大鼠骨髓间充质干细胞转染人TH基因的实验研究

目的评价酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)基因修饰骨髓间充质干细胞(mesenchymalstem cells,MSCs)后TH的表达情况及转染TH基因对MSCs的影响.方法构建含人TH基因的pCMV/hTH质粒,用脂质体转染原代培养的大鼠MSCs;Western blot及免疫细胞化学染色鉴定TH基因的表达及MSCs的分化情况;MTT比色法测定转染后的MSCs细胞活性,并与未转染的MSCs进行细胞活性比较.结果构建的pCMV/hTH质粒经ECoRI酶切后产生1.9okb和5.3kb的片段,与回收的目的基因及载体基因片段大小相符;转基因后的MSCs Western blot及免疫细胞化学染色显示TH染色阳性;转染后MSCs未见有NeuN,GFAP的表达;MTT比色法测定细胞活性,未转染与转染者差异无显著性.结论构建的TH基因能在体外培养的鼠MSCs中较好的表达,转染不会诱导MSCs向神经样细胞分化,对MSCs细胞活性无明显影响.     

改良的紫外荧光光度计法检测小鼠血清中多巴胺β经化酶活性的方法

目的：介绍一种简便的检测小鼠血清中多巴胺β羟化酶(DβH)活性的方法。方法：用国产的强酸性苯乙烯阳离子交换树脂代替Dowex TP^ 进行一系列转型处理后检测DβH活性。结果：改良的紫外荧光光度法可有效检测小鼠血清中含量较低(nmol水平)的DβH活性。结论：改良的紫外荧光光度法检测血清中DβH结果准确、操作简便。     

芳香烃羟化酶活性与苯并[a]芘中间代谢产物生成关系的研究

100mg香烟烟油,多氯联苯诱导大鼠肝S_9组分中芳香烃羟化酶代谢B[a]P为3-OH-B[a]P的活性分别升高约40,20倍,而代谢B[a] P生成6-OXY-B [a]P自由基产物却仅由多氯联苯诱导的S_9组分作用中才被观察到。     

老年大鼠脑内肾上腺素能神经递质系统的变化

本文从下丘脑、大脑皮层、海马等脑区去甲肾上腺素(NA)的含量,其合成酶与降解酶的活性、NA受体数目等多环节的测定来分析肾上腺素能神经递质系统在老化脑中的变化。实验结果表明衰老过程下丘脑、大脑皮层内NA合成酶活性没变化,NA含量明显增高,下丘脑内α_1受体数目显著减少。上述结果提示这些脑区肾上腺素能神经的活动有可能减弱。同时,海马内单胺氧化酶B(MAO B)活性明显增加,说明海马神经元外组织有增生的可能。泰文并讨论了这些变化与老年记忆、行为与神经内分泌等脑功能衰退的关系。     

东方人苯丙酮尿症的分子遗传学—苯丙氨酸羟化酶基因中一终止突变与单体型4的连锁不平衡性

应用聚合酶链反应(PCR)方法扩增苯丙氨酸羟化酶(PAH)基因的每个外显子及其侧翼的内含子,并克隆到M 13载体中进行序列分析。发现中国人苯丙酮尿症(Phenylketonuria,PKU)患者的PAH基因外显子3中有1个Arg~(111)→Ter~(111)的点突变,此突变与东方人最常见的突变单体型4呈连锁不平衡。此突变占中国人PAH等位基因的10％左右,但不存在于高加索人群中,表明在种族分化过程中PAH基因位点发生了互不相关的突变事件。     

Nurrl的研究进展

Nur相关因子1（Nurr1)属于孤儿核受体的超家族，人类Nurrl基因位于2号染色体，有8个外显子，在中枢神经系统内有广泛表达，与中脑多巴胺能神经元的发生、发育和存活有密切关系。本文对Nurrl的分子结构、分布、生理功能以及与多巴胺能神经元显型的关系作一综述。     

不同类型精神分裂症患者脑脊液色氨酸及其与竞争性氨基酸比值对照研究

应用高压液相色谱（ＰＨＬＣ）对４２例阳性精神分裂症患者、２５例阴性精神分裂症患者及１０例健康正常对照组脑脊液中色氨酸（Ｔｒｙｔｏｐｈａｎ，ＴＲＰ）和酪氢酸（Ｔｙｒｏｓｉｎｅ，Ｔｙｒ）进行测试，其中ＴＲＰ／Ｔｙｒ被作为两者竞争指数，结果提示阳性、阴性精神分裂症患者脑脊液中Ｔｙｒ显著性降低，而ＴＲＰ则无显著性变化。但发现阳性精神分裂症患者的ＴＲＰ／Ｔｙｒ比值显著高于正常对照组，也显著高于阴性精神分裂症患者，本文结合ＴＲＰ／Ｔｙｒ的意义与价值进行了讨论。     

丘脑底核高频电刺激对大鼠纹状体多巴胺代谢影响的研究

目的研究丘脑底核(STN)高频电刺激(HFS)对大鼠纹状体多巴胺(DA)代谢的影响。方法给予正常大鼠一侧STN-HFS,应用微透析观察其对纹状体DA及其代谢产物的影响,应用免疫组化观察其对黑质DA能神经元的影响。结果微透析检测发现刺激侧纹状体DA代谢产物明显增高(P<0.05),DA水平无变化(P>0.05);免疫组化检测发现刺激组和对照组酪氨酸羟化酶(TH)阳性神经元数量无差异(损毁侧分别为24.00±6.81、23.43±5.49,P>0.05)。结论STN-HFS可能通过影响黑质-纹状体DA代谢发挥作用,STN-HFS对黑质DA能神经元可能无保护作用。     

精神分裂症异质性及其中枢五羟色胺功能研究

本文应用高效液相色谱(HPLC)对67例精神分裂症及10例健康对照组脑脊液中色氨酸(TRP)、五羟色胺(5-HT)、五羟吲哚乙酸(5-HIAA)进行测试,同时引入5-HT相对代谢率概念用5-HIAA/5-HT表示,并以Andreasen分型标准划分42例阳性精神分裂症和25例阴性精神分裂症。结果发现,精神分裂症患者脑脊液中TRP明显低于正常对照组,阳性(Ⅰ型)分裂症5-HIAA以及5-HIAA/5-HT明显低于阴性(Ⅱ型)精神分裂症,并对精神分裂症的5-HT代谢障碍假说及其异质性进行了讨论。