动脉粥样硬化与"痰瘀"病理

动脉粥样硬化(atheroselerosis,AS)是一组常见的血管病变,其共同特点是动脉发生了非炎症性、退行性和增生性的病变,导致管壁增厚变硬,失去弹性和管腔缩小.动脉粥样硬化的特点是在上述病变过程中,受累动脉的病变从内膜开始,先后有多种病变合并存在,包括局部有脂质和复合糖类积聚,出血和血栓形成,纤维组织增生和钙质沉着,并有动脉中层的逐渐退变和钙化.现代细胞和分子生物学技术显示动脉粥样硬化病变都具有平滑肌细胞增生,大量胶原纤维、弹性纤维和蛋白多糖等结缔组织基质形成,以及细胞内、外脂质积聚的特点[1].由于在动脉内膜积聚的脂质外观呈黄色粥样,因此称动脉粥样硬化.     

细胞胀亡(oncosis):一种不同于凋亡(apoptosis)的细胞死亡

凋亡是一种主动方式的程序性细胞死亡 ,它的形态特征为细胞固缩、核碎裂。近来 Majno提出一种表现为细胞肿胀和核溶解的细胞损伤过程 ,称之为胀亡 (oncosis)。目前 ,毒理病理学家认为凋亡和胀亡代表了两种不同的细胞死亡方式。本文对细胞胀亡的病理形态特征、生化改变和发生机制、分子调控的初步研究进展及其与凋亡的联系进行综述 ,以利于加深对细胞死亡方式的进一步认识     

SCID小鼠中牛瑟氏泰勒焦虫主要抗原蛋白编码基因酶谱分型

提取SCID小鼠血中被转移入的牛红细胞中瑟氏泰勒焦虫的组DNA，利用已知其主要表面抗原32k蛋白编码基因的5^#利3^#附近序列合成引物，经PCR方法扩增出其约900bp的基因片段，用胶纯化后两端加尾dC，和已加尾dG的pBR322质粒连接，转化入大髓杆菌IM109中．经含有四环素的培养基中挑选20—30个克隆后再经氨苄青毒素筛选出理想20～30个，在4ml LB基液中增殖经溶菌酶裂解，提取重组质粒，再用相同引物提取每个克隆中的基因片段，经HindⅡ．BglⅠ和KpnⅠ内切酶切割，电泳后依其酶谱，主要可分出两种图型，提示自然感杂牛红细胞的瑟氏泰勒焦虫主要抗原蛋白编码基因有差异，为制备疫苗奠定了基础。     

海德堡青光眼早期诊断随访仪HRT—Ⅱ原理及应用

控制青光眼最重要的挑战就是早期发现疾病，海德堡青光眼早期诊断随访仪可及时，无创伤地采用激光扫描照相机获得视盘三维图像。并可利用共焦激光技术测量定量分析和随访青光眼视盘改变。     

多焦视网膜电图在青光眼早期诊断中的应用

多焦视网膜电图（multifocalelectroretinogram，mfERG）在眼科领域的应用是视觉电生理学的一项重要新进展，用它评价视网膜外层和中层功能障碍（如视网膜营养不良）的价值已得到肯定。但用多焦视网膜电图检测主要以内层视网膜损害为主的青光眼，尤其是用于早期诊断，仍存在许多问题有待解决。本文介绍了多焦视网膜电图的基本原理、正常人多焦视网膜电图特征、青光眼及高眼压症多焦视网膜电图的改变以及多焦视网膜电图与青光眼视野缺损的关系。     

青光安颗粒剂含药血清对体外培养大鼠视网膜神经节细胞调亡的实验研究

目的为初步探讨中药青光安含药血清对体外培养视网膜神经节细胞(RGCs)的作用机制和为中药对青光眼的体外疗效研究提供一种新的研究方法。方法:不同浓度青光安颗粒剂和益脉康片剂给3月龄SD大鼠灌胃,获取不同含药浓度的大鼠血清;建立视网膜神经节细胞纯化培养的常压和高压模型,并用流式细胞仪(FCM)检测凋亡细胞百分率;利用流式细胞仪进行细胞凋亡中Bcl-2、Bax等凋亡蛋白的检查。结果:成功获取中药的含药血清,并将其用于视网膜神经节细胞的体外培养;成功分离并培养了视网膜神经节细胞纯化培养模型,RGCs的混合培养最长可存活3-6周,RGCs的纯化培养可存活时间4-7天;成功对纯化培养的细胞进行压力造模。压力20mmHg、40mmHg、60mmHg、80mmHg,加压时间1-4小时均能促进RGCs的凋亡,其凋亡细胞的数目以80mmHg、4小时为最多(P<0．01)。含药血清作用于纯化培养的视网膜神经节细胞后,Bcl-2的表达随青光安含药浓度的增高而增高,Bax的表达随青光安含药浓度的增高而降低。结论:压力能促进RGCs的凋亡,其凋亡细胞的数目随压力的增大、加压时间的延长而增加;青光安含药血清能延缓RGCs的凋亡,对其有保护作用;利用含药血清对体外培养的细胞进行试验,是中药药效试验的重要方法之一。     

EGF对急性胰腺炎大鼠肠道细胞凋亡的影响

目的:探讨表皮生长因子(EGF)对急性胰腺炎(AP)大鼠肠道细胞凋亡影响的机理。方法:72只雄性SD大鼠AP模型随机分为3组:对照组(仅开腹翻动胰腺,n=24)、AP组(n=24)及APEGF组(n=24)。APEGF组皮下注射EGF0.1μg·g-1,其余两组动物皮下注射相同体积的生理盐水。每次8只大鼠分别于术后6h、12h、24h剖杀取材,经心脏取血2ml,采用全自动生化分析仪检测血清淀粉酶,以干纱布吸沾腹水法测量腹水量。从屈氏韧带远侧10cm处开始取2cm空肠,观测空肠组织细胞凋亡;另取10cm空肠,检测空肠粘膜MDA(丙二醛)含量。结果:术后12h及24h,APEGF组动物腹水量显著低于AP组(P<0.05,P<0.01),APEGF组动物血清淀粉酶也显著低于AP组(P<0.05,P<0.01);术后24h,APEGF组动物血浆、空肠组织MDA含量均显著低于AP组;术后12h及24h,空肠粘膜凋亡指数显著低于AP组。结论:EGF能迅速恢复血清淀粉酶正常活性,降低AP大鼠血浆、肠粘膜组织MDA含量,减轻AP所致的肠粘膜细胞凋亡损害。     

重组型Caspase3对U251胶质瘤细胞促凋亡作用

目的探讨由野生型人Caspase3大小亚基颠倒构建的重组型Caspase3促U251胶质瘤细胞的调亡活性。方法运用分子克隆技术,使Caspase3基因大小亚基颠倒构建,并将重组基因克隆入绿色荧光蛋白(GFP)真核表达载体pcDNA3.1中,转染人U251胶质瘤细胞。利用透射电镜和流式细胞仪观察胶质瘤细胞凋亡的生物学特征。结果成功地获得了重组型反向Caspase3基因。经限制酶酶切分析鉴定释放330及550bp片段,PCR法鉴定反向重组成功;构建了重组型Caspase3基因的真核表达载体,转染U251胶质瘤细胞后,重组型Caspase3基因在细胞中表达,电镜显示细胞呈现凋亡的典型形态学特征。流式细胞仪可见细胞凋亡峰。结论重组型Caspase3可促进U251胶质瘤细胞的凋亡。     

多沙唑嗪诱导前列腺癌细胞的调亡

丛生蛋白是一种与调亡有关的多功能糖蛋白,可以诱导多种细胞发生调亡.为了研究经25μmol/L多沙唑嗪处理的雄激素非依赖性前列腺癌细胞(PC-3)中,丛生蛋白的表达水平与PC-3细胞调亡之间的关系,Youm等进行了一项研究,研究者应用DNA碎裂片段,逆转录聚合酶链反应,末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记技术(TUNEL)来评估细胞调亡的程度和丛生蛋白mRNA及蛋白质的基因时空表达.     

大肠癌组织中细胞胀亡及MMP-2检测

目的 :检测大肠癌组织中胀亡细胞及MMP - 2。方法 :应用透射电镜和免疫组化方法检测 5 1例大肠癌组织中胀亡细胞和MMP - 2的表达。结果 :①大肠癌组织中可检测到不同时期的胀亡细胞。②大肠癌组织中MMP- 2表达率 5 4 .9% (2 8/ 5 1 ) ,明显高于正常大肠粘膜 (P <0 .0 5 )。③MMP - 2在淋巴结转移组的阳性表达率为 6 9.5 7% (1 6 / 2 3) ,明显高于无淋巴结转移组的 4 2 .86 % (1 2 / 2 8) ;有淋巴结转移组胀亡指数明显低于无淋巴结转移组 (P<0 .0 5 )。④MMP - 2表达阳性组OI高于MMP - 2阴性组。结论 :大肠癌组织中存在胀亡细胞和MMP - 2的表达 ,2者关系密切 ,且均与大肠癌的转移有关。