Rab25基因siRNA表达载体的构建鉴定及在人卵巢癌细胞A2780中的表达

目的为研究Rab25基因的功能及卵巢癌的基因治疗,构建针对Rab25基因的siRNA表达载体,转染细胞A2780后观察其对Rab25基因表达的抑制作用,为探索卵巢癌基因治疗的新途径打好基础。方法根据基因库上的Rab25mRNA序列,设计并合成两端含有酶切位点的64个碱基的寡核苷酸链。寡核苷酸链退火后用T4DNA连接酶连接到线性化的pSUPER质粒中,并对重组质粒(命名为pSUPER/Rab25siRNA)进行酶切及序列鉴定,后转染卵巢癌细胞A2780,RT-PCR检测转染前后Rab25的表达情况。结果双酶切证实Rab25siRNA表达载体克隆构建成功,插入片段测序结果与合成的siRNA结果一致。RT-PCR检测显示转染卵巢癌细胞A2780后有效抑制了Rab25基因的表达。结论成功构建Rab25siRNA表达载体,为卵巢癌基因治疗开辟新途径。     

肝细胞肝癌组织中p34cdc2表达及其与细胞增殖和凋亡的关系

目的:探讨p34cdc2激酶在肝细胞肝癌(HCC)发生发展中的作用及与增殖和凋亡的关系. 方法:收集HCC(含癌旁组织42)标本47例,正常肝组织10例,采用免疫组织化学SP法显示p34cdc2激酶的表达并结合增殖与凋亡特征进行分析. 结果:在肝癌组织、癌旁肝组织及正常肝组织细胞中p34cdc2表达定位于胞质中,在癌组织中过表达,差异有统计学意义(P＜0.01). 肝癌、癌旁组织中的增殖指数(PI)分别为(30.34±4.46)%与(27.88±5.89)%,肝癌组织明显高于癌旁组织(P＜0.05);肝癌、癌旁组织中的凋亡指数(AI)分别为(8.62±2.28)%与(7.38±2.61)%,肝癌组织明显高于癌旁组织(P＜0.05);p34cdc2蛋白阳性组PI(49.26±4.81)%显著高于阴性表达组(23.07±4.15)%(P＜0.05),AI无明显差异(P＞0.05). 结论:HCC中增殖与凋亡均高于癌旁组织;p34cdc2和PCNA一样可作为反映HCC细胞分裂增殖能力的有效指标;p34cdc2并不是HCC凋亡所必须.     

浅谈护理本科生临床教学中的几个重要环节

临床护理教学是护理本科生培养过程中的一个重要阶段,重视护理本科生临床教学的岗前教育、带教教师的选拔、职业情感及能力的培养、实习末期本科生的教育与管理等重要环节,对全面提高护理本科生的临床实习效果和临床护理教学质量至关重要。     

七年制医学生内科见习教学实践与思考

通过教学实践总结七年制医学生内科见习教学的经验,包括重视培养七年制学生临床思维能力、应用病案讨论教学法、讲授与临床见习相结合、充分利用网络和计算机等教学手段、提高学生与患者的沟通能力、及时调整带教方案等,旨在进一步提高七年制内科见习教学的效果。     

在医学院校开设肿瘤学课程的重要性及必要性

随着人们生活水平的提高,肿瘤病在人群中的发病率及死亡率也日渐增高,肿瘤已经成为21世纪对人类健康威胁最大的疾病。在我国,医学院校肿瘤学课程设置及教学相对滞后。为此,本文从肿瘤学的现状和肿瘤的诊断及治疗的进展等方面出发,阐述了医学院校开设肿瘤学课程的重要性和必要性。     

高血压大鼠和高血压患者血管平滑肌α肾上腺素受体的反应性增强作用

目的研究高血压状态下血管平滑肌α肾上腺素能受体的反应性增强作用。方法用敏感的离体血管张力描记技术记录大鼠肠系膜动脉和人大网膜动脉的张力，用实时定量的逆转录聚核酶链反应技术测定动脉平滑肌的mRNA水平，用动脉的器官培养方法研究α受体反应性增强的机制。结果自发性高血压大鼠(SHR)的肠系膜动脉环对去甲肾上腺素(NA)的反应性明显强于WKY大鼠，NA对SHR肠系膜动脉平滑肌的最大收缩(E_max)是WKY大鼠E_max的1.82倍；高血压患者大网膜动脉对NA的反应性明显高于非高血压患者，NA的量效曲线显著左移，pD₂值显著高于非高血压患者。SD大鼠肠系膜动脉的器官培养后对NA收缩反应增强，E_max增高，且培养后α₁受体的mRNA水平增高，而α₂受体的mRNA水平无明显变化。结论高血压状态下血管平滑肌α受体的反应性增强，提示α受体上调。     

医学影像学专业基础教学与理工学科相联系的初探

以现代医学为基础,重视多学科交叉融合,与相关的理工学科相结合的基本理念,是培养医学影像学专业发展方向之一,在课程设计、基础理论、应用实践等方面应有别于传统临床医学专业培养模式,以适应现代医学影像学的发展。     

L型钙通道α1C亚单位在成年大鼠心脏中的表达

目的 研究L型钙通道α1C亚单位在成年大鼠心脏中的空间表达情况。方法制备成年大鼠心脏冰冻切片，结合大体位置和HE染色结果快速辨认出窦房结、房室结和结后延伸，采用免疫荧光和免疫印迹技术检测L型钙通道α1C亚单位在大鼠窦房结、房室结、结后延伸、右房、右室的表达，用共聚焦显微镜观察其表达部位，通过凝胶成像及图像分析系统对实验结果进行分析。结果荧光呈现点状、斑状或不规则的短线状，主要分布于细胞膜及细胞内的膜性结构，其荧光强度由弱到强依次为窦房结、房室结、结后延伸、右心房、右心室，房室结和结后延伸之间无显著性差异（P〉0．05），其余两两相比均有显著差异（P〈0．05），其中右心房、有心室明显强于窦房结、房室结和结后延伸（P〈0．01）。各部位在相对分子质量200000左右可见一特异性蛋白条带。对蛋白条带进行灰度值分析，结果与免疫荧光相一致。结论L型钙通道α1C亚单位在成年大鼠心脏分布广泛，在不同部位表达量不同，在工作肌组织的表达量明显高于传导组织．提示钙电流在心脏不同部位有不同的分子基础.     

宁夏回族5个Y-STR基因座及单倍型遗传多态性分析

目的:研究宁夏回族5个Y-STR基因座及单倍型遗传多态性,估价它们在法医学中的应用价值和丰富中华民族基因信息资源.方法:调查宁夏回族101个无关、健康男性个体.研究5个Y-STR基因座基因及单倍型频率分布.每个基因座的引物分别用FAM,HEX或TAMRA荧光标记,通过复合扩增、基因扫描、基因分型和遗传多态性分析获得数据.结果:5个Y-STR基因座共检测到29个等位基因,频率分布在0.0099～0.5446.101个个体共检测到94个单倍型,87个是唯一的,有7个单倍型被检测2次.单倍型的多样性为0.9986.结论:该数据可以很好的应用于法医学个体识别和亲权鉴定以及群体遗传学研究.     

阻断Kv1.3和Kir2.1抑制人巨噬细胞源性泡沫细胞分化

目的:研究泡沫细胞分化过程中离子通道Kv1.3和Kir2.1的表达及作用。方法:用30mg/L氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)孵育巨噬细胞60h建立泡沫细胞模型。采用免疫细胞化学、RT-PCR和Western印迹检测人单核细胞源性巨噬细胞和泡沫细胞上Kv1.3和Kir2.1的表达。观察Kv1.3和Kir2.1特异性阻断剂rMargatoxin和BaCl2对巨噬细胞胆固醇代谢的影响。结果:ox-LDL(30mg/L)孵育巨噬细胞60h后,细胞内总胆固醇(TC),游离胆固醇(FC)及胆固醇酯(CE)显著增加,CE/TC从(14.4±6.8)%提高到(57.9±3.5)%(P<0.05);但Kv1.3和Kir2.1的表达水平在巨噬细胞组和泡沫细胞组无明显区别(P>0.05)。Kv1.3和Kir2.1分别被rMargatoxin(0.1,10nmol/L)和BaCl2(75,125μmol/L)阻断后,细胞内TC和CE水平显著降低,CE/TC低于50%(P<0.05)。结论:Kv1.3和Kir2.1对泡沫细胞的分化均起关键作用,特异性阻断后能够抑制人单核细胞源性巨噬细胞向泡沫细胞分化。