interleukin-6,and interleukin-1βin microglial cells.The results of in vitro cytological experiments suggest that,in microglial cells,LB extract can inhibit oligomeric Aβ-induced M1 polarization and concomitant inflammatory reactions,and promote M2 polarization.     

莫西沙星联合信必可都保对AECOPD疗效及免疫炎症反应的影响

目的探讨维生素D(VitD)联合鱼油对糖尿病前期(PDM)患者糖脂代谢、胰岛β细胞功能的影响。 方法选取PDM患者132例,随机均分为联合组(VitD+鱼油)、VitD组(VitD)和对照组(不干预)。比较各组糖脂代谢、胰岛β细胞功能、炎症反应、血管内皮功能等指标。 结果与干预前比较,干预后联合组甘油三酯降低,白细胞介素-10增高(P＜0.05),联合组和VitD组低密度脂蛋白胆固醇、肿瘤坏死因子-α、胰岛素抵抗指数、前列腺素E2、瘦素、抵抗素降低(P＜0.05),空腹胰岛素、胰岛β细胞功能指数、脂联素增高(P＜0.05),且联合组改善更为明显(P＜0.05)。 结论维生素D联合鱼油治疗PDM患者可改善其脂代谢和胰岛功能相关指标,具有一定临床应用价值。